Aguda y crónica Prueba sensorial táctil después de la lesión de la médula espinal en ratas
Summary
Se describen dos métodos de pruebas sensoriales táctiles para los períodos agudos o crónicos de la lesión de la médula espinal en ratas. Estos procedimientos validados puede detectar el desarrollo y mantenimiento de la alodinia-como sensaciones.
Abstract
Lesión de la médula espinal (SCI) altera los sistemas sensoriales que causan la alodinia 1-8. Para identificar las causas celulares y moleculares de la alodinia, sensibles y pruebas válidas sensorial en ratas modelos SCI es necesario. Sin embargo, hasta hace poco, no hay un solo enfoque de las pruebas han sido validadas para SCI para que los métodos estandarizados no se han aplicado a través de los laboratorios. Además, los métodos de ensayo disponibles no pudo ser implementado de forma aguda o severa cuando existía motrices, la prevención de los estudios sobre el desarrollo de la lesión medular inducida por la alodinia 3. Aquí se presentan dos métodos de prueba validados sensoriales usando von Frey pelo (VFH) monofilamentos que cuantifican los cambios en los umbrales sensoriales táctiles 4-5 después de la lesión. Una de las pruebas es el bien establecida arriba-abajo de prueba que demuestra una alta sensibilidad y especificidad en los distintos niveles de gravedad SCI en las pruebas crónica 5. La otra prueba es una prueba recientemente desarrollada VFH dorsal que puede ser aplicado después de SCI aguda cuando unllodynia desarrolla, antes de la recuperación del motor 4-5. Cada monofilamento VFH se aplica una fuerza calibrada cuando se toca a la piel de la pata trasera hasta que se dobla. En el método de arriba-abajo, VFHs alternancia de las fuerzas superiores o inferiores se utilizan en el dermatoma L5 plantar para delimitar los umbrales de los flexores de abstinencia. Fuerzas cada vez más elevados se aplican hasta que la retirada se produce luego baje VFHs fuerza se usan hasta que la retirada se detiene. El umbral táctil refleja la fuerza requerida para provocar la retirada en el 50% de los estímulos. Para la prueba de nuevo, cada VFH se aplica a la dermatoma dorsal L5 de la pata, mientras que la rata es apoyada por el examinador. La estimulación se produce VFH en orden ascendente de la fuerza hasta por lo menos 2 de 3 aplicaciones a la fuerza dada produce retirada de la pata. Umbral sensorial táctil es la menor fuerza para provocar la retirada 66% del tiempo. Los procedimientos de aclimatación, de pruebas y calificación se describen. Juicios aberrantes que requieren un retest ensayos y típicos se definen. El uso de animales waprobado por el Cuidado de Animales de Ohio State University y el empleo.
Protocol
Discussion
Los métodos de prueba VFH presentados aquí representan dos paradigmas experimentales, que son sensibles y válidos para su uso en modelos de rata SCI. Es importante destacar que el dorsal prueba de VFH fue creado para la evaluación de la recuperación de la sensación táctil de las patas traseras agudamente después de medio-torácico SCI cuando las ratas no son capaces de pararse sobre sus cuartos traseros. Este paradigma de la prueba también se puede utilizar cuando las ratas a recuperar la capacidad de soportar …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NIH NS43798 (DMB), NIH F31 NS058138 (MRD), P30-NS045758 (CBSCR), y los Veteranos Paralíticos de América # 2451 (DMB) y # 2707 (MRD).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Semmes-Weinstein Monofilaments | Stoelting Co | 58011 | |
| Fish Breeder Box | Aquarium Supply Store | Hole drilled in side for cereal delivery | |
| Elevated wire mesh (1/4″ X 1/4″ grid) | Hardware Store | ||
| Elastic to hold fish breeder box in place | Craft Store | ||
| Sugared Cereal | Grocery Store | ||
| Surgical Huck Towel 16″x 23″ | Medical Supply Store |
References
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