Summary

पोलियो वायरस की पहचान के लिए कण समूहन विधि

Published: April 20, 2011
doi:

Summary

हाल ही में विकसित उपन्यास कण समूहन (PA) वायरस के रिसेप्टर अणु उपयोग परख पोलियो वायरस (पीवी) की एक तेजी से और आसानी से पहचान की अनुमति दी. इस अनुच्छेद में, हम पहचान के लिए पी.वी. पीए परख के लिए प्रक्रिया को दिखा देंगे.

Abstract

वैश्विक पोलियो उन्मूलन पहल में, प्रयोगशाला निदान अलग और तीव्र झूलता हुआ पक्षाघात मामलों (एएफपी) के मल के नमूने से पी.वी. की पहचान के द्वारा एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है. विश्व स्वास्थ्य संगठन (डब्ल्यूएचओ) के वैश्विक पोलियो प्रयोगशाला नेटवर्क, पी.वी. अलगाव और पहचान वर्तमान में सेल संस्कृति प्रणाली और वास्तविक समय RT-पीसीआर, क्रमशः का उपयोग करके प्रदर्शन किया जा रहा है. पी.वी. के उन्मूलन के बाद के युग में, राष्ट्रीय प्रयोगशालाओं में पोलियो मामलों की पुष्टि के लिए तेजी से सरल और तेजी से पहचान की प्रक्रिया उपयोगी होगा. वर्तमान अध्ययन में, हम पहचान के लिए पी.वी. विकसित उपन्यास पीए परख की प्रक्रिया दिखाएगा. यह पीए परख पी.वी. रिसेप्टर अणु (पीवीआर) और virion है कि पी.वी. के सभी सीरमप्रकारों के लिए विशिष्ट और वर्दी आत्मीयता की बातचीत का इस्तेमाल. प्रक्रिया सरल है (प्रतिक्रिया प्लेटों में एक कदम प्रक्रिया) है और तेजी से (परिणाम प्रतिक्रिया के 2 घंटे के भीतर प्राप्त किया जा सकता है), और परिणाम नेत्रहीन (जिलेटिन कणों के समूहन का अवलोकन) मनाया जाता है.

Protocol

1. रखरखाव के माध्यम तैयार करना (एम एम) और विकास मध्यम (जीएम) एमएम और जीएम की तैयारी के लिए, 1 डब्ल्यूएचओ के एक पोलियो प्रयोगशाला पुस्तिका देखने के लिए कृपया. Dulbecco संशोधित ईगल मध्यम (DMEM) 2% भ्रूण बछ?…

Discussion

इस पीए परख के अद्वितीय बिंदु 2 पी.वी. का पता लगाने के के लिए पीवीआर अणु के बजाय विरोधी पी.वी. एंटीबॉडी के उपयोग है. यह पी.वी. 3-6 के सभी तीन सीरमप्रकारों के लिए एक समान आत्मीयता के साथ अवगत जिलेटिन पी.वी. कण?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

हम उसे उत्कृष्ट तकनीकी सहायता के लिए Junko वाडा आभारी हैं. हम पीवीआर – IgG2a के लिए एक baculovirus अभिव्यक्ति वेक्टर प्रदान करने के लिए कृपया प्रो Akio Nomoto के लिए आभारी हैं. इस अध्ययन में भाग अनुदान द्वारा समर्थित किया गया पोलियो उन्मूलन के संवर्धन और उभरते और पुनः उभरती स्वास्थ्य, श्रम और कल्याण मंत्रालय से संक्रामक रोगों पर अनुसंधान के लिए सहायता.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Sensitized-gelatin particles Fujirebio Inc.   Test kit
Reconstitution buffer Fujirebio Inc.   Test kit
Microtitration plate Fujirebio Inc.   Test kit
Anti-PV antibody RIVM    

References

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Citer Cet Article
Arita, M., Masujima, S., Wakita, T., Shimizu, H. Particle Agglutination Method for Poliovirus Identification. J. Vis. Exp. (50), e2824, doi:10.3791/2824 (2011).

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