Summary

Çok açılı Aydınlatma ve Pixel Super çözünürlüklü istihdam Lensfree On-chip Tomografik Mikroskopi

Published: August 16, 2012
doi:

Summary

Lensfree optik tomografi <1 um arasındaki konumsal bir çözünürlüğe sahip bir üç-boyutlu mikroskopi tekniktir x <1 um x 15-100 mm arasında geniş bir görüntüleme-hacmi içinde, sırasıyla, x, y ve z, boyutları, içinde <3 um,<sup> 3</sup>, Hangi lab-on-a-chip platformları ile entegrasyon için özellikle yararlı olabilir.

Abstract

Farklı boyut ölçekleri nesneler ile ilgili üç boyutlu (3D) yapısal bilgi sağlamak gibi tomografik görüntüleme tıpta yaygın olarak kullanılan bir araç olmuştur. Mikrometre ve milimetrik ölçeklerde, optik mikroskopi yöntemleri görünür ışık iyonlaştırıcı olmayan doğaya artan kullanımı sayesinde bulmak ve zengin bir aydınlatma kaynaklarının seti (örneğin lazer ve ışık yayan diyotlar-gibi) ve tespit elemanları (örneğin kullanılabilirliğini geniş format CCD ve CMOS algılayıcı-dizileri). Yakın zamanda geliştirilen optik tomografik mikroskopi yöntemleri arasında, tek bir optik koherens tomografi, optik kırınım tomografi, optik projeksiyon tomografi ve ışık sayfalık mikroskobu içerebilir. 1-6 Bu platformlar hücreler, mikroorganizmalar ve C gibi model hayvan kesit görüntüleme sağlamak elegans, Zebra balığı ve fare embriyoları.

Mevcut 3D optik kameralar genellikle inci sınırlayıcı, nispeten hantal ve karmaşık mimarileri varE gelişmiş laboratuarları bu ekipman durumu ve laboratuvar-on-a-chip platformları ve mikroakışkan çipleri ile entegrasyonu engelleyen. Alternatif tomografik mikroskop sağlamak için, son 7 LOT atar lensler ve hantal optik bileşenlerin kullanımı. Yüksek verimlilik, kompakt ve uygun maliyetli optik tomografi yöntemi olarak lensfree optik tomografi (LOT) geliştirilmiş ve bunun yerine çok açılı güveniyor aydınlatma ve geniş bir görüntüleme hacmi üzerinde mikro-objelerin derinlik çözülmesi görüntü elde etmek için dijital hesaplama. LOT için x <1 mikron x <3 15-100 mm 3 geniş bir görüntüleme hacmi üzerinden sırasıyla x, y ve z boyutlarda um, olabilir ve özellikle faydalı <1 mikron mekansal çözünürlükte görüntü Biyolojik örnek olabilir lab-on-a-chip platformlar.

Protocol

1. Görüntüleme Kurulumu LOT kompakt ve hafif bir alana taşınabilir mimari 8 monte edilebilir ve alternatif kesit görüntüleme yeteneği ile bir optofluidic mikroskop gibi. 9 Bu raporda, ancak, statik tomografi doğru bir tezgah üst uygulanması için temel görüntüleme kurulum açıklayacağız örnekleri. Aydınlatma modülü: LOT, bu gibi ışık yayan-diyotları (LEDler) olarak kısmen koherent ışık kaynakları kullanılabilir…

Discussion

Bu lensfree on-chip holografik mikroskop eşsiz geometri piksel süper-çözünürlük ve tomografik görüntüleme sağlamak için kritik etkinleştiricidir olduğunu vurgulamak önemlidir. Kaydedilen görüntülerin 12 yaklaşımlar tutarsız temas görüntüleme gibi projeksiyon görüntüleri olarak kabul edilmez, ama projeksiyon hologramlar, iletilen ışık kırınım bu dedektör impinges kadar dijital holografik yeniden düzeltilebilir beri. Bu nedenle, örnek ile sensör mesafe varyasyonlar …

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Materials

Name Compay Catalog # Comment
Linear X-Y stages Newport Corp. MFA-PP Miniature Linear Stage
Motorized rotation stage Thorlabs PRM1Z8 Motorized Precision Rotation Mount
Multimode optical fiber Thorlabs AFS105/125Y Multimode Fiber
Light source Newport Corp. 6255 Ozone-free Xenon Lamp
Monochromator Newport Corp. 74100 Cornerstone 260 1/4 m Monochromator
CMOS sensor array Aptina Inc. MT9P031STC 5 Megapixels CMOS Sensor
C. elegans sample Carolina Biosupply 173500 Wild-type C. elegans
Levamisole Sigma Aldrich L9756-5G Tetramisole hydrochloride

References

  1. Schmitt, J. M. Optical coherence tomography (OCT): a review, J. Sel. Top. Quant. Elect. 5, 1205-1215 (1999).
  2. Keller, P. J., Schmidt, A. D., Wittbrodt, J., Stelzer, E. H. K. Reconstruction of zebrafish early embryonic development by scanned light sheet microscopy. Science. 322, 1065-1069 (2008).
  3. Sharpe, J., Ahlgren, U., Perry, P., Hill, B., Ross, A., Hecksher-Sørensen, J., Baldock, R., Davidson, D. Optical Projection Tomography as a Tool for 3D Microscopy and Gene Expression Studies. Science. 296, 541-545 (2002).
  4. Sung, Y., Choi, W., Fang-Yen, C., Badizadegan, K., Dasari, R. R., Feld, M. S. Optical diffraction tomography for high resolution live cell imaging. Opt. Exp. 17, 266-277 (2009).
  5. Debailleul, M., Simon, B., Georges, V., Haeberle, O., Lauer, V. Holographic microscopy and diffractive microtomography of transparent samples. Meas. Sci. Technol. 19, 074009 (2008).
  6. Charrière, F., Pavillon, N., Colomb, T., Depeursinge, C., Heger, T. J., Mitchell, E. A. D., Marquet, P., Rappaz, B. Living specimen tomography by digital holographic microscopy: Morphometry of testate amoeba. Opt. Exp. 14, 7005-7013 (2006).
  7. Isikman, S. O., Bishara, W., Mavandadi, S., Yu, S. W., Feng, S., Lau, R., Ozcan, A. Lens-free optical tomographic microscope with a large imaging volume on a chip. Proc. Nat. Acad. Sci. 108, 7296-7301 (2011).
  8. Isikman, S. O., Bishara, W., Sikora, U., Yaglidere, O., Yeah, J., Ozcan, A. Field-portable Lensfree Tomographic Microscope. Lab Chip. 11, 2222-2230 (2011).
  9. Isikman, S. O., Bishara, W., Zhu, H., Ozcan, A. Optofluidic tomography on a chip. App. Phys. Lett. 98, 161109 (2011).
  10. Bishara, W., Su, T. W., Coskun, A., Ozcan, A. Lensfree on-chip microscopy over a wide field-of-view using pixel super-resolution. Opt. Exp. 18, 11181-11191 (2010).
  11. Messaoudi, C., Boudier, T., Sorzano, C. O. S., Marco, S. TomoJ: tomography software for three-dimensional reconstruction in transmission electron microscopy. BMC Bioinformatics. 8, 288 (2007).
  12. Heng, X., Erickson, D., Baugh, L. R., Yaqoob, Z., Sternberg, P. W., Psaltis, D., Yang, C. Optofluidic Microscopy: A Method for Implementing High Resolution Optical Microscope On A Chip. Lab on a Chip. 6, 1274-1276 (2006).
check_url/fr/4161?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Isikman, S. O., Bishara, W., Ozcan, A. Lensfree On-chip Tomographic Microscopy Employing Multi-angle Illumination and Pixel Super-resolution. J. Vis. Exp. (66), e4161, doi:10.3791/4161 (2012).

View Video