人类多能干细胞(hPSCs)有无数不同的疾病的潜在治疗。这些细胞的效用在于事实,即他们可以分化成人体任何细胞类型。在这里,我们描述畸胎瘤实验,这用于演示的hPSCs pluripotence的。
多能干细胞(PSCS)有独特的特点,他们可以分化成所有三个胚层的细胞。这使得他们为许多不同疾病的治疗具有潜在价值的工具。 (胚胎干细胞)与诱导多能干细胞(iPS细胞),并继续与人类胚胎干细胞研究的到来需要有一个实验可以证明,一个特定的细胞是多能干。生殖传输已经证明小鼠胚胎干细胞(MESC)线1,2,3 pluripotence的黄金标准。使用这个实验中,研究人员可以表明,卓制线可以使所有类型的细胞在胚胎生殖细胞4。随着一代人类ESC线5,6,相应的检测来证明这些细胞的pluripotence不清楚,因为人类胚胎干细胞不能为生殖传输测试。作为替代,畸胎瘤法是目前用来展示pluripotency人类多能干细胞(hPSCs)7,8,9。虽然此法最近受到审查,并正在积极探索新技术,畸胎瘤法是目前的黄金标准7。在这个实验中,细胞免疫受损小鼠注入。如果是多能干细胞,最终将发展畸胎瘤和肿瘤的部分,将显示所有3个胚层组织。在畸胎瘤检测,hPSCs可以被注入老鼠的不同领域。最常见的注射部位,包括睾丸胶囊,补肾胶囊,肝,或到腿部皮下或肌肉注射11。在这里,我们描述了一个强大的协议畸胎瘤的肿瘤生长的部位使用睾丸胶囊hPSCs代。
这里介绍的方法,提供一个高度可靠的,从在睾丸胶囊hPSCs产生畸胎瘤直截了当的方法。这项技术有几个关键参数。特别是,它是重要的注入HPSC细胞线,被称为是多能干细胞作为对照。其他重要参数包括注射液和肿瘤的观察之间的时间间隔。对于像WA09细胞株,畸胎瘤应观察6-8周。为IPSC的新线,我们发现,往往需要10个星期。另一个值得关注的是注入细胞的数量。我们注入一百万个细胞,但可以很容易地用较少的细胞进行检测。此外,注入介质是非常重要的。我们发现,我们得到最好的结果,当细胞被注入在基底膜和DMEM/F-12的1:1混合,PBS或DMEM/F-12反对。
The authors have nothing to disclose.
这项工作是由摆围赠款#TR-1250,电阻RT1-01108,CL1-00502。