吸引脂肪から採取した脂肪由来間質細胞を使用したクリティカル·サイズの頭蓋冠欠損モデルの修復
Summary
このプロトコルは、吸引脂肪や骨格再生を評価するための重要な4ミリメートルサイズの頭蓋冠欠損の作成から脂肪由来の間質細胞の単離を説明します。
Abstract
頭蓋顔面骨格の修復および再生には、幹細胞を用いた細胞ベースのアプローチによるde novoの組織形成の約束を提供しています。脂肪由来間質細胞（ASC）は、骨形成軟骨、脂肪細胞、筋原性と分化を受けることができる多能性幹細胞の豊富な供給源であることが証明された。多くの研究では、細胞送達のための様々な足場生体材料の使用により、生体内でのこれらの細胞の骨形成能を検討されている。それが実証されている骨伝導性ハイドロキシアパタイトでコーティングされたポリ（乳酸-co-グリコール酸）（HA-PLGA）のASCと足場シード、臨界サイズの頭蓋冠欠損、自発受けすることができない点で定義されている欠陥を利用することにより、動物の生涯にわたり癒し、効果的に堅牢な骨再生を表示することができます。 in vivoモデルこれは、骨組織を再生することを目的としたトランスレーショナルアプローチの根拠を示しています-携帯コンポーネントおよび生物学的マトリックス。このメソッドは、特定の組織の欠損の修復に向けた前駆細胞の究極的な臨床応用のためのモデルとして機能します。
Protocol
Discussion
吸引脂肪から脂肪由来の間質細胞の単離2は 、これらの細胞は、細胞系統の多種多様に分化してきた。脂肪組織は中胚葉起源からであり、したがって、多能性脂肪由来間質細胞は、中胚葉系統に向かって可能性が高いアプリケーションで最も効果的であろう。骨格組織を生成する能力は、感染症、拒絶反応、および時間3以上の破壊を含む自家移植と合成材料の固有の限界のた…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我々は、我々の研究の支援とコラボレーションのための博士ジョージ·コモンズ博士とディーンVistnesに感謝したいと思います。セントジョセフマーシー病院GMEによってサポートされているこの作品は、歯科および頭蓋顔面研究助成1 R21はDE019274-01、R01EB009689およびRC2 DE020771-02、MTL博士ヒョンに小児再生医療のためのオーク財団とHagey研究所の国立研究所によってサポートされています。
Materials
| Name of the reagent: | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Lipoaspirate Harvest | |||
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| Hank’s Balanced Salt Solution | Cellgro | 21-023-CV | |
| Collagenase | Sigma | C6885-500MG | |
| Cell Strainer 100 μm | BD Falcon | 352360 | |
| Steri-top 500 ml .22 μm filter | Millipore | SCGPT05RE | |
| Calvarial Defect | |||
| Z500 Brushless MicromotorsUM50C | NSK | NSKZ500 | |
| Circular Knife 4.0 mm | Xemax Surgical | CK40 |
References
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