Summary

Lensfree en el chip tomográfica Microscopía empleo de multi-ángulo de iluminación y píxeles de super-resolución

Published: August 16, 2012
doi:

Summary

Lensfree tomografía óptica es una técnica de microscopía tridimensional que ofrece una resolución espacial de <1 m × m <1 × menos de 3 micras x, y y z dimensiones, respectivamente, más una gran imagen-volumen de 15-100 mm<sup> 3</sup>, Que puede ser particularmente útil para la integración con laboratorio en un chip plataformas.

Abstract

Imágenes tomográficas ha sido una herramienta ampliamente utilizada en la medicina, ya que puede dar en tres dimensiones (3D) la información estructural de las escalas de los objetos de diferentes tamaños. En las escalas micrométricas y milimétricas, las modalidades de microscopía óptica encontrar un uso cada vez mayor debido a la naturaleza no ionizante de la luz visible, y la disponibilidad de un amplio conjunto de fuentes de iluminación (por ejemplo, los láseres y diodos emisores de luz) y los elementos de detección (por ejemplo, de gran formato CCD y CMOS de las matrices de detectores). Entre los recientemente desarrollados modalidades de microscopía óptica tomográficos, se puede incluir tomografía de coherencia óptica, la tomografía por difracción óptica, la tomografía por proyección óptica y microscopía de luz hojas. 1-6 Estas plataformas proporcionan imágenes de la sección de células, microorganismos y animales modelo como C. elegans, el pez cebra y embriones de ratón.

Existentes imágenes ópticas 3D en general, tienen arquitecturas relativamente voluminosos y complejos, lo que limita ªe la disponibilidad de estos equipos a los laboratorios avanzados, e impidiendo su integración con lab-on-a-chip plataformas y los chips de microfluidos. Para ofrecer una alternativa microscopio de tomografía, hemos desarrollado recientemente lensfree tomografía óptica (LOT) como una modalidad de la tomografía de alto rendimiento, compacto y rentable óptica. 7 descartes LOT el uso de lentes y componentes ópticos voluminosos, y en su lugar se basa en multi-ángulo la iluminación y la computación digital para alcanzar la profundidad de imagen con resolución de micro-objetos de más de un volumen de imágenes de gran tamaño. Mucho puede la muestra biológica de la imagen con una resolución espacial de <1 m X <1 m x menos de 3 m en la x, y y z dimensiones, respectivamente, sobre un volumen de imágenes de gran cantidad de 15-100 mm 3, y puede ser particularmente útil para lab-on-a-chip plataformas.

Protocol

1. Imágenes de instalación Muchas cosas pueden ser montados en un compacto y ligero portátil de la arquitectura de campo 8, y, alternativamente, como un microscopio con la capacidad de formación de imágenes optofluídico sección 9. En este informe, sin embargo, vamos a describir la configuración de imagen básica para una aplicación de sobremesa hacia la tomografía de la electricidad estática muestras. Módulo de iluminación: en Lo…

Discussion

Es importante destacar que la geometría única de lensfree en el chip microscopio holográfico es el elemento crítico para lograr super-pixel de resolución y las imágenes tomográficas. Puesto que las imágenes grabadas no se supone que son imágenes de proyección de imagen como en contacto se aproxima a 12 incoherente, pero hologramas de proyección, la difracción de la luz transmitida hasta que choca con el detector puede ser corregida digitalmente por reconstrucción holográfica. Por lo tan…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Materials

Name Compay Catalog # Comment
Linear X-Y stages Newport Corp. MFA-PP Miniature Linear Stage
Motorized rotation stage Thorlabs PRM1Z8 Motorized Precision Rotation Mount
Multimode optical fiber Thorlabs AFS105/125Y Multimode Fiber
Light source Newport Corp. 6255 Ozone-free Xenon Lamp
Monochromator Newport Corp. 74100 Cornerstone 260 1/4 m Monochromator
CMOS sensor array Aptina Inc. MT9P031STC 5 Megapixels CMOS Sensor
C. elegans sample Carolina Biosupply 173500 Wild-type C. elegans
Levamisole Sigma Aldrich L9756-5G Tetramisole hydrochloride

References

  1. Schmitt, J. M. Optical coherence tomography (OCT): a review, J. Sel. Top. Quant. Elect. 5, 1205-1215 (1999).
  2. Keller, P. J., Schmidt, A. D., Wittbrodt, J., Stelzer, E. H. K. Reconstruction of zebrafish early embryonic development by scanned light sheet microscopy. Science. 322, 1065-1069 (2008).
  3. Sharpe, J., Ahlgren, U., Perry, P., Hill, B., Ross, A., Hecksher-Sørensen, J., Baldock, R., Davidson, D. Optical Projection Tomography as a Tool for 3D Microscopy and Gene Expression Studies. Science. 296, 541-545 (2002).
  4. Sung, Y., Choi, W., Fang-Yen, C., Badizadegan, K., Dasari, R. R., Feld, M. S. Optical diffraction tomography for high resolution live cell imaging. Opt. Exp. 17, 266-277 (2009).
  5. Debailleul, M., Simon, B., Georges, V., Haeberle, O., Lauer, V. Holographic microscopy and diffractive microtomography of transparent samples. Meas. Sci. Technol. 19, 074009 (2008).
  6. Charrière, F., Pavillon, N., Colomb, T., Depeursinge, C., Heger, T. J., Mitchell, E. A. D., Marquet, P., Rappaz, B. Living specimen tomography by digital holographic microscopy: Morphometry of testate amoeba. Opt. Exp. 14, 7005-7013 (2006).
  7. Isikman, S. O., Bishara, W., Mavandadi, S., Yu, S. W., Feng, S., Lau, R., Ozcan, A. Lens-free optical tomographic microscope with a large imaging volume on a chip. Proc. Nat. Acad. Sci. 108, 7296-7301 (2011).
  8. Isikman, S. O., Bishara, W., Sikora, U., Yaglidere, O., Yeah, J., Ozcan, A. Field-portable Lensfree Tomographic Microscope. Lab Chip. 11, 2222-2230 (2011).
  9. Isikman, S. O., Bishara, W., Zhu, H., Ozcan, A. Optofluidic tomography on a chip. App. Phys. Lett. 98, 161109 (2011).
  10. Bishara, W., Su, T. W., Coskun, A., Ozcan, A. Lensfree on-chip microscopy over a wide field-of-view using pixel super-resolution. Opt. Exp. 18, 11181-11191 (2010).
  11. Messaoudi, C., Boudier, T., Sorzano, C. O. S., Marco, S. TomoJ: tomography software for three-dimensional reconstruction in transmission electron microscopy. BMC Bioinformatics. 8, 288 (2007).
  12. Heng, X., Erickson, D., Baugh, L. R., Yaqoob, Z., Sternberg, P. W., Psaltis, D., Yang, C. Optofluidic Microscopy: A Method for Implementing High Resolution Optical Microscope On A Chip. Lab on a Chip. 6, 1274-1276 (2006).
check_url/fr/4161?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Isikman, S. O., Bishara, W., Ozcan, A. Lensfree On-chip Tomographic Microscopy Employing Multi-angle Illumination and Pixel Super-resolution. J. Vis. Exp. (66), e4161, doi:10.3791/4161 (2012).

View Video