Summary

הזרקת Intravitreous להקמת Ocular דגם מחלות

Published: October 01, 2007
doi:

Summary

הזרקת Intravitreous היא טכניקה בשימוש נרחב במחקר מדעי חזותיים מחלות עיניים או כיישום ישירה של טיפול מקומי. סרט הווידאו הזה הוכיח פרוטוקול להזרקה intravitreous שימוש במזרק 1ml עם כוס פיפטה. טיפים שימושיים לגבי מניעת דימום מסיבי נזק העדשה מקבלים.

Abstract

הזרקת Intravitreous היא טכניקה בשימוש נרחב במחקר במדעי הראייה. זה יכול לשמש כדי ליצור מודלים של בעלי חיים עם מחלות עיניים או כיישום ישירה של טיפול מקומי. וידאו זה מציג כיצד להשתמש בכלים פשוט וזול כדי לסיים את ההליך הזרקת intravitreous. השימוש מזרק 1 מ"ל, במקום מזרק hemilton, משמש. עצות מעשיות כיצד להפוך את המחטים המתאימות באמצעות הזרקה pipettes זכוכית עם טיפים מושלם, וכיצד להתחבר בקלות את מחט המזרק עם פיפטה את הכוס בחוזקה יחד, מקבלים.

כדי לבצע הזרקה intravitreous טוב, ישנם שלושה היבטים כדי לצפות: 1) באתר ההזרקה לא צריך לשבש מבנה הרשתית; 2) דימום יש להימנע כדי להפחית את הסיכון לזיהום: 3) העדשה צריכה להיות ללא מגע, כדי למנוע קטרקט טראומטי. בקיצור, הנקודה החשובה ביותר היא לצמצם את הפרעה של מבנה העין נורמלי. כדי למנוע הפרעה של הרשתית, באזור האף מעולה של העין עכברוש נבחר. כמו כן, נקודת לנקב של המחט היה ב מישוריים נקוב, אשר היה כ -1.5 מ"מ מהאזור limbal העין חולדה. כמות קטנה של הזגוגית היא דחפה בעדינות החוצה דרך החור לנקב כדי להפחית את הלחץ התוך עיני לפני הזריקה. עם זריקה בזווית של 45 מעלות, זה פחות סביר לגרום קטרקט טראומטי בעין חולדה, וכך למנוע סיבוכים הקשורים השפעה מגורמים lenticular. במבצע הזה, לא היה חיתוך של השריר ואת לחמית העין, ללא דימום. עם פגיעה מהירה קטין, בזריקה intravitreous מוצלח יכול להיעשות בתוך דקות.

הזרקת להגדיר המפורטים בפרוטוקול המסוים הזה ספציפית להזרקה intravitreous. למרות זאת, שיטות וחומרים המוצגים כאן יכולים לשמש גם עבור תהליכי הזרקה אחרים משלוח סמים על המוח, חוט השדרה או לאיברים אחרים ויונקים קטנים.

Protocol

הכן את pipettes זכוכית באמצעות חולץ pipettes, לחבר אותו מזרק 1ml, וסוגרים את הקשר עם parafilm. משיכה 2 מ"ל של תמיסת אל קצה pipettes ולהתכונן ההזרקה. לטשטש את העכברוש בזריקה תוך הצפק של קטמין (80mg/kg) ו xylazine (8mg/kg) (יחס נפח ב 02:01). <li style=";text-align:right;directio…

Discussion

הזרקת intravitreous טוב שימושי להקמת מודל החיה, כמו גם טיפול תוך עיני ישיר. ראשית, באתר ההזרקה לא צריך לשבש מבנה הרשתית. דימום שנית, יש להימנע כדי להפחית את הסיכון לזיהום. עדשה שלישית, צריך להיות ללא שינוי, כדי למנוע קטרקט טראומטי. החשוב ביותר הוא להפחית את הפרעה של מבנה העין נורמלי.

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

המחקר של גלאוקומה במעבדה זו נתמכת על ידי מחקר מטעם הקרן הלאומית גלאוקומה עוזר הבריאות האמריקאי.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Operating Microscope   Olympus OME  
Glass Pipettes   World Precision Instruments, Inc.    
Pipette Puller   David Kopf Instruments    
1ml syringes       single use
30G needles       single use
Ketamine   Aldasan   anesthetic
Xylazine   Aldasan   anesthetic
Alcaine   Alcon-Couvreur   0.5% proparacaine hydrochloride
Tobrex   Alcon-Couvreur   ointment, 3% tobramyxin.

References

  1. Chiu, K., Lam, T. T., Ying Ku, W. W., Caprioli, J., Kwong Kwong, J. M. Calpain and N-methyl-d-aspartate (NMDA)-induced excitotoxicity in rat retinas. Brain Research. 1046, 207-215 (2005).
  2. Fisher, D., Pavlidis, M., Thanos, S. Cataractogenic lens injury prevents traumatic ganglion cell death and promotes axonal regeneration both in vivo and in culture. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41, 3943-3954 (2000).
  3. Ji, J. -. Z., Elyaman, W., Yip, H. K., Lee, V. W. H., Yick, L. -. W., Hugon, J., So, K. -. F. CNTF promotes survival of retinal ganglion cells after induction of ocular hypertension in rats: the possible involvement of STAT3 pathway. European Journal of Neuroscience. 19, 265-272 (2004).
  4. Lam, T. T., Abler, A. S., Kwong, J. M. K., Tso, M. O. M. N-Methyl-D-Aspartate (NMDA)-Induced Apoptosis in Rat Retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40, 2391-2397 (1999).
check_url/fr/313?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Chiu, K., Chang, R. C., So, K. Intravitreous Injection for Establishing Ocular Diseases Model. J. Vis. Exp. (8), e313, doi:10.3791/313 (2007).

View Video