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Article de méthode

Synthétique de la production soie d'araignée sur l'échelle du laboratoire

27.8K vues

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DOI :

10.3791/4191

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18 juillet 2012

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Dans cet article

Résumé

Malgré les excellentes propriétés mécaniques et biochimiques de soies de l'araignée, ce matériau ne peut être récolté en grandes quantités par des moyens conventionnels. Nous décrivons ici une stratégie efficace pour faire tourner fibres artificielles de soie d'araignée, ce qui est un processus important pour les enquêteurs qui étudient la production de soie d'araignée et de leur utilisation en tant que prochaine génération de biomatériaux.

Résumé

Comme la société progresse et les ressources se raréfient, il est de plus en plus important de cultiver de nouvelles technologies qui biomatériaux ingénieur de la prochaine génération avec des propriétés de haute performance. Le développement de ces nouveaux matériaux structurels doit être rapide, rentable et sur les méthodologies de traitement et des produits qui sont respectueux de l'environnement et durable. Araignées tissent une multitude de différents types de fibres avec diverses propriétés mécaniques, offrant une riche source de matériaux d'ingénierie prochaines génération pour le biomimétisme qui rivalisent avec les meilleurs matériaux naturels et anthropiques. Depuis la collecte de grandes quantités de soie d'araignée naturelle n'est pas possible, la production de soie synthétique a la capacité de fournir aux scientifiques d'avoir accès à un approvisionnement illimité de threads. Par conséquent, si le procédé de filage peut être simplifié et perfectionné, les fibres d'araignée artificielle ont le potentiel de l'utilisation pour un large éventail d'applications allant des gilets pare-balles, suture chirurgicales, cordes et cordages, les pneus, les cordes pour instruments de musique, et les matériaux composites pour l'aviation et de la technologie aérospatiale. Afin de faire progresser le processus de soie synthétique de production et de céder des fibres qui affichent une faible variance dans leurs propriétés des matériaux à partir de spin à tourner, nous avons développé un protocole de filage au mouillé qui intègre l'expression de protéines recombinantes de soie d'araignée dans les bactéries, la purification et la concentration des protéines , suivie par extrusion de fibres et une post-rotation mécanique de traitement. Il s'agit de la première représentation visuelle qui révèle un processus étape par étape pour faire tourner et d'analyser les fibres de soie artificielle sur une échelle de laboratoire. Il fournit également des détails afin de minimiser l'introduction de la variabilité entre les fibres filées à partir de la dope même filature. Collectivement, ces méthodes va propulser le processus de production de la soie artificielle, ce qui conduit à des fibres de meilleure qualité qui dépassent les soies d'araignée naturelle.

Introduction

Soie de l'araignée a des propriétés mécaniques extraordinaires qui effectue des matériaux synthétiques, y compris plusieurs en acier haute résistance, le kevlar et le nylon. 1 araignées tissent au moins 6-7 différents types de fibres qui affichent diverses propriétés mécaniques, chacun étant conçu avec des quantités variables de résistance à la traction et l'extensibilité pour effectuer des tâches spécifiques. biologiques 2 Les chercheurs sont rapidement la poursuite de l'utilisation de la soie d'araignée en tant que biomatériaux de la prochaine génération en raison de leurs excellentes propriétés mécaniques, leur biocompatibilit....

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Protocole

figure-protocol-1
Aperçu graphique: Biomimicry du procédé de filage

Le biomimétisme de la voie de la production de soie d'araignée naturelle:. Un itinéraire pour la fabrication de la soie synthétique Cette image montre la glande ampullaires majeur du tisserand d'or orbe, Nephila clavipes, et les composants utilisés pour la production de soie naturelle (texte blanc). La région de la queue synthétise de grandes quantités de protéines de soie qui sont transportés à l'ampoule, une zone de stockage pour ....

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Discussion

Les fibres synthétiques filées à partir de cette méthodologie sont mécaniquement sur le même ordre de grandeur par rapport aux fibres naturelles. En diminuant la quantité d'erreur humaine en mécanisant le bobinage et les processus post-tirage de spin, la variation expérimentale entre les échantillons sont plus contrôlée et fortement réduit.

Notre méthodologie offre la possibilité d'enquêter sur les propriétés mécaniques des fibres d'autres qui sont filés à partir de protéines rec.......

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Déclarations de divulgation

Pas de conflits d'intérêt déclarés.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par la NSF Subventions RUI MCB-0950372 et 1105310 DMR-droit "Caractérisation moléculaire de Black Widow Soies d'araignée et le comportement mécanique des Soies d'araignée colle», respectivement.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Réactif / Equipement Entreprise Numéro de catalogue Commentaires
pBAD / TOPO Kit Expression ThioFusion Invitrogen K370-01
Réactif de lyse cellulaire FastBreak, 10x Promega V857C
Ni-NTA agarose Qiagen 30210 Comprend les instructions pour tampons
ProteoSilver Argent Stain Kit Sigma-Aldrich PROTSIL1-1kt
FreeZone Lyophiliseur Labconco 7960041 FreeZone 12plus
Hexafluoroisopropanol (HFIP) Sigma-Aldrich 52512
Seringue Hamilton 7657-01 250 uL
Aiguille Hamilton 7780-01 Gauge 26 ans, Blunt extrémité amovible aiguille
Pousse-seringue Harvard Apparatus 702208 11Plus
Pied à coulisse digital Carrera CP5906 0-150 mm large
En acier inoxydable pince Instruments de précision du monde 501764 Mini Dumont # M5S
Moteur Mill Nature 7090529 12VDC, 2 vitesses rpm
Actionneur linéaire Warner Electric 01-D024-0050-A06-LP-IP65 24VDC, plage de 6 pouces
Microscope à dissection Leica Microsystems Leica MZ16
Numérique Microsccaméra OPE Leica Microsystems DFC320 Logiciel: Leica Application Suite v2.8.1
Ciseaux Vannas Instruments de précision du monde 500260
Microtensometer Aurora scientifique 310C 5N Dual-Mode Système

Références

  1. Gosline, J. M., Guerette, P. A., Ortlepp, C. S., Savage, K. N. The mechanical design of spider silks: from fibroin sequence to mechanical function. J. Exp. Biol. 202, 3295-3303 (1999).
  2. Foelix, R. Biology of spiders. , Oxford University Press. New York. (1996).
  3. Vollrath, F., Knight, D. P.

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Réimpressions et autorisations

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