Visualização e análise do fluxo sangüíneo e consumo de oxigênio na microcirculação hepática: aplicação para um modelo Hepatite Aguda
Summary
Um sistema óptico foi desenvolvido para visualizar a microcirculação hepática com eritrócitos marcados com FITC e para medir a pressão parcial de oxigénio no microvasos com laser assistida phosphorimetry. Este método pode ser usado para investigar os mecanismos fisiológicos e patológicos, analisando a estrutura microvascular, o diâmetro, a velocidade de fluxo de sangue, e tensão de oxigénio.
Abstract
Há uma grande discrepância entre a oferta ea demanda de oxigênio no fígado, porque o consumo de oxigênio hepático é relativamente elevada, mas cerca de 70% do suprimento sanguíneo hepático é pouco sangue oxigenado da veia porta derivado do trato gastrointestinal e do baço. O oxigénio é entregue a hepatócitos de sangue que flui a partir de um ramo terminal da veia porta a uma vênula central através sinusóides, e isto faz um gradiente de oxigénio em lóbulos hepáticos. O gradiente de oxigénio é um parâmetro importante física que envolve a expressão de enzimas a montante ea jusante, na microcirculação hepática, mas a falta de técnicas de medição de consumo de oxigénio na microcirculação hepática atrasou a elucidação dos mecanismos relacionados com o metabolismo de oxigénio no fígado. Por conseguinte, utilizado marcado com FITC eritrócitos para visualizar a microcirculação hepática e utilizado laser assistida phosphorimetry para medir a pressão parcial de oxigénio no microvasos aí. Noncontact e medição óptico contínuo pode quantificar velocidades de fluxo de sangue, diâmetros dos vasos e gradientes de oxigênio relacionadas com o consumo de oxigênio no fígado. Em um modelo de hepatite aguda que fizemos através da administração de paracetamol para ratos, observamos pressão de oxigênio aumentou em ambos os vênulas portal e central, mas um gradiente de diminuição de oxigênio nos sinusóides, indicando que a necrose dos hepatócitos na zona pericentral poderia mudar a pressão de oxigênio e afetar a expressão da enzima na zona periportal. Em conclusão, os nossos métodos ópticos para hemodinâmica hepáticas de medição e consumo de oxigênio pode revelar mecanismos relacionados à doença hepática.
Protocol
Discussion
Fornecimento de oxigênio aos tecidos é um papel essencial da microcirculação, e um monte de papéis descrever doenças relacionadas à anatomia microvascular e reologia 6. O fluxo de sangue hepático é uma combinação de sangue arterial e venoso. Cerca de 30% do fluxo sanguíneo para o fígado é bem oxigenado sangue fornecido pela artéria hepática e os outros 70%, fornecido pela veia portal, é o fluxo venoso mal o sangue oxigenado a partir do baço e do tracto gastrointestinal 7. Doenças…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Os autores agradecem a Sra. Risa Otsuka de assistência técnica e experiências de ajuda. Esta pesquisa foi parcialmente financiada pelo Ministério da Educação, Ciência, Esportes e Cultura, Grant-in-Aid para Jovens Cientistas (B), 2010, 22700476, e Memorial Foundation Suzuken 2010 para KT E esse estudo foi suportado por Pesquisa e Desenvolvimento de Simulação da Próxima Geração Integrada da matéria viva, uma parte do Desenvolvimento e Uso do Projeto de próxima geração de supercomputadores do MEXT, e em parte por JST ERATO Projeto Biologia Gás Suematsu.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Pd(II) meso-Tetra(4-carboxyphenyl)porphine | Frontier Scientific, Inc. | PdT790 |
| Fluorescein isothiocyanate isomer I | Sigma-Aldrich Co. | F7250 |
| Acetaminophen | Sigma-Aldrich Co. | A7085 |
| Name of the equipment | Company | Catalogue number | |
| Equipment | |||
| photomultiplier tube | hamamatsu photonics k.k | H10722-20 |
References
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