Inyección de insulina y extracción hemolinfa para medir la sensibilidad a la insulina en adultos Drosophila melanogaster</em
Summary
Señalización de la insulina conserva las vías se encuentran en la mosca de la fruta<em> Drosophila melanogaster</em> Hacer de este organismo una herramienta potencial para el modelado de los trastornos metabólicos como la diabetes tipo II. Con este fin, es fundamental para establecer pruebas fisiológicas para medir efectivamente la acción sistémica a la insulina en la utilización de glucosa periférica en la mosca adulta.
Abstract
Conserva los mecanismos de detección de nutrientes existen entre los mamíferos y mosca de la fruta que se asemeja péptidos de mamíferos insulina y el glucagón, respectivamente, la función de mantener la homeostasis de la glucosa durante el desarrollo de 1,2 estadios larvarios. Los estudios sobre las moscas adultas en gran medida post-mitótico han puesto de manifiesto la perturbación de la homeostasis de la glucosa como resultado de la ablación genética de la insulina-like peptide (ILP) que producen las células (IPC) 3. Por lo tanto, las moscas adultas frutas son una gran promesa como un sistema modelo adecuado genética de los trastornos metabólicos como la diabetes tipo II. Para seguir desarrollando el sistema de mosca de la fruta, comparable pruebas fisiológicas para medir la tolerancia a la glucosa y la sensibilidad a la insulina en los mamíferos se debe establecer. Con este fin, recientemente se ha descrito un nuevo procedimiento para medir la respuesta de tolerancia oral a la glucosa en la mosca adulta y han demostrado la importancia de la IPC para adultos en el mantenimiento de la homeostasis de la glucosa 4,5. Aquí, se ha modificado el procedimiento descrito anteriormente para la inyección de insulina 6 y lo combinó con un método de extracción de hemolinfa novela para medir la sensibilidad periférica a la insulina en la mosca adulta. Excepcionalmente, el protocolo permite dirigir las mediciones fisiológicas de la capacidad de la mosca adulta de disponer de una carga de glucosa periférica tras la inyección de insulina, una metodología que hace que sea factible para caracterizar mutantes señalización de la insulina y las posibles intervenciones que afectan la tolerancia a la glucosa y la sensibilidad a la insulina en la mosca adulta.
Protocol
Discussion
La técnica descrita en este informe es potencialmente útil en cualquier estudio que investiga los procesos fisiológicos que resulta en alteraciones detectables en la composición de la hemolinfa de Drosophila. Mediante la combinación de la inyección y recolección de la hemolinfa de esta manera, es posible determinar los efectos inmediatos fisiológicamente relevantes de un determinado tratamiento experimental o manipulación. La principal ventaja de esta "sangría" técnica en la recolección de…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por subvenciones del Servicio Nacional de YW.CF (AG21068, AG31086).
Materials
| Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number |
|---|---|---|
| Bovine insulin | Sigma | I5500 |
| Infinity Glucose Reagent | Thermo Electron Corporation | TR1541 |
| Manual microinjector | Sutter Instrument | |
| P-87 Flamming/Brown micropipette puller | Sutter Instrument | |
| Single barrel borosilicate capillary glass | A-M Systems | 626000 |
| FD&C Blue No. 1 | McCormick & Company | |
| 1 μl microcapillary tubes | Drummond | |
| Three-axis manual micromanipulator and base | World Precision Instruments |
References
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