Akute und chronische taktile Sensorische Testung nach Verletzungen des Rückenmarks bei der Ratte
Summary
Wir beschreiben zwei taktilen sensorischen Prüfmethoden für akute oder chronische Perioden von Rückenmarksverletzungen bei Ratten. Diese validierten Verfahren kann erkennen, die Entwicklung und Wartung von Allodynie-ähnliche Empfindungen.
Abstract
Rückenmarksverletzung (SCI) beeinträchtigt sensorischen Systemen verursachen Allodynie 1-8. Um zellulären und molekularen Ursachen der Allodynie, sensible und sensorische Prüfung gültig in Ratten-SCI Modelle zu identifizieren benötigt wird. Doch bis vor kurzem hatte kein einziges Prüfansatz SCI validiert, so dass standardisierte Methoden nicht über Labors umgesetzt. Darüber hinaus könnte Verfügung Prüfverfahren nicht akut implementiert werden, oder wenn schwere motorischen existiert, zu verhindern Studien zur Entwicklung von SCI-Allodynie 3. Hier präsentieren wir zwei validierte sensorische Prüfverfahren mit Hilfe von-Frey-Haar (VFH) Monofile, die Veränderungen in der taktilen sensorischen Schwellen nach einer Rückenmarksverletzung 4-5 quantifizieren. Ein Test ist das gut etablierte Up-Down-Test die hohe Sensitivität und Spezifität in verschiedenen Schweregraden SCI bei der Prüfung chronisch 5 demonstriert. Der andere Test ist ein neu entwickelter Test, der dorsalen VFH akut nach einer Rückenmarksverletzung kann angewendet werden, wenn einllodynia entwickelt, vor dem Motor Recovery 5.4. Jeder VFH Monofilament gilt eine kalibrierte Kraft, wenn die Haut der Hinterpfote, bis er beugt sich gerührt. In der Auf-Ab-Methode werden abwechselnd VFHs höherer oder niedrigerer Kräfte auf die plantare Dermatom L5 verwendet werden, um flexor Rücknahmeschwellen abzugrenzen. Sukzessiv höhere Kräfte aufgebracht, bis Austritt erfolgt dann geringere Kraft VFHs sind bis zum Rücktritt nicht mehr verwendet. Die taktile Schwelle spiegelt die Kraft, die zum Rückzug in 50% der Reize zu entlocken. Für den neuen Test wird jedes VFH zum dorsalen L5 Dermatom der Pfote angelegt, während die Ratte vom Prüfer unterstützt wird. Die VFH Stimulation erfolgt in aufsteigender Reihenfolge der Kraft, bis mindestens 2 von 3 Anwendungen an einem gegebenen Kraft erzeugt Zurückziehen der Pfote. Taktile sensorische Reizschwelle ist die niedrigste Kraft zum Rücktritt 66% der Zeit zu entlocken. Akklimatisierung, Prüf-und Scoring-Verfahren werden beschrieben. Aberrant Studien, die eine typische und Retest-Studien erfordern definiert sind. Tierische Verwendung wwie von der Ohio State University Animal Care und Use Committee gebilligt.
Protocol
Discussion
Die VFH Testmethoden hier vorgestellten Tests repräsentieren zwei Paradigmen, die sensible und gültig für den Einsatz in Ratten-SCI-Modelle sind. Wichtig ist, dass die dorsale VFH-Test zur Beurteilung der Erholung der Tastempfindung der Hinterpfoten akut nach mittleren thorakalen SCI bei Ratten nicht in der Lage, sich auf ihre Hinterläufe stehen, sind geschaffen. Diese Tests Paradigma kann auch verwendet werden, wenn Ratten in der Lage, ihr Gewicht zu unterstützen und für die Hinterbeine nach zervikaler SCI wieder…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NIH NS43798 (DMB); NIH F31 NS058138 (MRD), P30-NS045758 (CBSCR); und die gelähmten Veteranen von Amerika # 2451 (DMB) und # 2707 (MRD).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Semmes-Weinstein Monofilaments | Stoelting Co | 58011 | |
| Fish Breeder Box | Aquarium Supply Store | Hole drilled in side for cereal delivery | |
| Elevated wire mesh (1/4″ X 1/4″ grid) | Hardware Store | ||
| Elastic to hold fish breeder box in place | Craft Store | ||
| Sugared Cereal | Grocery Store | ||
| Surgical Huck Towel 16″x 23″ | Medical Supply Store |
References
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