在原位小鼠脑肿瘤模型结合放疗
Summary
这篇文章的目的是描述使用原位神经母细胞瘤化疗研究模型。虽然本文将去细胞处理，植入，鼠标使用颅内模型放疗。
Abstract
胶质母细胞瘤（GBM），是最常见的和积极的成人原发性脑肿瘤1。近年来已取得实质性进展，在了解肿瘤浸润力学，直接脑内接种肿瘤提供了机会，在生理上适当的环境观测入侵过程。至于人类脑肿瘤有关，目前可用的原位模型建立立体定向注射细胞悬液或植入一个坚实的一块肿瘤，通过一个复杂的开颅手术过程3。在我们的技术，我们收获的细胞组织培养，创建一个用于直接植入到大脑细胞悬液。手术时间约30分钟，鼠标需要在一个恒定的手术平面，注射麻醉剂使用。鼠标被放置在了一个立体夹具Stoetling（图1）。前前后后ER被清除，并准备手术区，切口和前囟门位于确定开颅的位置。开颅手术的位置是2毫米的权利和延髓前囟门1毫米。深度为3毫米，从头骨的表面和细胞注入2μL，每2分钟的速度。皮肤缝合用5-0的PDS，允许唤醒了一个加热垫和鼠标。从我们的经验，根据细胞株，治疗可以采取手术后7-10天的地方。给药是依赖于药物组成。对于放射治疗的老鼠麻醉，并投入到一个做夹具定制。铅覆盖老鼠的身体和公开只老鼠的大脑。研究肿瘤发生和大紫荆勋章的新疗法的评价需要准确，重现性脑肿瘤动物模型。因此，我们使用这种原位脑模型研究的大脑和肿瘤微环境的相互作用，测试effectivenESS无辐射与不同的治疗药物。
Protocol
一，电池的制备含10％胎牛血清的DMEM汇合处约80％汇合225厘米3瓶每5被植入小鼠的细胞生长。 吸细胞的媒体;无钙或镁与10毫升的PBS洗。吸出PBS关闭细胞。 Trypsinize细胞与胰蛋白酶的3毫升，等待10-15分钟，并消除胰蛋白酶，与15毫升的媒体。 吸取到50毫升锥形细胞和媒体。两个大瓶放入一个50毫升锥形。 在7分钟1600转的自旋细胞在4°C完全吸上清。在10毫升冷P…
Discussion
胶质母细胞瘤，恶性胶质瘤，如代表最常见的原发性脑肿瘤和预后极差4。大紫荆勋章的影响患者的生存期已大致维持不变（即诊断后9-12个月）在过去十年中，尽管在手术，放疗和化疗5垫款。应包括适当的治疗脑胶质瘤的研究模型的特点重现肿瘤的位置和生长的细胞作为一个相对独立的肿瘤细胞应类似于尽可能脑胶质瘤的组织学特征密切合作，应该有一个可预见的增长率，肿瘤的…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项研究是由美国国立卫生研究院的资助校内程序支持。
Materials
| Lab Standard Stereotaxic Instrutment | Stoelting Mouse and Rat Adaptor |
| Betadine | 100% EtOH |
| 70% EtOH | 50% Acetone |
| 6″ Q-tips | Alcohol swabs |
| Hamilton syringe 80008 | Ethicon 5-0 PD |
| 1701 SN 31-33G/1″/PT3 needle | 1 ml syringes |
| 25G needles | Heating pad |
| Artificial Tears Ointment | Very fine tipped permanent marker |
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Citer Cet Article
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