Summary

Cecal 내고의 찔린 절차

Published: May 07, 2011
doi:

Summary

인간 패혈증 연구에 유용한 도구로 cecal 내고 주사의 마우스 모델입니다.

Abstract

인간 패혈증은 로컬 호스트에 의해 포함된 것으로 실패 집중적이고 대규모 감염에 대응 체계 반응의 집합이 특징입니다. 현재, 미국 집중 치료 단위 1 사망률의 10 대 원인 중 패혈증 순위. 패혈증 동안 중복 수 있습니다이 설립 haemodynamic 단계가 없습니다. 초기 단계는 (hyperdynamic) macrophages 및 혈관 투과성 (저혈압에 이르는), 심장 기능에 영향을 미치는 조직의 괴사 및 기관 고장에 culminating 대사 변화를 유도 neutrophils에 의해 전염증성 크린 시토킨 및 반응 산소 종의 대량 생산으로 정의됩니다. 따라서 사망의 가장 흔한 원인은 급성 신장 손상입니다. 두 번째 단계는 (hypodynamic) 변경 단핵구 항원 프레 젠 테이션과 관련된 방지 염증 과정입니다, 림프구 증식과 기능을 증가 apoptosis 감소. immunosuppression 또는 면역 우울증으로 알려진이 상태가 급격히 nocosomial 감염 궁극적으로, 죽음의 위험을 증가시킵니다. 이러한 pathophysiological 프로세스의 메커니즘을 잘 묘사되지 않습니다. 패혈증의 두 단계가 돌이킬하고 치유할 수없는 손상을 입힐 수 있기 때문에, 그것은 환자의 면역 및 생리 상태를 확인하는 것이 필수적입니다. 이것은 많은 치료 약물들이 실패한 주요 이유입니다. 패혈증의 다른 단계에 주어진 동일한 약물 치료하거나 유해하거나 영향을 2,3도가 없습니다. 다양한 수준에서 패혈증을 이해하기 위해서는 질병의 임상 과정을 재현한 적합하고 종합적인 동물 모델을 가지고 중요 수도 있습니다. 패혈증 동안 발생 pathophysiological 메커니즘을 특징하고 잠재적인 치료 대리인 테스트를위한 모델 조건을 제어하는​​ 것이 중요합니다.

인간 패혈증 연구의 병인을 연구하기 위해서는 다양한 동물 모델을 개발했습니다. 가장 널리 사용되는 임상 모델은 cecal 내고 주사 (CLP)입니다. CLP 모델은 복막 캐비티에 지저분한 소재의 출시 polymicrobial 감염에 의해 유발 악화 면역 반응을 생성하는 허용이게 맹장의 천공으로 구성되어 있습니다. 이 모델은 임상적으로 관련이 인간 조건을 실현. 인간에서와 마찬가지로, 액체 인공 호흡과 함께 CLP를 받아야 쥐가 시간에서 두 번째로 (후반) hypodynamic 단계로 진행되는 첫 번째 (초) hyperdynamic 단계를 보여줍니다. 또한, 시토킨 프로필 림프구 apoptosis를 (4,5에서 검토)가 증가 어디 인간 패혈증에서 본 것과 유사합니다. 패혈증에 관련된 여러과 중복 메커니즘으로 인해, 연구자들은 일관성과 재현성 결과를 얻기 위해서는 통제 심각 적합한 패혈증 모델이 필요합니다.

Protocol

1. 인간 패혈증의 마우스 모델로 Cecal 내고 주사 이 절차에 대한 C57BL / 6 마​​우스 (이전 7-9주)이 사용됩니다. intraperitoneally에게 1시 1분 케타민 (75mg/kg)과 xylazine (15mg/kg)의 솔루션을 주입하여 마우스를 마취. 참고로, 20g 무게 마우스로 1시 1분 솔루션을 30 μl를 주입. 또는, 마우스는 마취 기화기를 사용하여 흡입 isoflurane과 anesthetized 수 있습니다. 마우스의 복부?…

Discussion

여기 우리는 생쥐에서 CLP 모델을 수행하는 방법을 자세히 표시하고 심각의 등급을 조절.

패혈증의 다른 동물 모델에 비해 CLP 서로 다른 연령과 성별의 마우스 변형에서 수행할 수 있습니다. 그것은 상대적으로 간편하고 저렴한 수술입니다. 이 모델에서는, 심각도의 등급 생존의 비율에 직접적인 영향을 미치고 있습니다. 결합의 길이는 바늘과 구멍의 개수의 두께는 심각 / CL…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 작품은 건강의 펜실베니아 부서에서 교부금에 의해 지원되었다.
박사 미겔 가르시아 토스 카노이 연구 중에 알폰소 마틴 Escudero 재단에 의해 후원 템플 대학에서 박사 후 연구원였다.
우리는 비디오의 제작을위한 Iliya Yordanov 케빈 Kotredes 감사드립니다.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Ketamine Ketaset 0856-2013-01  
Xylazine AnaSed NADA# 139-236  
Insulin syringe 29G Exel 26028  
Silk suture, 6-0 PROLENE Ethicon 8680G  
19G and 25G Needle BD 305186  
Shaver General supply General supply  
Infrared Heating lamp General supply General supply  
Michel wound clips 7mm Roboz Surgical Instr RS-9270  
Ear Loop Mask Fisher Scientific 19-130-4181  
Dissection scissors Roboz Surgical Instr RS-6702  
Betadine solution VWR 63410-992  
Surgical forceps Roboz Surgical Instr RS-5135  
70% Isopropyl alcohol pad Fisher Scientific 22-031-350  
Buprenorphine Bedford Labs 55390-100-10  
Tramadol Sigma-Aldrich 42965  

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Citer Cet Article
Toscano, M. G., Ganea, D., Gamero, A. M. Cecal Ligation Puncture Procedure. J. Vis. Exp. (51), e2860, doi:10.3791/2860 (2011).

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