Cette étude concerne le développement et la standardisation d'un protocole méthodologique précieux pour déterminer à long terme (14 jours) toxicité létale exercée par des substances chimiques, les eaux usées industrielles ou des eaux usées et liquides des échantillons environnementaux sur le crustacé d'eau salée, Artemia franciscana.
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Article de méthode
À long terme des essais de toxicité létale avec le Crustacé Artemia franciscana
Dans cet article
Résumé
Résumé
Nos activités de recherche cibler l'utilisation de méthodes biologiques pour l'évaluation de la qualité de l'environnement, avec une référence particulière à l'eau salée / eau saumâtre et les sédiments. Le choix des indicateurs biologiques doivent être fondées sur des connaissances scientifiques fiables et, éventuellement, de la disponibilité des procédures normalisées. Dans cet article, nous présentons un protocole standardisé qui a utilisé la crustacés marins Artemia pour évaluer la toxicité des produits chimiques et / ou de marins matrices environnementales. Des scientifiques proposent que la crevette de saumure (Artemia) est un candidat approprié pour le développement d'un bio-essai standard pour l'utilisation dans le monde entier. Un certain nombre de documents ont été publiés sur les effets toxiques des produits chimiques divers et des substances toxiques sur la crevette de saumure (Artemia). L'avantage majeur de ce crustacé pour les études de toxicité est la disponibilité globale des kystes secs; ceux-ci peuvent être immédiatement utilisés dans les essais et la culture difficile n'est pas exigé 3. La méthode proposée consiste à la mortalité comme critère d'évaluation. Les chiffres de survivants ont été comptés et le pourcentage de décès ont été calculés. Les larves ont été considérés comme morts si elles ne présentent pas de tout mouvement interne ou externe pendant plusieurs secondes d'observation 4. Cette procédure était de tests normalisés d'une substance de référence (dodécyl sulfate de sodium); certains résultats sont rapportés dans ce travail. Cet article accompagne une vidéo qui décrit les performances des tests de toxicité de la procédure, montrant toutes les étapes liées au protocole.
Protocole
1. La méthode standard
Notre test consiste à exposer les larves d'Artemia à un intervalle de concentrations de la substance ou un échantillon d'essai pour la détermination des niveaux de concentration ou de dilution qui causent la mort de 50% des organismes (CL 50) exposés pendant 14 jours et répondant aux conditions définies par cette méthode. Si nécessaire et possible, celui-ci peut également être déterminée: a) le niveau de concentration qui provoque la mort de 20% des organismes exposés (LC 20); b) le niveau le plus élevé de concentration qui n'a pas analysé de déterminer un taux de mortalité p....
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Discussion
Artemia est l'un des organismes d'essai les plus précieuses disponibles pour des essais d'écotoxicité et de la recherche fait jusqu'ici nous permet d'affirmer qu'il est possible de maintenir plusieurs options relatives à l'utilisation d'Artemia en toxicologie et écotoxicologie. Les caractéristiques qui font de cette organisme dans une espèce appropriée pour des essais biologiques sont les suivants: une répartition géographique large, une grande adaptabilité aux condition.......
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Déclarations de divulgation
Pas de conflits d'intérêt déclarés.
Remerciements
Produit par Loredana Manfra de l'Institut pour la protection de l'environnement et de la recherche (ISPRA-ministère de la surveillance de la qualité de l'environnement) et Federica Savorelli de l'Agence régionale pour la protection de l'environnement (Emilie-Romagne, Italie).
Membres de référence pour le Groupe de travail sur les sous-le crustacé Artemia au sein du Groupe des méthodes biologiques - Saltwater / eau saumâtre et des sédiments de la Commission sur la qualité de l'eau UNICHIM (l'institut de normalisation technique d'exploitation dans le secteur de la chimie).
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Matériaux
Produit par Loredana Manfra de l'Institut pour la protection de l'environnement et de la recherche (ISPRA-ministère de la surveillance de la qualité de l'environnement) et Federica Savorelli de l'Agence régionale pour la protection de l'environnement (Emilie-Romagne, Italie).
Membres de référence pour le Groupe de travail sur les sous-le crustacé Artemia au sein du Groupe des méthodes biologiques - Saltwater / eau saumâtre et des sédiments de la Commission sur la qualité de l'eau UNICHIM (l'institut de normalisation technique d'exploitation dans le secteur de la chimie).
Vidéographie et montage par Marco Pisapia de l'ISPRA (scientifique consultatif et services de documentation).
Coordination de la production par Anna Maria Cicéron et Erika Magaletti de l'ISPRA (ministère de la surveillance de la qualité de l'environnement).
Nous tenons à remercier l'Agence régionale pour la protection de l'environnement de l'Emilie-Romagne, Ferrare et la Direction générale de BiologiCal Groupe Méthodes - Saltwater / eau saumâtre et des sédiments de la Commission sur la qualité de l'eau UNICHIM de leur coopération; Rossella Boscolo et Massimo Gabellini de l'ISPRA (Département de la prévention et l'atténuation des impacts) pour leur soutien financier, et la London School of Languages à Rome pour leur soutien linguistique.
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Nom du réactif | Entreprise | Numéro de l'article | |
| Dodécyl sulfate de sodium | Sigma-Aldrich | L4390 |
Appendice
La algues médias doit être préparé en utilisant des réactifs de qualité analytique.
Un litre de solution nutritive est préparée en dissolvant 300 g de NaNO 3, 30 g de KH 2 PO 4 g et 20 de NH 4 Cl dans l'eau distillée.
Quatre solutions de départ (A, B, C, D) De minéraux sont préparés comme suit:
- Un litre de solution "A" contenant 30 g de ZnSO 4 H 2 O, 25 g de CuSO 4 5 H 2 O, 30 g de CoSO 4 7 H 2 O et 20 g de MnSO 4 H 2 O dans l'eau distillée;
- Un litre de solution "B" contenant 50 g de FeCl 3 • 6 H 2 O dans l'eau distillée;
- Un litre de solution de "C" contenant 25 g de Na 2 MoO 4 • H 2 O 2 dans de l'eau distillée;
- Un litre de solution de "D" contenant 50 g de Na 2 EDTA di • H 2 O 2 dans de l'eau distillée.
Un litre d'une solution définitive de minéraux (solution "E") est obtenu en ajoutant des aliquotes des solutions mentionnées ci-dessus à l'eau distillée. L'ordre de plus il est recommandé: 100 ml de solution "D", 10 ml de solution «C», 10 ml de solution «B» et 10 ml de solution «A».
Trois initiativessolutions L (F, G, H) de vitamines sont préparés comme suit:
- Un litre de solution de «F», contenant 100 mg de biotine dans l'eau distillée;
- Un litre de solution "G" contenant 10 g de thiamine dans l'eau distillée;
- Un litre de solution "H" contenant 100 mg de cobalamine dans l'eau distillée.
Un litre d'une solution définitive de vitamines (solution «I») est obtenu en ajoutant 10 ml des trois solutions initiales à l'eau distillée.
Un litre de l'algue des médias est préparée par dissolution de 1 ml de la solution nutritive, 1 ml de la solution finale minérale (solution «E») et 1 ml de la solution finale en vitamine (solution «I») dans l'eau de mer. Ce dernier peut être obtenue par dissolution reconnus réactifs de qualité analytique ou une formulation disponible dans le commerce dans l'eau distillée ou désionisée. Mélanges de sel pour la création de l'eau salée idéale sont disponibles dans le commerce, par exemple, les mélanges Instant Ocean. Il est recommanDed l'aide d'une eau de mer dont la salinité est de 30 (± 2) PSU et de la température de 20 (± 1) ° C.
Références
- Togulga, M. The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii. Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).
- Persoone, G., Wells, P. G. Artemia in aquatic toxicology: a review. Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterizat....
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Réimpressions et autorisations
