Insulin-Injektion und Hämolymphe Extraction die Insulinsensitivität in Adult Measure Drosophila melanogaster</em
Summary
Konservierte Insulin-Signalwege in der Fruchtfliege gefunden<em> Drosophila melanogaster</em> Make dieser Organismus ein potentielles Werkzeug für die Modellierung von Stoffwechselerkrankungen wie Typ II Diabetes. Zu diesem Zweck ist es wichtig, physiologische Tests zu etablieren, um effektiv zu messen systemischen Wirkung von Insulin in peripheren Glukose zur Verfügung in die erwachsene Fliege.
Abstract
Konservierte Nährstoff sensing Mechanismen existieren zwischen Säugetier und Fruchtfliege, wo Peptide ähnlich Säugetieren Insulin und Glukagon bzw. Funktion, um Glukose-Homöostase während der Entwicklung Larvenstadien 1,2 zu halten. Studien zu weitgehend post-mitotischen erwachsenen Fliegen haben Störung des Glukose-Homöostase als Ergebnis des genetischen Ablation von Insulin-like peptide (ILP) produzierenden Zellen (IPCs) 3 enthüllt. So halten erwachsenen Fruchtfliegen großes Versprechen als eine geeignete genetische Modellsystem für Stoffwechselstörungen wie Diabetes Typ II. Zur weiteren Entwicklung der Fruchtfliege System, müssen vergleichbare physiologische Tests verwendet werden, um die Glukosetoleranz und Insulinsensitivität bei Säugetieren messen eingerichtet werden. Zu diesem Zweck haben wir kürzlich ein neues Verfahren zur Messung der oralen Glukosetoleranztest Reaktion in die erwachsene Fliege beschrieben und demonstriert die Bedeutung der Erwachsenenbildung IPCs bei der Aufrechterhaltung Glukosehomöostase 4,5. Hier haben wir ein zuvor beschriebenes Verfahren zur Insulin-Injektion 6 modifiziert und kombiniert es mit einem neuartigen Hämolymphe-Extraktions-Verfahren der peripheren Insulinsensitivität in der erwachsenen Fliegen zu messen. Einzigartig ist, ermöglicht es unseren Protokoll direkte physiologische Messungen der Erwachsenen fliegen die Fähigkeit eines peripheren Glukose-Last auf Insulin-Injektion, eine Methodik, die es möglich, Insulin-Signalkaskade Mutanten und möglichen Interventionen beeinflussen Glukosetoleranz und Insulinsensitivität in die erwachsene Fliege zu charakterisieren, macht entsorgen.
Protocol
Discussion
Die Technik in diesem Bericht beschrieben wird, potentiell nützlich in jeder Studie, die physiologischen Prozesse sich in nachweisbaren Veränderungen in Drosophila Hämolymphe Zusammensetzung untersucht. Durch die Kombination von Injektions-und Hämolymphe Sammlung auf diese Weise ist es möglich, die unmittelbare physiologisch relevanten Auswirkungen einer bestimmten experimentellen Behandlung oder Manipulation zu ermitteln. Der primäre Vorteil dieser "Aderlass"-Technik in Hämolymphe Sammlung im …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse aus dem NIA zu YW.CF (AG21068, AG31086) unterstützt.
Materials
| Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number |
|---|---|---|
| Bovine insulin | Sigma | I5500 |
| Infinity Glucose Reagent | Thermo Electron Corporation | TR1541 |
| Manual microinjector | Sutter Instrument | |
| P-87 Flamming/Brown micropipette puller | Sutter Instrument | |
| Single barrel borosilicate capillary glass | A-M Systems | 626000 |
| FD&C Blue No. 1 | McCormick & Company | |
| 1 μl microcapillary tubes | Drummond | |
| Three-axis manual micromanipulator and base | World Precision Instruments |
References
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