Summary

Técnica cirúrgica para entrega da Medula Espinhal de Terapias: Demonstração de Processo em Göttingen porquinhos

Published: December 07, 2012
doi:

Summary

Curta descrição visual da técnica cirúrgica e um dispositivo usado para a entrega de gene (e celular) terapias para a medula espinhal. A técnica é demonstrada no animal, mas é completamente traduzíveis e sendo utilizado para a aplicação em seres humanos.

Abstract

Esta é a descrição compacta visual de uma combinação da técnica cirúrgica e um dispositivo para a entrega de gene (e celular) terapias para a medula espinhal. Embora a técnica é demonstrada no animal, o procedimento é aprovado pelo FDA e actualmente utilizados para o transplante de células-tronco em medula espinal de pacientes com ELA. Embora a FDA tenha reconhecido à prova de princípio, os dados sobre a eficácia terapêutica em modelos de roedores altamente caracterizados, o uso de animais de grande porte é considerado crítico para a validação da combinação de um procedimento cirúrgico, um dispositivo, e a segurança de uma terapia definitiva para uso humano . O tamanho, anatomia e vulnerabilidade geral da coluna vertebral e medula espinhal dos suínos são reconhecidos para melhor o modelo humano. Além disso, o processo cirúrgico e manipulação de expor a medula espinal, bem como o fechamento da ferida na gusa é virtualmente indistinguível do humano. Nós acreditamos que o modelo de porco saudável representa uma crítical primeiro passo do estudo de segurança processual.

Protocol

1. Uso de Animais Procedimentos demonstrados aqui foram aprovados pelo Animal Care Institucional da Universidade Emory e Uso Comissão (IACUC). Minipigs Feminino Göttingen pesando aproximadamente 15-20 kg são utilizados. 2. Anestesia Os animais estão em jejum de aproximadamente 12 horas antes da cirurgia. Sedação e indução da anestesia de animais constituído por uma mistura de cetamina por via intramuscular (35 mg / kg), acepromaz…

Representative Results

Pontuação Tarlov 0 Paralisia, nenhum movimento 1 Tônus perceptível nos membros posteriores, o movimento ligeiro 2 Movimento nas patas traseiras, mas incapaz de se sentar ou ficar 3 Capacidade de ficar de pé e andar, mas atáxica e por curtos períodos 4 A recuperação…

Discussion

Apesar da aprovação para prosseguir com a técnica descrita em humanos 7-9, questões críticas ainda precisam ser respondidas para que terapias da medula espinhal para o sucesso. A compreensão rigorosa de tolerância da medula espinhal para injeção intraparenquimatosa é necessária para permitir o planejamento ea execução de ensaios de desenvolvimento de terapias para desmielinizante, degenerativa e doença medular traumática. Actualmente, não existe uma compreensão clara do número de in…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Agradecemos a Divisão de Emory University of Animal equipe recursos para a assistência veterinária. Fontes de financiamento incluem: ALS Association, Departamento de Defesa, e Neuralstem, Inc.

Materials

Name of the equipment Company Catalogue number Comments (optional)
Spinal Derrick Neuralstem, Inc. Neuralstem, Inc. has purchased an exclusive license to this technology
MINJ-PD Microinjector pump Tritech Research, Inc. Customized for this specific application
Floating Cannula Neuralstem, Inc. Custom-designed for this specific application

References

  1. Usvald, D., et al. Analysis of dosing regimen and reproducibility of intraspinal grafting of human spinal stem cells in immunosuppressed minipigs. Cell Transplant. 19, 1103-1122 (2010).
  2. Riley, J., et al. Targeted spinal cord therapeutics delivery: stabilized platform and microelectrode recording guidance validation. Stereotact. Funct. Neurosurg. 86, 67-74 (2008).
  3. Federici, T., Riley, J., Park, J., Bain, M., Boulis, N. Preclinical safety validation of a stabilized viral vector direct injection approach to the cervical spinal cord. Clin. Transl. Sci. 2, 165-167 (2009).
  4. Riley, J. P., Raore, B., Taub, J. S., Federici, T., Boulis, N. M. Platform and Cannula Design Improvements for Spinal Cord Therapeutics Delivery. Neurosurgery. 69, 147-154 (2011).
  5. Riley, J., et al. Cervical spinal cord therapeutics delivery: preclinical safety validation of a stabilized microinjection platform. Neurosurgery. 65, 754-761 (2009).
  6. Raore, B., et al. Cervical multilevel intraspinal stem cell therapy: assessment of surgical risks in Gottingen minipigs. Spine. 36, 164-171 (2011).
  7. Boulis, N. M., et al. Translational stem cell therapy for amyotrophic lateral sclerosis. Nat. Rev. Neurol. , (2011).
  8. Riley, J., et al. Intraspinal Stem Cell Transplantation in ALS: A Phase I Safety Trial, Technical Note & Interim Safety Outcomes. Neurosurgery. 71 (2), 405-416 (2012).
  9. Boulis, N. M., et al. Lumbar intraspinal injection of neural stem cells in patients with ALS: results of a Phase I trial in 12 patients. Stem Cells. 30 (6), 1144-1151 (2012).
check_url/fr/4371?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Federici, T., Hurtig, C. V., Burks, K. L., Riley, J. P., Krishna, V., Miller, B. A., Sribnick, E. A., Miller, J. H., Grin, N., Lamanna, J. J., Boulis, N. M. Surgical Technique for Spinal Cord Delivery of Therapies: Demonstration of Procedure in Gottingen Minipigs. J. Vis. Exp. (70), e4371, doi:10.3791/4371 (2012).

View Video