Orthotopique transplantation d'intestin grêle chez le rat

Summary

Transplantation d'intestin grêle est devenue une option thérapeutique reconnue pour les patients atteints d'insuffisance intestinale irréversible. Notre modèle expérimental de transplantation de l'intestin chez les rats petite orthotopique est un outil fiable pour répondre immunologique sous-jacente et les processus inflammatoires qui compliquent la transplantation intestinale.

Abstract

Transplantation d'intestin grêle est devenue une option clinique acceptée pour les patients atteints du syndrome de l'intestin court et l'échec de la nutrition parentérale (insuffisance intestinale irréversible). Dans les centres spécialisés amélioration opérationnelle et les stratégies de gestion ont conduit à un excellent court et à moyen terme patient et la survie du greffon tout en offrant une qualité de vie élevée ^1,3. Contrairement à la transplantation plus fréquente d'autres organes solides (c.-à-cœur, le foie), de nombreux mécanismes sous-jacents de la fonction du greffon et des modifications immunologiques induites par la transplantation intestinale ne sont pas entièrement connues ^6,7. Les épisodes de rejet aigu, septicémie et l'insuffisance chronique du greffon sont les principaux obstacles encore qui contribuent à moins favorable des résultats à long terme et d'entraver un emploi plus répandu de la procédure en dépit d'un nombre croissant de patients sous nutrition parentérale à domicile qui pourraient potentiellement bénéficier d'une telle greffe. L'intestin grêle contientun grand nombre de leucocytes passagers communément appelé dans le cadre de l'intestin système lymphoïde associé (GALT), cette partie étant la raison de la forte immunogénicité du greffon intestinal. La présence et la proximité de nombreux commensaux et pathogènes dans l'intestin, explique la sévérité des épisodes de septicémie fois greffe intégrité de la muqueuse est compromise (par exemple par le rejet). Pour faire avancer le domaine de l'informatique intestinales et la transplantation multiviscérale plus générés à partir de modèles animaux fiables et réalisables est nécessaire. Le modèle proposé ici combine à la fois la fiabilité et la faisabilité une fois établi dans une manière normalisée et peuvent fournir de précieuses informations sur les sous-jacents complexes moléculaires, les mécanismes cellulaires et fonctionnels qui sont déclenchés par transplantation intestinale. Nous avons utilisé avec succès et affiné la procédure décrite depuis plus de 5 ans dans notre laboratoire ^8-11. Le JoVE basé sur la vidéo format est particulièrement utile pour démontrer la procédure complexeDure et éviter les pièges initiaux pour les groupes envisagent d'établir un modèle de rongeur orthotopique enquête transplantation intestinale.

Protocol

1. Fonctionnement des bailleurs de fonds Le rat donneur doit rester à jeun pendant 24 heures (accès libre à l'eau / solution de glucose). Pour induire une anesthésie par inhalation isoflurane, commencez avec 2% pulvérisateur standard, puis réduire à 1% après avoir effectué une laparotomie. Effectuer un pincement de l'orteil pour vérifier la sédation. Raser l'abdomen et le nettoyer avec préparation de la peau 3 fois (Kodan). Effectuez ensuite une incision médiane ap…

Representative Results

Cours normal des activités post-opératoire Les animaux transplantés devrait se remettre rapidement de la procédure sous une lampe chauffante pendant environ 1 h. L'hypothermie est une cause majeure de mortalité postopératoire et doit être soigneusement évité intra-et postopératoire. Pertes liquidiennes intra-opératoires doivent être remplacés par injection sous-cutanée de 2,5 ml solution saline normale et de 2,5 ml de glucose 5% tous les 8 heures, pendant les 24 premières heu…

Discussion

Bien que les modèles de transplantation intestinale chez le rat ont été décrits dès le ⁵ 1970ies dans la plupart des modèles récemment utilisés impliquent hétérotopique transplantation intestinale en utilisant des techniques différentes ^13. Bien que les procédures hétérotopiques en général ont l'avantage de techniques de microchirurgie plus facile et plus facile accessibilité de la greffe d'évaluation, hétérotopique transplantation intestinale a le gros inconvénient de …

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments (optional)
University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan)	Bristol-Myers Squibb
Uro-Nebacetin N solution	Nycomed	6967855
Ampicillin	Ratiopharm
Carprofen (Rimadyl)	Pfizer
Prolene 10-0 unresorbable suture	Ethicon
Monocryl 6-0 resorbable suture	Ethicon
Vicryl 3-0 resorbable suture	Ethicon
i.v. Catheter G 20 1.1×33 mm	Braun
i.v. Catheter G 22 0.9×25 mm	Braun
Kodan Skin Prep	Schülke
NaCl 0.9% Infusion solution	Braun
Curved forceps small	FineScienceTools	11009-13
Micro forceps curved	AESCULAP	BD 333
Micro forceps curved	AESCULAP	FD281R
Micro forceps straight 1	WPI	5
Micro forceps straight 2	WPI	2
Micro needle holder	WPI	14081
Micro scissors	FineScienceTools	15006-09
Micro scalpel	MANI	Ophthalmic knife
Micro clamps	AESCULAP	FB329R