Intravitreal injektion för Etablera Ocular Sjukdomar Modell

Summary

Intravitreal injektion är en allmänt använd teknik Visual Sciences forskning för okulär sjukdomar eller som direkt tillämpning av lokal behandling. Denna video visar ett protokoll för intravitreal injektion med en 1 ml spruta med glaspipett. Nyttiga tips om att undvika massiv blödning och linsen skador ges.

Abstract

Intravitreal injektion är en allmänt använd teknik Visual Sciences forskning. Den kan användas för att fastställa djurmodeller med okulär sjukdomar eller som direkt tillämpning av lokal behandling. Denna video presenterar hur man använder enkla och billiga verktyg för att avsluta intravitreala injektionsproceduren. Användning av en 1 ml spruta, i stället för en hemilton spruta, används. Praktiska tips för hur man gör lämpliga injektionsnålar med glas pipetter med perfekt tips och hur man enkelt ansluta sprutnålen med glaspipett tätt tillsammans, är givna.

Att genomföra en bra intravitreal injektion, finns det tre aspekter att beaktas: 1) injektionsställe bör inte störa näthinnan struktur, 2) blödning bör undvikas för att minska risken för infektion, 3) objektiv bör vara orörd för att undvika traumatisk katarakt. I korthet är den viktigaste punkten för att minska avbrott i den normala okulära struktur. För att undvika avbrott i näthinnan var överlägsna nasala regionen råtta ögat valt. Dessutom var punktering punkt nålen på par plana, vilket var ca 1,5 mm från limbus regionen råttan ögat. En liten mängd glaskroppen är försiktigt pressas ut genom punktering hålet för att minska det intraokulära trycket före injektionen. Med 45 ° injektionen vinkel, är det mindre sannolikt att orsaka traumatisk katarakt hos råtta ögat och därmed undvika komplikationer och inflytande från linsformade faktorer. I denna operation, det fanns ingen skära i bindhinnan och ögonmusklerna, ingen blödning. Med snabba och mindre skador, kan en framgångsrik intravitreal injektion göras på några minuter.

Injektionen som beskrivs i detta protokoll är specifikt för intravitreal injektion. Däremot kan metoder och material som presenteras här även användas för andra injektion förfaranden inom drug delivery till hjärnan, ryggmärgen eller andra organ i små däggdjur.

Protocol

Förbered glaspipetter använda pipetter avdragare, ansluta den till en 1 ml spruta, och försegla samband med parafilm. Dra 2 ml lösning i spetsen av pipetter och gör dig redo för injektion. Bedöva råttan genom intraperitonealt injektion av ketamin (80mg/kg) och xylazin (8mg/kg) (volym uppgick vid 2:1). Applicera en droppe 0,5% alcaine för råtta ögon som lokalbedövningsmedel innan intravitreal injektion. Placera råttan och exponera den överlägsna nasala regionen i ögat. Använd en 3…

Discussion

Bra intravitreal injektion är användbar för att upprätta djurmodell liksom direkta intraokulära behandling. Först bör injektionsstället stör inte näthinnan struktur. För det andra, blödning bör undvikas för att minska risken för infektion. Tredje lins bör orörd för att undvika traumatisk katarakt. Viktigast är att minska avbrott i den normala okulära struktur.

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Operating Microscope		Olympus	OME
Glass Pipettes		World Precision Instruments, Inc.
Pipette Puller		David Kopf Instruments
1ml syringes				single use
30G needles				single use
Ketamine		Aldasan		anesthetic
Xylazine		Aldasan		anesthetic
Alcaine		Alcon-Couvreur		0.5% proparacaine hydrochloride
Tobrex		Alcon-Couvreur		ointment, 3% tobramyxin.