Ici, nous présentons un faible coût, durable dispositif cryotolerant pour la récupération d'échantillon à partir de réservoirs de Dewar remplis avec de l'azote liquide. La facilité de la construction et la conception modulaire de l'appareil rend le processus de récupération de l'échantillon à partir de réservoirs cryogéniques sûr et facile.
Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.
Article de méthode
Do-It-Yourself dispositif de récupération d'échantillons cryoconservés tombé accidentellement dans les réservoirs de stockage cryogéniques
Dans cet article
Résumé
Résumé
L'azote liquide est incolore, inodore, très froid (-196 ° C) liquide maintenu sous pression. Il est couramment utilisé comme fluide cryogénique pour le stockage à long terme de matériaux biologiques tels que le sang, des cellules et tissus 1,2. La nature de l'azote liquide cryogénique, tandis idéal pour la conservation des échantillons, peut provoquer une congélation rapide des tissus vivants au contact - connu sous le nom «cryogénique brûler» 2, ce qui peut conduire à des gelures sévères chez les personnes étroitement impliquées dans le stockage et la récupération des échantillons provenant de Dewars. En outre, comme l'azote liquide s'évapore il réduit la concentration d'oxygène dans l'air et peuvent provoquer l'asphyxie, en particulier dans des espaces confinés 2.
Dans les laboratoires, les échantillons biologiques sont souvent stockées dans des cryotubes ou cryoboîtes empilés dans des racks en acier inoxydable dans les réservoirs de Dewar 1. Ces supports de stockage sont pourvus d'un arbre long pour empêcher de glisser hors des boîtes à partir des supports et dans le fond deDewars lors de la manipulation de routine. Trop souvent, cependant, des boîtes ou flacons de précieux échantillons de s'échapper et de couler au fond de la cuve d'azote liquide remplie. Dans de tels cas, les échantillons pourraient être récupérés péniblement après le transfert de l'azote liquide dans un récipient de secours ou de le jeter. Les boîtes et flacons peut alors être récupéré à partir de façon relativement sûre vidé Dewar. Cependant, la nature de l'azote liquide cryogénique et son taux d'expansion fait coulé dangereux de récupération de l'échantillon. Il est souvent recommandé par les bureaux de sécurité que l'extraction d'échantillon sera jamais réalisée par une seule personne. Une autre alternative est d'utiliser commercialement disponibles accapareurs fraîches ou des pinces pour arracher les 3 flacons. Cependant, la visibilité limitée dans les sombres liquides Dewars remplis pose un obstacle majeur à leur utilisation.
Dans cet article, nous décrivons la construction d'un dispositif de récupération de bricolage Cryotolerant, ce qui rend la récupération de l'échantillon de Dewar contenant des fluides frigorigènes, à la fois la sécurité d'une faciles.
Protocole
1. Assemblée des périphériques Cryotolerant pour la récupération de Cryoboîtes
- En utilisant des pinces, de redresser un côté de 3 côtés Strong-Tie (figure 1A) pour faire une forme de L Strong-Tie Remarque montré dans la figure 1B:. Les dimensions de Strong-Tie peuvent être sélectionnés en fonction du diamètre du col de Dewar .
- Fixez deux de ces forts des liens avec une sangle Strong-Tie T (figure 2) à l'aide de la Couronne écrou boulon, la rondelle et la vis pour former la base Cryoscoop comme le montre la figure 3 (AB). Remarque: Deux liens forts sont utilis....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Discussion
Une des méthodes les plus courantes de récupération cryoboîtes et cryotubes du fond de la cuve Dewar, est de clarifier l'azote liquide dans un récipient de secours et de sortir les échantillons restants dans le ballon ou flottant dans l'azote liquide décanté. C'est, cependant, une pratique dangereuse qui peut causer des brûlures cryogéniques ou asphyxie due à une exposition prolongée à des vapeurs d'azote liquide 2. Autre manière commune de la récupération des cryotubes déchus implique l'u.......
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Déclarations de divulgation
Pas de conflits d'intérêt déclarés.
Remerciements
DIY cryogénique de récupération dispositif a été testé en cours des projets de "prénylation des protéines Modélisation bactérienne dans les cellules eucaryotes à l'aide de la bioinformatique et des approches moléculaires», parrainé par Mary Louise Andrews Prix pour le programme de recherche sur le cancer, en Virginie Académie des sciences, "signification physiologique de l'ARN dans le plasma d'édition Les cellules dendritiques »parrainé par le Jeffress Thomas F. Miller et Kate Jeffress Memorial Trust et du contrat Etat 16.740.11.0364 (Ministère de la Science et de l'éducation, de la Russie). Nous tenons à remercier Beth Eom de l'aide pour l'ex....
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Nom du réactif | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
| Hillman Group plaqué rainuré plat 1-3/8 x 4 pieds; 14 Gauge | Quincailleries locale | N / A | 1 unité requise |
| Couronne Bolt en acier inoxydable n ° 6 - 32 x 3/8 po Vis à tête ovale Phillips machine d'entraînement | Quincailleries locale | Modèle # 42281 | 4 unités requises |
| Couronne Bolt 3/8 po x 1-1/2 po Zingués Rondelles Fender Steel | Quincailleries locale | Modèle # 20122 | 4 unités requises |
| Couronne Bolt Zinc plaqué n ° 8-32 Ecrou Vis machine | Quincailleries locale | Modèle # 18512 | 4 unités requises |
| Simpson Strong-Tie BC40Z 4 po In.x4 moitié de base | Matériel localemagasiner | Modèle # BC40Z | 2 unités requises |
| Simpson Strong-Tie 6 po x 6 po Strap T | Quincailleries locale | Modèle # 66T | 1 unité requise |
| Oneida 6 "passoire | Epicerie locale | Modèle # 7859W | 1 unité requise |
| The Hillman Group Galvanisé écrous hexagonaux 3/8-16 | Quincailleries locale | Modèle #: 810509 | 6 unités requises |
| The Hillman Group galvanisé boulons hexagonaux 3/8- 16 | Quincailleries locale | 4 unités requises | |
| Mousse pour l'isolation | Quincailleries locale | 1 unité requise | |
| Tournevis | Quincailleries locale | 1 unité requise | |
| Pinces | Quincailleries locale | 1 unité requise |
Références
- Kittel, P. Advances in Cryogenic Engineering. , Springer. 41(1996).
- Edeskuty, F. J., Walter, F. Stewart Safety in the handling of cryogenic fluids. , Plenum Press. New York. (1996).
- Council, N. R.
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Réimpressions et autorisations
Explorer plus d’articles
Dispositif de récupération DIY cryotolérantStockage d'azote liquideRécupération d'échantillons cryogéniquesRécupération dans un réservoir DewarMéthode de récupération de cryotubesTechnique de récupération de cryoboxAssemblage de liens robustesModification de plaque rainuréeAdaptation de crépine en acier inoxydableSécurité des gants cryogéniques
