で食欲連想嗅覚学習<em>ショウジョウバエ</em>幼虫
Summary
ショウジョウバエの幼虫は味覚報酬で匂い刺激を関連付けることができます。ここでは、食欲の連想嗅覚学習の分析を可能にする単純な行動パラダイムを記述します。
Abstract
以下では、 ショウジョウバエの幼虫の食欲連想嗅覚学習の方法論の詳細について説明します。セットアップでは、遺伝的干渉との組み合わせで、シンプルな幼虫の脳に特異的に連想学習の神経細胞と分子のファンダメンタルズを分析するためのハンドルを提供します。
生物が存在する動作を調整するために過去の経験を使用することができます。潜在的な行動のような買収は、メモリ·トレース1〜4として学習し、これらのポテンシャルの物理的な拠点として定義することができます。神経科学者は、これらのプロセスは、昆虫から脊椎動物5,6に至るまでモデル生物での様々な方法を用いて脳内の分子やニューロンの変化の観点でどのように構成されるかを理解しよう。そのような努力のためにそれは簡単で、実験的にアクセス可能なモデルシステムを使用すると便利です。 ショウジョウバエの幼虫はに基づいて、これらの要求を満たすことが判明しました7-10：堅牢な行動アッセイ、トランスジェニック技術の多様性と唯一の約10,000ニューロン（認知限界、いくつかの行動オプション、および疑わしい経験の豊かある程度の譲歩とはいえ）を含む神経系の基本組織の存在の可用性。
ショウジョウバエの幼虫は臭いと砂糖11月14日のような食欲の味覚補強の間のアソシエーションを形成することができる。 B.ガーバーの研究室で確立された標準的アッセイでは、動物は、二臭逆数訓練を受ける：幼虫の最初のグループは、味覚の補強材（砂糖の報酬）と一緒に臭気にさらされ、その後臭気にさらされている補強なしの9のB。補強なし臭気が発生し、その後、（砂糖報酬）補強臭気Bにさらされながら、一方で幼虫の2番目のグループは、相互の研修を受ける。以下では、両グループはTESアール2悪臭の間に自分の好みのためのテッド。パフォーマンス指標（PI）として提示 – 報わ臭気のために比較的高い嗜好は連想的学習を反映しています。パフォーマンス·インデックスの連想性質に関する結論がバラバラに臭いや味物質、そのような臭気と報酬の露出、時間と処理の経過2グループ9の間に違いはありませんなどの他のパラメータの間に不測の事態からあるので、説得力がある。
Protocol
1。準備 ショウジョウバエの野生型幼虫は10分の14明/暗サイクルにおける℃、60％〜80％相対湿度は25で提起されています。幼虫の正確な年齢を制御するために、常に20人の女性は、標準的なフライ食品の約6mlを含む1バイアル（6cmの高さと直径2.5cm）に10人の男性に置かれます。ハエは12時間の卵を産むために許容されていて、二日目には新しいバイアルに移しています。 25℃で飼?…
Representative Results
図1Aは、幼虫の嗅覚連合学習の実験手順の概要を示しています。砂糖報酬幼虫を2提示臭いのいずれかを組み合わせることで報われない匂いに比べて報わ匂いに向かって魅力的な応答を表現する潜在的な動作を取得します。幼虫の2つのグループが常にどちら臭気10月またはAMと強化子を組み合わせることで訓練されています。性能指標（PI）は相互に訓練されたグループ間の嗜好の…
Discussion
ショウジョウバエの幼虫の記載されているセットアップは比較的初歩脳内で連想嗅覚学習の調査を行うことが可能。アプローチでは、実験室で確立するために、シンプルな安い、簡単ですし、ハイテク機器9を必要としません。我々は、果糖の報酬11によって補強食欲連想学習を研究するために、実験のバージョンを提示します。記載されているセットアッ…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我々は、特に彼らの実験設定と原稿のコメントに関する技術的な手順については、ガーバー·ラボのメンバーに感謝したいと思います。我々はまた、野生型カントン株式のフライケアとメンテナンスのためリュボフPankevychに感謝します。この作品は、DFG助成TH1584/1-1、SNFの助成31003A_132812 / 1およびコンスタンツ大学のZukunftskolleg（全ASTに）によってサポートされています。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | CAS number |
| Fructose | Sigma | 47740 | 57-48-7 |
| NaCl | Fluka | 71350 | 7647-14-5 |
| Agarose | Sigma | A5093 | 9012-36-6 |
| 1-octanol | Sigma | 12012 | 111-87-5 |
| Amylacetate | Sigma | 46022 | 628-63-7 |
| Paraffin oil | Sigma | 18512 | 8012-95-1 |
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Citer Cet Article
Apostolopoulou, A. A., Widmann, A., Rohwedder, A., Pfitzenmaier, J. E., Thum, A. S. Appetitive Associative Olfactory Learning in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (72), e4334, doi:10.3791/4334 (2013).