चूहे में लेजर डॉपलर Flowmetry मार्गदर्शन के साथ Intraluminal मध्य सेरेब्रल धमनी आड़ (MCAO) ischemic स्ट्रोक के लिए मॉडल
Summary
intraluminal मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा मॉडल (MCAO) प्रयोगात्मक ischemic स्ट्रोक मॉडलों के बीच सबसे अक्सर इस्तेमाल मॉडल है. यहाँ हम लेजर डॉपलर flowmetry की गाइड के साथ विस्तार में पूरे मॉडल, और उसके प्रतिनिधि परिणाम प्रदर्शन करेंगे.
Abstract
स्ट्रोक मृत्यु का तीसरा प्रमुख कारण है और दुनिया में विकलांगता के प्रमुख कारण २००९ 1,2 में संयुक्त राज्य अमेरिका में एक के पास 70 अरब डॉलर की अनुमानित लागत के साथ है . intraluminal मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा मॉडल (MCAO) 4 कोइज़ुमी द्वारा 1986 में विकसित किया गया था चूहे में इस impactful मानव विकृति अनुकरण. MCAO विधि का एक संशोधन के बाद 3 Longa द्वारा प्रस्तुत किया गया था. दोनों तकनीकों का व्यापक रूप से किया गया है ischemic स्ट्रोक और संभावित चिकित्सात्मक रूपरेखा 5 से उत्पन्न मस्तिष्क की चोट के आणविक तंत्र की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया. चूहों में यह अपेक्षाकृत noninvasive विधि चूहों में उपयोग ट्रांसजेनिक और पीटा उपभेदों 6,7 का लाभ लेने के लिए बढ़ा दिया गया है. मॉडल फोकल मस्तिष्क ischemia करने के लिए, एक intraluminal सीवन एमसीए के आधार रोक देना आंतरिक मन्या धमनी के माध्यम से उन्नत है. Retracting समय की एक निर्दिष्ट अवधि के बाद सिवनी सहज reperfusion mimics, लेकिन सीवन भी स्थायी रूप से बनाए रखा जा सकता है. यह वीडियो एक stepwise फैशन में चूहों में intraluminal MCAO प्रक्रिया के प्रदर्शन के लिए दो प्रमुख दृष्टिकोण का प्रदर्शन किया जाएगा, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से संभावित कमियां और नुकसान के लिए अंतर्दृष्टि प्रदान. ischemic मस्तिष्क के ऊतकों बाद 2,3,5 triphenyltetrazolium क्लोराइड (टीटीसी) द्वारा दाग जाएगा मस्तिष्क रोधगलन 8 की हद तक का मूल्यांकन.
Protocol
Discussion
MCAO मॉडल एक स्थापित मॉडल है कि murine प्रजातियों में मस्तिष्क ischemia replicates है. यह मॉडल पहले चूहों में इस्तेमाल किया गया था और उसके बाद चूहों को अनुकूलित. Craniectomy शल्य चिकित्सा में गड़बड़ी की रक्त मस्तिष्क बाधा पारगम?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Name of the reagent | Type | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
|---|---|---|---|---|
| Male C57BL/6 mice | Animal | Harlan Laboratories, Indianapolis, IN, USA | 20-26 grs | |
| Dissection microscope | Microscope | Leica stereo Microscope MZ6 | 6.3:1 zoom | |
| Fiber optic illuminator | Illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
| Isoflurane | Anesthesia | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL | 1001936060 | |
| SuperCut Iris scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14218 | |
| Vannas micro-scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14003 | |
| Dumont fine tip forceps | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 503290 | |
| Vessel clip | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14120 | |
| High Frequency Desiccator 900 | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500397 | |
| 7-0 surgical Nylon monofilament suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 1647G | Suture for occlusion |
| 7-0 surgical Silk suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 7733G | Suture for ligation |
| Silicone RTV adhesive | Silicone rubber | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 1571 | |
| Vetbond | Tissue adhesive | 3M Company, St Paul, MN, USA | 70200746587 | |
| Puralube Vet Ointment | Eye ointment | Pharmaderm, Melville, NY, USA | ||
| Buprenorphine hydrochlorode | Analgesics | Hospira Inc., Lake Forest, IL, USA | NDC 0409-2012-32 | |
| Thermal Cautery Unit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501292 | ||
| PeriFlux System 5000 | TCD flowmetry | Perimed, Stockholm, Sweeden | ||
| BAT-12 | Rectal thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12R | |
| T/PUMP, TP600 | Thermal blanket | Gaymar, NY, USA | ||
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Reagent | Sigma-Aldrich Co., St Louis, MO, USA | T8877 | |
| Mice brain matrix slicer | Brain slicer | Zivic-Miller Lab., Inc., Allison Park, PA, USA | BSMAS001-1 |
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