Intraluminale Occlusion Artère cérébrale moyenne (MCAO) Modèle pour l'AVC ischémique avec guidage laser Doppler chez la souris
Summary
Le intraluminale de l'artère cérébrale occlusion (MCAO) est le modèle le plus fréquemment utilisé chez les modèles expérimentaux ischémiques AVC. Ici, nous allons démontrer tout le modèle en détail avec le guide de Laser Doppler, et ses résultats représentatifs.
Abstract
L'AVC est la troisième cause de décès et la première cause de handicap dans le monde, avec un coût estimé à près de 70 milliards de dollars aux États-Unis en 2009 1,2. Le intraluminale de l'artère cérébrale occlusion (MCAO) modèle a été développé par Koizumi 4 en 1986 pour simuler cette percutante pathologie humaine chez le rat. Une modification de la méthode MCAO a ensuite été présenté par Longa 3. Les deux techniques ont été largement utilisées pour identifier les mécanismes moléculaires de lésions cérébrales résultant d'un accident ischémique cérébral et modalités thérapeutiques potentielles 5. Cette méthode relativement non invasive chez le rat a été étendu pour utiliser la souris pour tirer parti des souches transgéniques et knock-out 6,7. Pour modéliser une ischémie cérébrale focale, une suture intraluminale est avancé par l'artère carotide interne pour occlure la base de la MCA. Retrait de la suture après une période de temps spécifiée imite reperfusion spontanée, mais la suture peutégalement être maintenue en permanence. Cette vidéo sera de démontrer les deux grandes approches pour effectuer la procédure intraluminale MCAO chez la souris de façon progressive, ainsi que de fournir un aperçu des inconvénients potentiels et les pièges. Le tissu cérébral ischémique seront ensuite colorées par le chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium (CTT) pour évaluer l'étendue de l'infarctus cérébral 8.
Protocol
Discussion
Le modèle MCAO est un modèle établi qui reproduit l'ischémie cérébrale chez les espèces murines. Ce modèle a été utilisé pour la première chez les rats et par la suite adaptée à la souris. Éviter craniectomie pour éliminer l'influence de la manipulation chirurgicale sur la perméabilité barrière hémato-encéphalique et la pression intracrânienne est un avantage de cette technique. Cependant, de nombreuses variables, comme la souche des différences liées à la taille 10, la suture…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Name of the reagent | Type | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
|---|---|---|---|---|
| Male C57BL/6 mice | Animal | Harlan Laboratories, Indianapolis, IN, USA | 20-26 grs | |
| Dissection microscope | Microscope | Leica stereo Microscope MZ6 | 6.3:1 zoom | |
| Fiber optic illuminator | Illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
| Isoflurane | Anesthesia | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL | 1001936060 | |
| SuperCut Iris scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14218 | |
| Vannas micro-scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14003 | |
| Dumont fine tip forceps | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 503290 | |
| Vessel clip | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14120 | |
| High Frequency Desiccator 900 | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500397 | |
| 7-0 surgical Nylon monofilament suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 1647G | Suture for occlusion |
| 7-0 surgical Silk suture | Suture | Ethicon, Inc., Somerville, NJ, USA | 7733G | Suture for ligation |
| Silicone RTV adhesive | Silicone rubber | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 1571 | |
| Vetbond | Tissue adhesive | 3M Company, St Paul, MN, USA | 70200746587 | |
| Puralube Vet Ointment | Eye ointment | Pharmaderm, Melville, NY, USA | ||
| Buprenorphine hydrochlorode | Analgesics | Hospira Inc., Lake Forest, IL, USA | NDC 0409-2012-32 | |
| Thermal Cautery Unit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501292 | ||
| PeriFlux System 5000 | TCD flowmetry | Perimed, Stockholm, Sweeden | ||
| BAT-12 | Rectal thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12R | |
| T/PUMP, TP600 | Thermal blanket | Gaymar, NY, USA | ||
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Reagent | Sigma-Aldrich Co., St Louis, MO, USA | T8877 | |
| Mice brain matrix slicer | Brain slicer | Zivic-Miller Lab., Inc., Allison Park, PA, USA | BSMAS001-1 |
References
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