Summary

Ovariëctomie en 17β-estradiol Vervanging bij ratten en muizen: een visuele demonstratie

Published: June 07, 2012
doi:

Summary

Ovariectomie en daaropvolgende vervanging van 17β-oestradiol door silastic capsules en perorale Nutella worden aangetoond bij ratten en muizen.

Abstract

Oestrogenen zijn een familie van vrouwelijke geslachtshormonen met een uitzonderlijk breed spectrum van effecten. Als ratten en muizen gebruikt oestrogeen onderzoek wordt dikwijls ovariectomie om de snel delende hormoonproductie ablatie, vervangen 17β-oestradiol exogeen. Er is echter geen consensus over hoe het hormoon te worden toegediend om fysiologische serumconcentraties verkrijgen. Dit is cruciaal omdat de 17β-estradiol niveau / administratie methode diep van invloed op de experimentele resultaten 1-3. We hebben in een reeks van studies kenmerkend was voor de verschillende vormen van 17β-estradiol administratie, het vinden van die onderhuidse silastic capsules en per-orale moer-ijs Nutella zijn superieur aan de handel verkrijgbaar slow-release pellets (geproduceerd door het bedrijf Innovatief Onderzoek van Amerika) en dagelijkse injecties op het gebied van het produceren van fysiologisch serum concentraties van 17β-estradiol 4-6. Onder de advantages van de moer-ijs-methode, die eerder is gebruikt voor buprenorfine bestuur 7, is dat wanneer gebruikt voor het oestrogeen administratie het lijkt op perorale hormoonvervangende therapie en is niet-invasief. De subcutane silastic capsules zijn handig en produceren de meest stabiele serumconcentraties. Deze video artikel bevat stap-voor-stap demonstraties van ovariëctomie en 17β-estradiol hormoon vervanging door silastic capsules en perorale Nutella bij ratten en muizen, gevolgd door een bespreking van belangrijke aspecten van de administratieve procedures.

Protocol

1. Ovariëctomie via de Dorsale Route Verdoven dier, bijvoorbeeld met 1,5% isofluraan (4% inductie) in een zuurstof / lachgas 30% / 70% mengsel. Plaats het dier in buikligging op een verwarmingsplaat verbonden met een rectale thermometer. Het is belangrijk om een ​​dunne laag isolatie tussen de dieren en de plaat en dat de thermometer terugmeldingssysteem houdt de lichaamstemperatuur binnen 37 ± 0,5 ° C. Breng gel voor oogbescherming en beheren van 5 mg Rimadyl / kg lichaamsgewicht verdund in een zoutop…

Discussion

De administratie modi hierboven gepresenteerd hebben in eerdere studies bleek superieur aan commerciële slow-release tabletten en injecties op het gebied van het produceren van fysiologisch serum concentraties van 17β-estradiol. Terwijl de slow-release pellets te produceren zeer hoog en langdurig serumconcentratie pieken, de injecties veroorzaken extreme, dagelijks hormoonschommelingen en vereisen herhaalde stressvolle omgang met de dieren 4-6. Het belang van het kiezen van een adequate administratie modi w…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

De studie werd gefinancierd door de Universiteit van Linköping en de County Council van Östergötland.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Rimadyl, 50 mg/mL Pfizer 462986 Postoperative analgesia after ovariectomy.
Lubrithal eye gel Leo Laboratories   Eye protection during surgery.
Jodopax vet Pharmaxim   Surgery disinfection.
Vicryl 4-0 suture Johnson & Johnson   Wound suture and ovary ligation.
17β-estradiol, >98% Sigma E8875-1G In sesame oil for silastic capsules and Nutella.
Sesame oil Sigma S3547-1L Dissolving the 17β-estradiol.
Silastic tubing, ID/OD: 1.575/3.175 mm Dow Corning 508-008 Production of silastic capsules.
Wooden applicator stick Selefatrade 12-0783 Capping of silastic capsules.
Nutella Ferrero   Medium for peroral 17β-estradiol.

References

  1. Strom, J. O., Theodorsson, A., Theodorsson, E. Dose-related neuroprotective versus neurodamaging effects of estrogens in rat cerebral ischemia: a systematic analysis. J. Cereb. Blood Flow Metab. 29, 1359-1372 (2009).
  2. Strom, J. O., Theodorsson, E., Holm, L., Theodorsson, A. Different methods for administering 17beta-estradiol to ovariectomized rats result in opposite effects on ischemic brain damage. BMC Neurosci. 11, 1471-2202 (2010).
  3. Strom, J. O., Theodorsson, A., Theodorsson, E. Hormesis and Female Sex Hormones. Pharmaceuticals. 4, 15 (2011).
  4. Isaksson, I. M., Theodorsson, A., Theodorsson, E., Strom, J. O. Methods for 17beta-estradiol administration to rats. Scandinavian journal of clinical and laboratory investigation. , (2011).
  5. Strom, J. O., Theodorsson, E., Theodorsson, A. Order of magnitude differences between methods for maintaining physiological 17beta-oestradiol concentrations in ovariectomized rats. Scand. J. Clin. Lab Invest. 68, 814-822 (2008).
  6. Ingberg, E., Theodorsson, A., Theodorsson, E., Strom, J. O. Methods for long-term 17beta-estradiol administration to mice. General and comparative endocrinology. , (2011).
  7. Kalliokoski, O., Jacobsen, K. R., Hau, J., Abelson, K. S. Serum concentrations of buprenorphine after oral and parenteral administration in male mice. Vet. J. 187, 251-254 (2011).
  8. Simpkins, J. W. Estrogens may reduce mortality and ischemic damage caused by middle cerebral artery occlusion in the female rat. J. Neurosurg. 87, 724-730 (1997).
  9. Wise, P. M., Dubal, D. B. Estradiol protects against ischemic brain injury in middle-aged rats. Biol. Reprod. 63, 982-985 (2000).
  10. Saleh, T. M., Cribb, A. E., Connell, B. J. Estrogen-induced recovery of autonomic function after middle cerebral artery occlusion in male rats. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 281, 1531-1539 (2001).
  11. Bingham, D., Macrae, I. M., Carswell, H. V. Detrimental effects of 17beta-oestradiol after permanent middle cerebral artery occlusion. J. Cereb. Blood Flow Metab. 25, 414-420 (2005).
  12. Carswell, H. V. Differential effects of 17beta-estradiol upon stroke damage in stroke prone and normotensive rats. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 298-304 (2004).
  13. Yong, Y. 17beta-estradiol potentiates ischemia-reperfusion injury in diabetic ovariectomized female rats. Brain Res. 1054, 192-199 (2005).
  14. Theodorsson, A., Theodorsson, E. Estradiol increases brain lesions in the cortex and lateral striatum after transient occlusion of the middle cerebral artery in rats: no effect of ischemia on galanin in the stroke area but decreased levels in the hippocampus. Peptides. 26, 2257-2264 (2005).
  15. Levin-Allerhand, J. A., Sokol, K., Smith, J. D. Safe and effective method for chronic 17beta-estradiol administration to mice. Contemp. Top Lab Anim. Sci. 42, 33-35 (2003).
check_url/fr/4013?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Ström, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I., Theodorsson, E. Ovariectomy and 17β-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration. J. Vis. Exp. (64), e4013, doi:10.3791/4013 (2012).

View Video