Långsiktig Dödligt toxicitetstest med Crustacean Artemia franciscana</em
Summary
Denna studie handlar om utveckling och standardisering av en värdefull metodologisk protokoll för att bestämma lång sikt (14 dagar) letal toxicitet som utövas av kemiska ämnen, industriell avloppsvatten eller avlopp och flytande miljöprover på saltvatten kräftdjur,<em> Artemia franciscana</em>.
Abstract
Vår forskning inriktas på användning av biologiska metoder för utvärdering av miljökvalitet, med särskild hänvisning till saltvatten / bräckt vatten och sediment. Valet av biologiska indikatorer måste baseras på tillförlitliga vetenskapliga rön och eventuellt av tillgången till standardiserade förfaranden. I den här artikeln presenterar vi ett standardiserat protokoll som används den marina kräftdjur Artemia för att utvärdera toxiciteten av kemikalier och / eller marina miljön matriser. Forskarna föreslår att Artemia (Artemia) är en lämplig kandidat för utveckling av en standard bioassay för global användning. Ett antal artiklar har publicerats på de toxiska effekterna av olika kemikalier och gifter om artemia (Artemia). Den stora fördelen med denna skaldjur för toxicitetsstudier är den övergripande tillgången på de torra cystor, dessa omedelbart kan användas i testning och svår att bruka inte efterfrågas <sup> 1,2. Cysta-baserade toxicitet analyser är billiga, ständigt tillgänglig, enkel och tillförlitlig och är därmed ett viktigt svar på rutinmässiga behov på toxicitet screening, för industriella kraven på övervakning eller för regulatoriska ändamål 3. Den föreslagna metoden innebär att dödligheten som en slutpunkt. Antalet överlevande räknades och andelen dödsfall beräknades. Larver ansågs döda om de inte uppvisa någon intern eller extern rörelse under flera sekunder för observation 4. Detta förfarande var standardiserade tester en referenssubstans (natriumdodecylsulfat), vissa Resultaten rapporteras i detta arbete. Denna artikel följer en video som beskriver prestanda processuella toxicitetsprovning, som visar alla steg i samband med protokollet.
Protocol
Discussion
Artemia är ett av de mest värdefulla testorganismerna tillgängliga för ekotoxicitet Provnings-och Forskningsinstitut gjort så här långt kan vi konstatera att det är möjligt att upprätthålla flera alternativ relaterade till Artemia användning i toxikologi och ekotoxikologi. De egenskaper som vänder denna organism i en lämplig art för bioanalyser är: en bred geografisk spridning, hög anpassningsförmåga till ogynnsamma miljöförhållanden och olika näringsämnen, relativt enkla labora…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Producerad av Loredana Manfra av Institutet för miljöskydd och forskning (Ispra-Department of Environmental Quality Monitoring) och Federica Savorelli av regionala byrån för miljöskydd (Emilia-Romagna, Italien).
Referens medlemmar för sub-arbetsgrupp om Artemia kräftdjur inom biologiska metoder gruppen – Saltwater / bräckt vatten och sediment från UNICHIM kommissionen om vattenkvalitet (Institutet för teknisk standardisering som arbetar inom den kemiska sektorn).
Videography och redigering av Marco Pisapia Ispra (Web Unit).
Produktionen Samordning av Anna Maria Cicero och Erika Magaletti Ispra (Department of Environmental Quality Monitoring).
Vi vill tacka regionala byrån för miljöskydd Emilia-Romagna, Ferrara Branch, de biologiska metoderna gruppen – Saltwater / bräcktVatten och sediment från UNICHIM kommissionen om vattenkvalitet och Luciana Migliore, Tor Vergata universitet (Rom) för deras samarbete, Rossella Boscolo och Massimo Gabellini Ispra (Institutionen förebygga och begränsa följderna av påverkan) för sitt ekonomiska stöd, Fabio Matassa och London School of Languages i Rom för deras språkliga stöd.
Materials
Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).
Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).
Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).
Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).
We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.
| Name of the reagent | Company | Product number |
| Sodium Dodecyl Sulfate | Sigma-Aldrich | L4390 |
Appendix
The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.
A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO3, 30 g of KH2PO4 and 20 g of NH4Cl in distilled water.
Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:
- A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO4 H2O, 25 g of CuSO4 5 H2O, 30 g of CoSO4 7 H2O and 20 g of MnSO4 H2O in distilled water;
- A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl3 •6 H2O in distilled water;
- A liter of solution “C” containing 25 g of Na2MoO4 •2 H2O in distilled water;
- A liter of solution “D” containing 50 g di Na2EDTA •2 H2O in distilled water.
A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.
Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:
- A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
- A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
- A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.
A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.
A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.
References
- Togulga, M. The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii. Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).
- Persoone, G., Wells, P. G., Sorgeloos, P. Artemia in aquatic toxicology: a review. Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterization Toxicology. , 259-275 (1987).
- Nunes, B. S., Carvalho, F. D., Guilhermino, L. M., Stappen, G. V. a. n. Use of the genus Artemia in ecotoxicity testing. Envir. Poll. 144, 453-462 (2006).
- APAT IRSA-CNR. . Metodi analitici per le acque Manuali e Linee guida 29/2003. Terzo Metodo, 8060 (2003).
- Sorgellos, P., Wielen, C. R. e. m. i. c. h. e. -. V. a. n. D. e. r., Persoone, G. The use of Artemia nauplii for toxicity tests – a critical analysis. Ecotox. Env. Saf. 2, 249-255 (1978).
- Savorelli, F., Palazzi, D., Gorbi, G., Invidia, M., Sei, S., Magaletti, E., Manfra, L., Gelli, F. Set up of a standard methodology for 14-day bioassay on Artemia franciscana and A. parthenogenetica. Biol. Amb. 21, 27-36 (2007).
- Brix, K. V., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Chronic toxicity of arsenic to the Great Salt Lake brine shrimp, Artemia franciscana. Ecotox. Environ. Saf. 54, 169-175 (2003).
- Brix, K. V., Deforest, D. K., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Derivation of a chronic site-specific water quality standard for selenium in the Great Salt Lake, Utah, USA. Environ. Toxicol. Chem. 23, 606-612 (2004).
- . Qualitá dell’acqua – Determinazione della tossicitá letale a 14 giorni con Artemia franciscana (Crustacea: Anostraca). Commissione UNICHIM “Qualitá dell’acqua” Gruppo di Lavoro “Metodi Biologici” Sottogruppo “Acque salate/salmastre e sedimenti”. , (2010).
- Varo, I., Navarro, J. C., Amat, F., Guilhermino, L. Characterisation of cholinesterases and evaluation of the inhibitory potential of chlorpyrifos and dichlorvos to Artemia salina and Artemia parthenogenetica. Chem. 48, 563-569 (2002).
