Summary

लघु और वाइड कोण एक्स - रे समाधान में जैविक अणुओं के बिखरने अध्ययन

Published: January 08, 2013
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Summary

छोटे और चौड़े कोण एक्स – रे बिखरने प्रक्रिया (SWAXS) के प्रदर्शन जैविक अणुओं के अध्ययन में महत्वपूर्ण भूमिका निभाई बन गया है. विशेष कोण के तरीकों और तैयारी के उपकरण और प्रक्रियाओं के प्रयोग के माध्यम से, SWAXS से प्रयोगात्मक डेटा अणुओं की परमाणु और नैनो पैमाने लक्षण वर्णन प्रदर्शित करता है.

Abstract

इस पत्र में, छोटे और चौड़े कोण अणुओं की एक्स – रे बिखरने विश्लेषण (SWAXS) प्रयोग के माध्यम से प्रदर्शन किया है. और व्यापक कोण (आमतौर पर> 5 °) – SWAXS एक तकनीक है, जहां एक्स – रे elastically छोटे (5 ° आम तौर पर 0.1) कोण पर एक एनएम रेंज में inhomogeneous नमूना से बिखरे हुए हैं. इस तकनीक को आकार, आकार, और बड़े अणुओं, आंशिक रूप से आदेश दिया सामग्री, ताकना आकार और सतह करने वाली मात्रा अनुपात की विशेषता दूरी के वितरण के बारे में जानकारी प्रदान करता है. छोटे कोण एक्स – रे बिखरने (SAXS) 1 और 200 एनएम के बीच अणुओं की संरचनात्मक जानकारी देने में सक्षम है, जबकि चौड़े कोण एक्स – रे बिखरने (WAXS) 0.33 एनएम और 0.49 एनएम के बीच के आधार पर भी छोटे नमूने की Bragg रिक्ति को हल कर सकते हैं विशिष्ट प्रणाली सेटअप और डिटेक्टर. रिक्ति Bragg कानून से निर्धारित किया जाता है और तरंगदैर्ध्य और घटना कोण पर निर्भर है.

, एक SWAXS प्रयोग में सामग्री ठोस हो सकता हैया तरल और ठोस, किसी भी संयोजन में एक ही है या किसी अन्य सामग्री के तरल या गैस डोमेन (कणों तथाकथित) हो सकता है. SWAXS आवेदन बहुत व्यापक हैं और सभी प्रकार के colloids धातु, कंपोजिट, सीमेंट, तेल, पॉलिमर, प्लास्टिक, प्रोटीन, खाद्य पदार्थ, और दवाइयों. ठोस नमूने के लिए, मोटाई लगभग 5 मिमी तक सीमित है.

एक प्रयोगशाला आधारित SWAXS साधन का उपयोग इस पेपर में विस्तृत है. के लिए उपलब्ध सॉफ्टवेयर SWAXS प्रणाली (जैसे, GNOM – ATSAS 2.3 डी. EMBL-हैम्बर्ग और EasySWAXS सॉफ्टवेयर Svergun द्वारा पैकेज) के साथ, एक प्रयोग करने के लिए दिए गए नमूने के लिए ब्याज की कुछ मापदंडों का निर्धारण करने के लिए आयोजित किया जा सकता है. एक जैविक macromolecule प्रयोग का एक उदाहरण है जो चुना जा सकता है और कई तरीकों के माध्यम से तैयार एक पानी आधारित जलीय बफर में 2% wt लाइसोजाइम का विश्लेषण है. नमूने की तैयारी नमूना अनुभाग की तैयारी में नीचे दिए गए दिशा निर्देशों के बाद. SWAXS प्रयोग के माध्यम से,लाइसोजाइम की महत्वपूर्ण संरचनात्मक मानकों परिचलन की त्रिज्या उदा विश्लेषण किया जा.

Protocol

1. नमूने की तैयारी एक सुई का प्रयोग नमूना कंटेनर से नमूना के कुछ दूर *. सुई का उपयोग करने के लिए केशिका भरने के नमूने के साथ (2.2 मिमी की अधिकतम व्यास). केशिका नीचे से 2 और 3 सेमी के बीच भरा होना चाहिए. ?…

Representative Results

SAXS: घुमाव, कण आकार और आकार, समाधान संरचना कारक, विशिष्ट भीतरी सतह और ताकना आकार, जाली प्रकार और आयाम, और इलेक्ट्रॉन घनत्व 1 की त्रिज्या और WAXS निम्नलिखित मानकों के माध्यम से पूरी तरह नमूना के संरचनात्मक …

Discussion

SWAXS प्रणाली के तुलनात्मक प्रक्रिया कई प्रयोगात्मक विश्लेषण से निर्धारित किया जा चर के लिए अनुमति देता है. पैरामीटर है कि विश्लेषण से प्राप्त कर रहे हैं नमूना और प्रयोगात्मक सेटअप के अनुसार विभिन्न प्?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

ग्राज़, आस्ट्रिया में ऑस्ट्रियन एकेडमी ऑफ साइंसेज में डा. Manfred Hecus XRS Kriechbaum और बायोफिज़िक्स और Nanosystems अनुसंधान के संस्थान का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं. करूँगा और XW हिस्से में अमेरिका के ऊर्जा विभाग द्वारा समर्थित थे, नेरी – सी डे FG07-07ID14889 पुरस्कार नहीं है, और अमेरिकी परमाणु नियामक आयोग के तहत, सं NRC-38-08-950 पुरस्कार के तहत. अमेरिका के ऊर्जा विभाग द्वारा SWAXS साधन भी भाग में, सं डे NE0000325 पुरस्कार के तहत समर्थित है.

Materials

Name of the products Company
The System3 Small- and Wide-Angle X-Ray Scattering (SWAXS) Camera Hecus XRS and IBN,
Graz, Austria
GNOM ATSAS 2.3 package by D. Svergun EMBL-Hamburg

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Citer Cet Article
Liu, L., Boldon, L., Urquhart, M., Wang, X. Small and Wide Angle X-Ray Scattering Studies of Biological Macromolecules in Solution. J. Vis. Exp. (71), e4160, doi:10.3791/4160 (2013).

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