דגם Murine סגור החזה של איסכמיה של שריר הלב reperfusion
Summary
טראומה ניתוחית גורם לתגובה דלקתית. ציטוקינים ligands אנדוגניים ידועים לווסת את גודל האוטם בשריר הלב בעקבות איסכמיה ו reperfusion. אנו מציגים שונה סגור החזה מודל של איסכמיה reperfusion Murine באמצעות משקולות תלויות כדי למזער את ההשפעות של פתיחת בית החזה.
Abstract
הטראומה של פתיחת בית החזה כירורגית ב פתוח החזה דגמים של קשירת כלילית משרה תגובה חיסונית אשר משנה מנגנונים שונים המעורבים איסכמיה ו reperfusion. התגובה החיסונית כוללת ביטוי ציטוקינים ושחרור או הפרשת ligands אנדוגניים של קולטני החיסון המולדת. ההפעלה של חסינות מולדת עלולה לווסת את גודל האוטם. יש לנו שונה המודל הקיים Murine סגור החזה באמצעות משקולות תלויות אשר יכול להיות שימושי עבור לימוד שריר הלב לפני ואחרי postconditioning ואת תפקידו של חסינות מולדת ב reperfusion איסכמיה בשריר הלב. מודל זה מאפשר חיות להתאושש מהטראומה כירורגית לפני תחילתה של איסכמיה בשריר הלב.
הרדמה נדיפים נחקרו מאוד ותוצאה נפשית מראש שלהם ללב איסכמית ידועה. עם זאת, ההשפעה המגנה מונע את השימוש במודלים של החזה הפתוחים של קשירת עורקים כליליים. לכן, יתרון נוסף יכול להיות השימוש הדואר הרדמה נדיפים לשליטה גם על מכשור במודל סגור החזה כרונית, שכן ההשפעה נפשית מראש שלהם נמשך עד 72 שעות. מחלות לב כרונית עם איסכמיה לסירוגין מודלים פגע מספר יישומים אפשריים אחרים של דגם זה.
עבור דגם סגור החזה כרונית, עכברים מחובר לצינור מאוורר לעבור פתיחת בית החזה בוטה לרוחב דרך החלל בין צלעי 4. בעקבות זיהוי של הקדמי השמאלי יורד ליגטורה הוא עבר מתחת הספינה ואת שני הקצוות תפר הם מושחל דרך occluder. לאחר מכן, בשני הקצוות תפר מועברים דרך דופן החזה, קשורה ליצירת לולאה ויצא ברקמה התת עורית. לאחר סגירת החזה ההתאוששות למשך 5 ימים, בעכברים מורדמים שוב, עור החזה נפתח מחדש ומשקולות תלויים הם מחוברת לולאה תחת א.ק.ג. שליטה.
בסופו של פרוטוקול איסכמיה / reperfusion, לבבות ניתן מוכתם TTC של האוטםגודל הערכה או לעבור קיבעון זלוף לאפשר מחקרים morphometric בנוסף היסטולוגיה ו אימונוהיסטוכימיה.
Protocol
Discussion
יש לנו מודל שונה Murine סגור החזה על ידי גישה הלב באמצעות פתיחת בית החזה השמאלי בין צלעי לרוחב והוביל את התפרים הבנאדם לחזה בקו midclavicular שמאל. לעזוב את בית החזה הגרמי שלם יהיה למזער טראומה, הצורך בתרופות כאב, זיהום באתר הניתוח ובכך, להקל על ההתאוששות. באמצעות שמירה על העורק…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו מודים דניאל Duerr את עצתו בנוגע זלוף, קיבעון הטכניקה.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Vapor | Drägerwerk AG | Isoflo |
| Microscope | Leica | M80 |
| Light source | Schott | KL 1500 LCD |
| Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | |
| MiniVent Type 845 | Hugo Sachs Elektronik | |
| 8-0 Prolene | Ethicon | BV130-5 6.5mm 3/8c |
| 6-0 Prolene | Ethicon | BV-1 9.3 mm 3/8c |
| Kalt suture needle size 3 | FST | 12050-03 |
| Triphenyltetrazolium | Sigma Aldrich | 93145 |
| Phthalo blue | Heucotech LTD | |
| PowerLab | ADInstruments |
References
- Lim, S. Y., Davidson, S. M., Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. Preconditioning and postconditioning: the essential role of the mitochondrial permeability transition pore. Cardiovasc. Res. 75, 530-535 (2007).
- Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. Use of a Hanging Weight System for Coronary Artery Occlusion in Mice. J. Vis. Exp. (50), e2526 (2011).
- Michael, L. H. Myocardial infarction and remodeling in mice: effect of reperfusion. Am. J. Physiol. 277, H660-H668 (1999).
- Nossuli, T. O. A chronic mouse model of myocardial ischemia-reperfusion: essential in cytokine studies 52. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 278, H1049-H1055 (2000).
- Irwin, M. W. Tissue expression and immunolocalization of tumor necrosis factor-alpha in postinfarction dysfunctional myocardium 846. Circulation. 99, 1492-1498 (1999).
- Michael, L. H. Creatine kinase and phosphorylase in cardiac lymph: coronary occlusion and reperfusion. Am. J. Physiol. 248, 350-359 (1985).
- Tonkovic-Capin, M. Delayed cardioprotection by isoflurane: role of K(ATP) channels 765. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, H61-H68 (2002).
- Tsutsumi, Y. M. Role of caveolin-3 and glucose transporter-4 in isoflurane-induced delayed cardiac protection. Anesthesiology. 112, 1136-1145 (2010).
- Benedict, P. E., Benedict, M. B., Su, T. P., Bolling, S. F. Opiate drugs and delta-receptor-mediated myocardial protection. Circulation. 100, II357-II360 (1999).
- Ren, X., Wang, Y., Jones, W. K. TNF-alpha is required for late ischemic preconditioning but not for remote preconditioning of trauma. J. Surg. Res. 121, 120-129 (2004).
- Andrassy, M. High-mobility group box-1 in ischemia-reperfusion injury of the heart. Circulation. 117, 3216-3226 (2008).
- Kim, S. C. Extracellular heat shock protein 60, cardiac myocytes, and apoptosis. Circ. Res. 105, 1186-1195 (2009).
- Lin, L. HSP60 in heart failure: abnormal distribution and role in cardiac myocyte apoptosis. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 293, 2238-2247 (2007).
