العلاج الإشعاعي مجموعة في نموذج الفأر Orthotopic استئصال ورم من الدماغ
Summary
والغرض من هذه المقالة لوصف استخدام نموذج ورم أرومي دبقي orthotopic للدراسات chemoradiation. هذه المادة سوف تذهب على الرغم من تجهيز الخلية، وزرع، والعلاج الإشعاعي من الفأرة باستخدام نموذج داخل الجمجمة.
Abstract
ورم أرومي دبقي الأشكال (GBM) هي الأكثر شيوعا وعدوانية الكبار أورام الدماغ الأولية 1. في السنوات الأخيرة قد شهدت تقدما كبيرا في فهم آليات غزو الورم، والتلقيح داخل المخ مباشرة من ورم يتيح الفرصة لمراقبة عملية الغازية في بيئة ملائمة من الناحية الفسيولوجية 2. بقدر ما نشعر بالقلق أورام الدماغ البشري، وضعت نماذج orthotopic المتاحة حاليا إما عن طريق الحقن التجسيمي من الايقاف الخلية أو زرع قطعة صلبة من الورم من خلال إجراء حج القحف معقدة 3. في تقنية حصاد الخلايا لدينا نحن من زراعة الأنسجة لإنشاء تعليق خلية تستخدم لزرع مباشرة في الدماغ. مدة الجراحة ما يقرب من 30 دقيقة، وكذلك فأرة يجب أن يكون في الطائرة جراحية ثابت، يتم استخدام مخدر عن طريق الحقن. يتم وضع الماوس في رقصة التجسيمي الذي أدلى به Stoetling (الشكل 1). الخلفإيه يتم تنظيف منطقة الجراحية وأعدت، يتم إجراء شق، ويقع bregma لتحديد موقع حج القحف. مكان حج القحف هو 2 ملم إلى اليمين و1 ملم منقاري إلى bregma. وعمق 3 مم من سطح الجمجمة، ويتم حقن الخلايا بمعدل 2 ميكرولتر كل دقيقة 2. يتم خياطة الجلد مع PDS 5-0، ويسمح الماوس لتستيقظ على وسادة التدفئة. من تجربتنا، اعتمادا على خط الخليوي، ويمكن علاج في الفترة من 7-10 أيام بعد الجراحة. تسليم المخدرات يعتمد على تركيبة الدواء. لتلقي العلاج الإشعاعي للفئران هي تخدير، ووضع في العرف تهزهز. الرصاص يغطي الجسم الماوس، ويعرض فقط في الدماغ من الفأرة. دراسة تكون الأورام وتقييم علاجات جديدة للالخليج للحاسبات الآلية تتطلب دقة وقابلة للتكرار النماذج الحيوانية ورم دماغي. وبالتالي نحن نستخدم هذا النموذج الدماغ orthotopic لدراسة التفاعل بين المكروية في الدماغ وورم في، لاختبار effectivenوفاق سطيف من العوامل العلاجية مختلفة مع وبدون إشعاع.
Protocol
Discussion
الاورام الدبقية الخبيثة، مثل ورم أرومي دبقي الأشكال، تمثل الأكثر شيوعا أورام الدماغ الأولية والحصول على التشخيص الكئيب 4. وقد ظل بقاء المرضى المتضررين من الخليج للحاسبات الآلية دون تغيير تقريبا خلال العقد الماضي (أي 9-12 شهرا في مرحلة ما بعد التشخيص) على الرغم من…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ويدعم هذا البحث من خلال تمويل من البرنامج ضمن الجدران من المعاهد الوطنية للصحة.
Materials
| Lab Standard Stereotaxic Instrutment | Stoelting Mouse and Rat Adaptor |
| Betadine | 100% EtOH |
| 70% EtOH | 50% Acetone |
| 6″ Q-tips | Alcohol swabs |
| Hamilton syringe 80008 | Ethicon 5-0 PD |
| 1701 SN 31-33G/1″/PT3 needle | 1 ml syringes |
| 25G needles | Heating pad |
| Artificial Tears Ointment | Very fine tipped permanent marker |
References
- Bleau, A. M., Holland, E. Trapping the mouse genome to hunt human alternations. Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A. 104, 7737-7738 (2007).
- McGrady, B. J., McCormick, D. A murine model of intracranial invasion: morphological observations on central nervous system invasion by melanoma cells. Clin. Exp. Metastasis. 10, 387-393 (1992).
- Fei, X., Zhang, Q., Dong, J., Diao, y., Wang, Z., Li, R., Wu, Z., Wang, A., Lan, Q., Zhang, S., Huang, Q. Development of clinically relevant orthotopic xenograft mouse model of metastatic lung cancer and glioblastoma through surgical tumor tissues injection with trocar. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. 29, 84-84 (2010).
- Fujita, M., Zhu, X., Sasaki, K., Ueda, R., Low, K., Pollack, I., Okada, H. Inhibition of STAT3 Promotes the Efficacy of Adoptive Transfer Therapy Using Type-1 CTLs by Modulation of the Immunological Microenvironment in a Murine Intracranial Glioma. J. Immunol. 180, 2089-2098 (2008).
- Candolfi, M., Curtin, J. F., Nichols, W. S., Muhammad, A. K. M. .. . G., King, G., Pluhar, G. D., McNiel, G. E., Ohlfest, E. A., Freese, J. R., Moore, P. F. Intracranial glioblastoma models in preclinical neuro-oncology: neuropathlogical characterization and tumor progression. J. Neurooncol. 85, 133-148 (2007).
- Kaye, A., Morstyn, G., Gardner, I., Pyke, K. Development of a xenograft glioma model in mouse brain. Cancer Research. 46, 1367-1373 (1986).
- Zhao, Y., Xiao, A., diPierro, C., Carpenter, J., Abdel-Fattah, R., Redpath, G., Lopez, M., Hussaini, I. An Extensive Invasive Intracranial Human Glioblastoma Xenograft Model. American Journal of Pathology. 176, 3032-3049 (2010).
- Learn, C., Grossi, P., Schmittling, R., Xie, W., Mitchell, D., Karikari, I., Wei, Z., Dressman, H., Sampson, J. Genetic Analysis of Intracranial Tumors in a Murine Model of Glioma Demonstrate a Shift in Gene Expression in Response to Host Immunity. J. Neuroimmunol. 182, 63-72 (2007).
- Martens, T., Laabs, Y., Günther, H., Kemming, D., Zhu, Z., Witte, L., Hagel, C., Westphal, M., Lamszus, K. Inhibition of Glioblastoma Growth in a Highly Invasive Nude Mouse Model Can Be Achieved by Targeting Epidermal Growth Factor Receptor but not Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2. Clin. Cancer Res. 14, 5447-5458 (2008).
- Purow, B., Schiff, D. Advances in the genetics of glioblastoma: are we reaching critical mass. Nat. Rev. Neurol. 5, 419-426 (2009).
