Мы представляем микрофлюидных подход к экспрессии белка массивов. Устройство состоит из тысяч реакционных камерах контролируется микро-механических клапанов. Микрофлюидных устройство соединяется с микрочипов печатных библиотеки генов. Эти гены затем расшифрованы и переведены на-чипе, в результате чего белок массива готово для экспериментального использования.
Быстро растущая областях, таких как биология систем, требующих разработки и внедрения новых технологий, обеспечивая высокую пропускную способность и высокую точность измерений больших систем. Microfluidics обещает выполнить многие из этих требований, таких как выполнение высокой пропускной экспериментов скрининга на-чипе, охватывающий биохимических, биофизических и клеточных анализов 1. С первых дней устройства микрофлюидики, это поле резко эволюционировали, что приводит к развитию микрофлюидных масштабная интеграция 2,3. Эта технология позволяет интегрировать тысяч микромеханических клапанов на одном устройстве с почтовую размера следа (рис. 1). Мы разработали высокой пропускной микрофлюидных платформой для создания в пробирке экспрессии белка массива (рис. 2) имени PING (белковые взаимодействия сети Generator). Эти массивы могут служить в качестве шаблона для многих экспериментовтаких как белок-белковых 4, белка-РНК 5 или белок-ДНК 6 взаимодействий.
Устройство состоит из тысяч реакционных камер, которые индивидуально запрограммировать с помощью microarrayer. Выравнивание этих печатных микрочипы для устройств микрофлюидики программ каждой камеры с одного места ликвидации возможного загрязнения или перекрестной реактивности Кроме того, создание микрочипов с использованием стандартных методов микрочипов кровянистые выделения также очень модульной, что позволяет выстроив белков 7, ДНК-8, малых молекул, и даже коллоидные суспензии. Потенциальное воздействие на микрофлюидики биологических наук является значительным. Число микрофлюидики на основе анализа уже представили новые идеи в структуре и функции биологических систем, и поле микрофлюидики будет продолжать влиять на биологию.
В этой статье мы представляем метод для генерации белка массивов в высокой пропускной способности, используя микрофлюидных платформы. Массив поколения на основе микрочипов печати ДНК шаблоны и в пробирке экспрессии белка с ДНК в микрофлюидных устройства.
Наш рома…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана Мари Кюри международной интеграции гранта.
Reagent/Equipment | Company | Catalogue number |
PDMS- SYLGARD 184 | Dow Corning USA | ESSEX-DC |
Chlorotrimethylsilane (TMCS | Sigma-Aldrich | C72854 |
Epoxy coated glass substrates | CEL Associates USA | VEPO-25C |
Poly ethylene glycole (PEG) | Sigma-Aldrich | 81260 |
D-trehalose dihydrate | Sigma-Aldrich | T9531 |
Biotinylated-BSA | Pierce | PIR-29130 |
Neutravidin | Pierce | 31050 |
penta-His-biotin | Qiagen | 34440 |
Hepes | Biological Industries | 03-025-1B |
TNT-T7 | Promega | L5540 |
C-myc Cy3 antibody | Sigma -Aldrich | |
Control box | Stanford Microfluidics Foundry | |
Mold | Stanford Microfluidics Foundry | |
Pin | New England Small Tubes Corporation | |
Tygon microbore tubing | Tygon | S-54-HL |
Microarrayer | Bio Robotics | MicroGrid 610 |
Silicone pins | Parallel Synthesis | SMT-S75 |