Langsigtet dødelige toksicitet Test med krebsdyr Artemia franciscana</em
Summary
Denne undersøgelse vedrører udvikling og standardisering af et værdifuldt protokol til at bestemme lang sigt (14 dage) dødelige toksicitet udøves af kemiske stoffer, industrielle spildevand eller spildevand og flydende miljø-prøver på saltvand krebsdyr,<em> Artemia franciscana</em>.
Abstract
Vores forskningsaktiviteter rettet mod brug af biologiske metoder til vurdering af miljøkvalitet, med særlig henvisning til saltvand / brakvand og sediment. Valget af biologiske indikatorer skal være baseret på pålidelig videnskabelig viden og eventuelt, om tilgængeligheden af standardiserede procedurer. I denne artikel præsenterer vi en standardiseret protokol, der bruges det marine krebsdyr Artemia til at vurdere toksiciteten af kemikalier og / eller marine miljø matricer. Forskerne foreslår, at saltlage rejer (Artemia) er en egnet kandidat til udviklingen af en standard bioassay til verdensomspændende udnyttelse. En række papirer er blevet offentliggjort om de toksiske virkninger af forskellige kemikalier og giftstoffer på artemia (Artemia). Den største fordel ved denne krebsdyr for toksicitet er den overordnede tilgængeligheden af de tørre cyster, og disse kan umiddelbart anvendes til kontrol og er vanskeligt at dyrke ikke kræves <sup> 1,2. Cyst-baserede toksikologiske analyser er billige, konstant tilgængelig, enkel og pålidelig og er dermed et vigtigt svar på rutinemæssige behov for toksicitet screening, til industrielle krav om overvågning eller til lovmæssige formål 3. Den foreslåede metode indebærer, at dødeligheden som et endepunkt. Antallet af overlevende blev talt, og procentdelen af døde blev beregnet. Larverne blev anset for døde, hvis de ikke udviser nogen intern eller ekstern bevægelser i flere sekunder af observation 4. Denne procedure blev standardiseret afprøvning af et referencestof (natriumdodecylsulfat), nogle resultater er rapporteret i dette arbejde. Denne artikel følger en video, der beskriver udførelsen af proceduremæssige toksicitetsundersøgelser, der viser alle de trin i forbindelse med protokollen.
Protocol
Discussion
Artemia er en af de mest værdifulde testorganismerne til rådighed for økotoksicitetsprøvning og forskning hidtidige giver os mulighed for at oplyse, at det er muligt at opretholde flere muligheder relateret til Artemia brug i toksikologi og økotoksikologi. De karakteristika, der bliver denne organisme i en egnet art til bioassays er: en bred geografisk fordeling, høj tilpasningsevne til ugunstige miljøforhold og varierede næringsstoffer, relativt simpelt laboratorium kultur og vedligeholdelse, …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Produceret af Loredana Manfra af Institut for miljøbeskyttelse og forskning (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) og Federica Savorelli for Regional agenturet for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italien).
Referencemedlemmer for sub-arbejdsgruppe på Artemia krebsdyr inden for biologiske metoder Group – Saltvand / brakvand og sediment i UNICHIM Kommissionen om vandkvalitet (Institute for tekniske standarder, der opererer i den kemiske sektor).
Videography og redigering af Marco Pisapia af ISPRA (Web Unit).
Produktion Koordinering af Anna Maria Cicero og Erika Magaletti af ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).
Vi vil gerne takke det regionale agenturet for miljøbeskyttelse af Emilia-Romagna, Ferrara Branch, den biologiske metoder Group – Saltvand / brakvandVand og sediment i UNICHIM Kommissionen om vandkvalitet og Luciana Migliore, Tor Vergata Universitet (Rom) for deres samarbejde Rossella Boscolo og Massimo Gabellini af ISPRA (Institut for Forebyggelse og afbødning af virkninger) for deres finansielle støtte; Fabio Matassa og London School of Languages i Rom for deres sproglige støtte.
Materials
Produced by Loredana Manfra of Institute for environmental protection and research (ISPRA-Department of Environmental Quality Monitoring) and Federica Savorelli of Regional Agency for Environmental Protection (Emilia-Romagna, Italy).
Reference Members for the sub-working Group on the Artemia crustacean within the Biological Methods Group – Saltwater/Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality (the institute for technical standardization operating in the chemical sector).
Videography and editing by Marco Pisapia of ISPRA (Scientific Advisory and Documentation Services).
Production Coordination by Anna Maria Cicero and Erika Magaletti of ISPRA (Department of Environmental Quality Monitoring).
We would like to thank the Regional Agency for Environmental Protection of Emilia-Romagna, Ferrara Branch and the Biological Methods Group – Saltwater /Brackish Water and Sediment of the UNICHIM Commission on Water Quality for their cooperation; Rossella Boscolo and Massimo Gabellini of ISPRA (Department of Prevention and Mitigation of Impacts) for their financial support; and the London School of Languages in Rome for their linguistic support.
| Name of the reagent | Company | Product number |
| Sodium Dodecyl Sulfate | Sigma-Aldrich | L4390 |
Appendix
The algal media has to be prepared using analytical quality reagents.
A liter of nutrient solution is prepared by dissolving 300 g of NaNO3, 30 g of KH2PO4 and 20 g of NH4Cl in distilled water.
Four initial solutions (A, B, C, D) of minerals are prepared as follows:
- A liter of solution “A” containing 30 g of ZnSO4 H2O, 25 g of CuSO4 5 H2O, 30 g of CoSO4 7 H2O and 20 g of MnSO4 H2O in distilled water;
- A liter of solution “B” containing 50 g of FeCl3 •6 H2O in distilled water;
- A liter of solution “C” containing 25 g of Na2MoO4 •2 H2O in distilled water;
- A liter of solution “D” containing 50 g di Na2EDTA •2 H2O in distilled water.
A liter of a final solution of minerals (solution “E”) is obtained adding aliquots of the above-mentioned solutions to distilled water. The following order of addition is recommended: 100 ml of solution “D”, 10 ml of solution “C”, 10 ml of solution “B” and 10 ml of solution “A”.
Three initial solutions (F, G, H) of vitamins are prepared as follows:
- A liter of solution “F” containing 100 mg of biotin in distilled water;
- A liter of solution “G” containing 10 g of thiamine in distilled water;
- A liter of solution “H” containing 100 mg of cobalamin in distilled water.
A liter of a final solution of vitamins (solution “I”) is obtained adding 10 ml of the three initial solutions to distilled water.
A liter of the algal media is prepared by dissolving 1 ml of the nutrient solution, 1 ml of the mineral final solution (solution “E”) and 1 ml of the vitamin final solution (solution “I”) in seawater. This latter may be obtained by dissolving recognized analytical quality reagents or a commercially available formulation in distilled or de-ionized water. Salt blends for creating the ideal saltwater are commercially available, e.g. the Instant Ocean mixtures. It is recommended the using of a seawater with salinity of 30 (±2) PSU and temperature of 20 (±1) °C.
References
- Togulga, M. The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii. Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).
- Persoone, G., Wells, P. G., Sorgeloos, P. Artemia in aquatic toxicology: a review. Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterization Toxicology. , 259-275 (1987).
- Nunes, B. S., Carvalho, F. D., Guilhermino, L. M., Stappen, G. V. a. n. Use of the genus Artemia in ecotoxicity testing. Envir. Poll. 144, 453-462 (2006).
- APAT IRSA-CNR. . Metodi analitici per le acque Manuali e Linee guida 29/2003. Terzo Metodo, 8060 (2003).
- Sorgellos, P., Wielen, C. R. e. m. i. c. h. e. -. V. a. n. D. e. r., Persoone, G. The use of Artemia nauplii for toxicity tests – a critical analysis. Ecotox. Env. Saf. 2, 249-255 (1978).
- Savorelli, F., Palazzi, D., Gorbi, G., Invidia, M., Sei, S., Magaletti, E., Manfra, L., Gelli, F. Set up of a standard methodology for 14-day bioassay on Artemia franciscana and A. parthenogenetica. Biol. Amb. 21, 27-36 (2007).
- Brix, K. V., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Chronic toxicity of arsenic to the Great Salt Lake brine shrimp, Artemia franciscana. Ecotox. Environ. Saf. 54, 169-175 (2003).
- Brix, K. V., Deforest, D. K., Cardwell, R. D., Adams, W. J. Derivation of a chronic site-specific water quality standard for selenium in the Great Salt Lake, Utah, USA. Environ. Toxicol. Chem. 23, 606-612 (2004).
- . Qualitá dell’acqua – Determinazione della tossicitá letale a 14 giorni con Artemia franciscana (Crustacea: Anostraca). Commissione UNICHIM “Qualitá dell’acqua” Gruppo di Lavoro “Metodi Biologici” Sottogruppo “Acque salate/salmastre e sedimenti”. , (2010).
- Varo, I., Navarro, J. C., Amat, F., Guilhermino, L. Characterisation of cholinesterases and evaluation of the inhibitory potential of chlorpyrifos and dichlorvos to Artemia salina and Artemia parthenogenetica. Chem. 48, 563-569 (2002).
