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Estratti nucleari di piccole dimensioni per saggi funzionali di espressione genica Macchinari
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Small-scale Nuclear Extracts for Functional Assays of Gene-expression Machineries
DOI:

08:05 min

June 27, 2012

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:05Growing and Harvesting HeLa Cells for Nuclear Extraction
  • 01:56Swell HeLa Cells in Hypotonic Buffer
  • 03:00Lyse Cells using a Dounce Homogenizer
  • 04:27Salt-extract the Nuclei
  • 05:15Concentrate and Dialyze the Nuclear Extract
  • 06:16Results: Small-scale Nuclear Extract Technique for Functional Assays of Gene Expression Machineries
  • 07:51Conclusion

Summary

Traduction automatique

Un protocollo per la preparazione di robusti, piccoli estratti HeLa nucleari viene descritto. Questo protocollo è importante per i saggi che richiedono l'uso di piccole popolazioni di cellule, come cellule trattate con farmaci o RNAi. Il metodo dovrebbe essere applicabile ad un'ampia varietà di analisi di espressione genica e altri tipi cellulari, incluse cellule del paziente.

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