Solide plaque à base de restriction alimentaire Caenorhabditis elegans</em
Summary
Nous présentons ici un protocole pour la réalisation solide plaque de base de la restriction alimentaire au<em> C. elegans</em> Avec des bactéries tuées.
Abstract
Réduction de la consommation d'aliments sans malnutrition ou de famine est connue pour augmenter la durée de vie et de retarder l'apparition de diverses maladies liées au vieillissement dans une large gamme d'espèces, y compris les mammifères. Elle entraîne également une diminution du poids corporel et de la fertilité, ainsi que des niveaux plus bas de glucose plasmatique, l'insuline et l'IGF-1 chez ces animaux. Ce traitement est souvent désigné comme la restriction alimentaire (DR) ou de la restriction calorique (RC). Le nématode Caenorhabditis elegans est apparu comme un organisme modèle important pour étudier la biologie du vieillissement. Manipulations environnementaux et génétiques ont été utilisées pour modéliser DR et ont montré de prolonger la durée de vie en C. elegans. Cependant, la plupart des études ont rapporté DR en C. elegans ont été réalisées en propageant des animaux dans des milieux liquides, tandis que la plupart des études génétiques dans le domaine du vieillissement ont été réalisés sur la gélose standard de solide dans des boîtes de Pétri. Nous présentons ici un protocole standard de DR à l'aide NGM solides à base de gélose plaque avec des bactéries tuées.
Protocol
Discussion
La restriction alimentaire (DR) est connu pour augmenter la durée de vie et de retarder l'apparition de diverses maladies liées au vieillissement dans une large gamme d'espèces, y compris les mammifères 5-7. Manipulations environnementaux et génétiques ont été utilisées pour modéliser DR en C. elegans, y compris les vers de culture dans un milieu semi-défini de liquide 8,9, la dilution de la source de nourriture des bactéries en milieu liquide 10-12, et l'…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par une bourse de pilote de Centre de choc Nathan (P30 AG13283) et une subvention R01 (R01 AG028516) du National Institute on Aging (NIA) à A.-LH
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Carbenicillin | Duchefa Biochemie | C0109.25 | Dissolved in water. |
| Kanamycin | Roche | 10106801001 | Dissolved in water. |
| Bacto-peptone | Becton, Dickinson and company | DF0118072 | |
| Bacto-tryptone | Becton, Dickinson and company | DF0123075 | |
| Bacto-yeast extract | Becton, Dickinson and company | DF0127071 | |
| Agar | Becton, Dickinson and company | DF00145170 | |
| Sterile culture tube | USA Scientific | 1485-0810 | |
| Spectrophotometer | Amersham Biosciences | Gene Quant pro | Amersham is now part of GE Healthcare. |
| Dissecting Microscope | Zeiss | Stemi 2000 | |
| Centrifuge | Beckman Coulter | Accuspin FR |
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