Imagerie fonctionnelle de la graisse brune chez les souris avec FDG micro-PET/CT
Summary
Une méthode d'imagerie fonctionnelle du tissu adipeux brun de la souris (BAT) est décrit dans lequel froide stimulée par l'absorption de 18F-fluorodésoxyglucose (FDG) dans la MTD est non-invasive évaluée avec un protocole standardisé micro-PET/CT. Cette méthode est robuste et sensible pour détecter des différences dans les activités de BAT dans des modèles murins.
Abstract
Le tissu adipeux brun (BAT) diffère de tissu adipeux blanc (WAT) par son emplacement discret et une couleur brun-rouge due à la vascularisation riche et haute densité des mitochondries. BAT joue un rôle majeur dans la dépense énergétique et non frissons thermogenèse chez les mammifères nouveau-nés ainsi que les adultes 1. BAT-thermogenèse induite est fortement régulée par le système nerveux sympathique, principalement par l'intermédiaire des récepteurs adrénergiques β 2, 3. Des études récentes ont montré que les activités de BAT chez les adultes humains sont corrélés négativement avec l'indice de masse corporelle (IMC) et les paramètres de diabétiques d'autres 4-6. BAT a donc été proposé comme une cible potentielle pour la thérapie anti-obesity/anti-diabetes mettant l'accent sur la modulation de la balance énergétique 6-8. Alors que plusieurs froides défi à base de tomographie par émission de positons (TEP) méthodes ont été établies pour détecter BAT humaine 9-13, il ya pratiquement pas de protocole standardisé pour l'imagerie et QUANTIFication des MTD dans de petits modèles animaux tels que des souris. Nous décrivons ici une méthode d'imagerie robuste TEP / TDM pour l'évaluation fonctionnelle des MTD chez la souris. Brièvement, des souris C57BL/6J adultes étaient traités à froid à jeun pour une durée de 4 heures avant d'avoir reçu une dose de 18 F-fluorodésoxyglucose (FDG). Les souris ont été resté dans le froid pendant une heure après l'injection supplémentaire FDG, puis scannées avec un système micro-PET/CT animal dévoué mais peu nombreux. Les images TEP acquises ont été co-enregistré avec les images CT pour les références anatomiques et analysés pour la fixation du FDG dans la zone BAT interscapulaire de présenter l'activité BAT. Ce standard de traitement à froid et le protocole d'imagerie a été validé par des activités de test MTD lors des interventions pharmacologiques, par exemple, l'activation BAT supprimée par le traitement de la β-adrénergique antagoniste propranolol 14, 15, ou l'activation BAT renforcée par agoniste β3 BRL37344 16. La méthode described ici peuvent être appliqués pour cribler des médicaments / composés qui modulent l'activité BAT, ou pour identifier les gènes / voies qui sont impliqués dans le développement de BAT et de la réglementation dans plusieurs études précliniques et de base.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dans cette étude, une méthode d'imagerie micro-PET/CT-based a été développé pour la détection des activités de BAT chez la souris adulte qui nécessite simplement un traitement par le froid et une injection de disponible dans le commerce 18 F-FDG. L'ensemble de la procédure peut se faire en un jour à la suite d'un traitement et d'imagerie séquence qui commence toutes les 30 minutes jusqu'à ce que tous les animaux sont traités et imagée. Dans les conditions expérimentales dé…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs tiennent à remercier Laura Diaz, Kevin Phillips, Willa A. Hsueh, et le roi C. Li pour leur soutien utiles commentaires et technique dans le développement de cette méthode.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Micro-PET/CT Imaging System | Siemens Medical Solutions USA, Inc. | Inveon Dedicated PET System and Inveon Multimodality CT/SPECT System (docked) | |
| Propranolol | Sigma | P0884 | |
| BRL 37344 | Sigma | B169 | |
| 18F-FDG | Cyclotope Inc. | ||
| C57BL/6J Male Mice | Jackson Laboratory | 000664 | 3-4 months old |
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