L'utilisation de modèle animal de sepsis pour évaluer de nouvelles thérapies à base de plantes

Summary

Sepsis se réfère à un syndrome de réponse inflammatoire systémique résultant d'une infection microbienne, et peut être simulé par une technique chirurgicale appelée ligature du caecum et à la perforation (CLP). Nous décrivons ici une méthode pour utiliser un modèle animal CLP-induite pour cribler des herbes médicinales pour les agents thérapeutiques.

Abstract

Septicémie se réfère à un syndrome de réponse inflammatoire systémique résultant d'une infection microbienne. Il a été régulièrement simulée chez les animaux par des techniques plusieurs, notamment de perfusion de toxine bactérienne exogène (endotoxémie) ou bactéries (bactériémie), ainsi que la perforation chirurgicale du caecum par ligation du caecum et la perforation (CLP) ^1-3. CLP permet déversement des bactéries et la contamination fécale de la cavité péritonéale, imitant la maladie clinique chez l'homme de l'appendicite perforée ou diverticulite. La gravité de la septicémie, comme en témoignent les taux de mortalité éventuels, peut être contrôlée chirurgicalement en faisant varier la taille de l'aiguille utilisée pour la ponction du caecum ^2. Chez les animaux, CLP induit similaire, hémodynamique biphasique réponses cardiovasculaires, métaboliques et immunologiques comme observé au cours de l'évolution clinique de l'infection humaine ^3. Ainsi, le modèle CLP est considéré comme l'un des modèles les plus pertinents sur le plan clinique pour le sepsis expérimental ^1-3. </ P>

Divers modèles animaux ont été utilisés pour élucider les mécanismes sous-jacents complexes la pathogenèse de la septicémie expérimentale. La conséquence mortelle de l'infection est imputable en partie à une accumulation excessive de cytokines début (comme le TNF, l'IL-1 et l'IFN-γ) ^4-6 et des médiateurs pro-inflammatoires (par exemple la fin, HMGB1) ^7. Par rapport à début cytokines pro-inflammatoires, la fin d'action des médiateurs ont une plus large fenêtre thérapeutique pour les applications cliniques. Par exemple, l'administration retardée de HMGB1-anticorps neutralisants commençant 24 heures après CLP, toujours sauvé les souris de létalité ^8,9, établissant HMGB1 en tant que médiateur de la septicémie mortelle fin. La découverte de HMGB1 en tant que médiateur à action retard a lancé un nouveau champ d'investigation pour le développement de thérapies utilisant septicémie médecine traditionnelle chinoise à base de plantes. Dans cet article, nous décrivons une procédure de CLP-induite septicémie, et son utilisation dans le dépistage médecine par les plantes pour HMGB1-ciblage des thérapies.

Protocol

1. Mise en place d'un modèle animal de la septicémie Les souris sont anesthésiées avec de la kétamine (75 mg / kg, par voie intramusculaire, im) et de xylazine (10 mg / kg, im), et placé en position couchée. Fixer les pieds de la souris avec du ruban adhésif afin d'assurer une position stable. Nettoyez l'abdomen avec 3 gommages alternance de bétadine ou autre désinfectant de la peau et de l'alcool. Ensuite, faire une incision médiane de 15 mm pour exposer le caec…

Discussion

Dans le laboratoire, plusieurs modèles animaux d'infection ont été employées pour comprendre la pathogenèse de l'infection afin de développer de nouvelles thérapies potentielles. Leur pertinence clinique reste un sujet de débat avant l'application réussie des études sur les animaux dans des applications cliniques pour le sepsis. Bien que des anticorps neutralisants contre des cytokines précoce (par exemple, le TNF) jouaient un rôle protecteur dans des modèles animaux de bactériémie / endotoxé…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number
Betadine	Purdue Products L.P.	25655-41-8
imipenem	Merck & Co., Inc.	9882821
Ketamine HCl	Hospira Inc.	RL-0065
Xylazine	Lloyd Laboratories	4821
Autoclip	Becton Dickinson	427631
4-0 silk suture	Roboz	SUT-15-2
Surflo I.V. Catheter	Terumo	SR*OX2419CA
RayBio mouse cytokine antibody array	RayBiotech, Inc.	AAM-CYT-3
Thioglycollate	Becton Dickinson	211716