イメージンググリオーマ開始<emインビボで></em>ポリッシュと補強シン頭蓋骨頭蓋窓スルー
Summary
ポリッシュと補強薄頭蓋骨（ポート）頭蓋窓と神経膠芽腫（GBM）の細胞注入を組み合わせることによって、我々は、神経膠腫の開始と縦ライブマウスの脳内に注入GBM細胞からの成長を観察することができます。
Abstract
神経膠腫は、ヒト癌の最も致命的な形態の一つです。日付手術に最も効果的な神経膠腫の治療は、放射線に続くほとんどの患者は神経膠腫の再発1,2に起因診断後五年以上生きていけないように、患者にわずかな利益を治療しています。ヒト脳腫瘍における癌幹細胞の発見は、神経膠腫の3のための新規治療戦略の開発に多大な影響を持っていることのための可能性を秘めています。がん幹細胞は、その能力、自己再生すると区別するために、新たな腫瘍4を開始する能力を持っている腫瘍で唯一の細胞であると考えられているの両方で定義されています。神経膠腫再発以下の放射線療法は、治療へのグリオーマ幹細胞の抵抗（GSCs）から発生すると考えられている5-10。 生体内では 、GSCsは、その幹細胞様の特性11-14を維持するために重要である血管周囲のニッチに存在することが示されている。 organiに中央GSCニッチのzationは12血管内皮細胞である。既存のエビデンスは、血管内皮細胞とGSCsとそれらの相互作用が腫瘍の開発のために重要であり、神経膠腫のための重要な治療標的としての内皮細胞とGSCsとそれらの相互作用を識別することを示唆している。 GSCsの存在は、同所移植15時に新しい腫瘍を開始するために彼らの能力によって実験的に決定される。これは典型的には深刻な免疫不全マウスの、またはホストコンジェニックマウスの脳にマウスGBM細胞の脳にヒト腫瘍から単離されたGBM細胞の特定の数を注入することによって達成される。腫瘍の成長のためのアッセイはその後注入GBM細胞間GSCsが新しい腫瘍 – 典型的には数週間あるいは数ヶ月を生じさせることができるのに十分な時間後に実行されます。したがって、既存のアッセイは、in vivoでのシングルGSCsから腫瘍の開始の重要な病理学的過程の検査を許可していません。したがって、本質的なIGSCsと腫瘍の開始の初期段階では血管内皮細胞との相互作用の具体的な役割にnsightsが不足している。このような洞察は、神経膠腫の新しい治療戦略を開発するために重要であり、患者では神経膠腫の再発を防止するための大きな意味を持つでしょう。ここでは、ポートの頭蓋のウィンドウプロシージャは16を適応していると、生体内で二光子顕微鏡は、生きたマウスの脳内に注入されたGBM細胞から腫瘍の開始の可視化を可能に。我々の技術は、神経膠腫の開始時GSCsと血管内皮細胞との間の重要シグナル伝達機構を解明するための今後の取り組みへの道を開くでしょう。
Protocol
Discussion
成功したポート頭蓋窓の鍵は、間伐や研磨です。間伐初期は迅速に行うことができますが、注意が広い面積にわたって頭蓋骨の間伐均質性を確保するために取られるべきである。我々は一般的に生理食塩水がマイクロドリルは一度頭蓋骨を通過した直後に蒸発するような、頭蓋骨に生理食塩水の薄い層を適用し、薄い頭蓋骨ワンパス時。これはゆっくりと、しかし均一さらに薄い頭蓋骨?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、ジャクソン研究所がんセンターパイロットグラントとメインがん財団によってサポートされています。
Materials
| Name of reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| DMEM/F12(1:1) with Sodium Pyruvate | Thermo Sci Hyclone | SH3026101 | |
| B-27 Serum Free Supplement (50x) | Invitrogen | 17504-044 | |
| GlutaMax-1 Supplement | Invitrogen | 35050061 | |
| Penicillin-Streptomycin Solution | Thermo Sci Hyclone | SV30010 | |
| Accutase-Enzyme Cell Detachment Medium | eBiosciences | 00-4555-56 | |
| T25 flasks-vent cap green | SARSTEDT | 83.1810.502 | |
| 70% alcohol | JAX LAHS | ||
| 10% povidone-iodine topical solution | JAX LAHS | ||
| Ketamine HCl | Butler Animal Health Supply | NDC# 11695-0550-1 | |
| Xylazine | Akorn, Inc. | NADA# 139-236 | |
| Carprofen | JAX LAHS | ||
| Ophthalmic ointment | Dechra Veterinary Products | 17033-211-38 | |
| 0.5% Lidocaine HCl | REGENT, Inc. | NDC 0517-0625-25 | |
| Cyanoacrylate glue | Henkel Corp. | 46551 | |
| Sterile Swabs | Fisher Scientific | 23-400-114 | |
| Diamond paste | Widget Supply | BBE60 | |
| Tin oxide | LORTONE, Inc. | 591-038 | |
| Liner Bond 2V | KURARAY Medical Inc. | 1921-KA | |
| Clearfil AP-X | KURARAY Medical Inc. | 1721-KA | |
| Saline | JAX LAHS | ||
| Cover glass | Warner Instruments | 64-0720 | |
| Hex Nut | Small Parts, Inc. | HNX-0090-C | |
| Syringe Pump | Syringepump.com | NE-1000 | |
| Two-Photon imaging system | Custom built (Any commercial system would work) |
References
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