Probe-baseret Konfokal Laser Endomicroscopy af urinvejene: Teknikken

Summary

Sondebaseret konfokal laser endomicroscopy muliggør real-time mikroskopi af den humane urinvejene under cystoskopi, tilvejebringe dynamisk, intravital billeddannelse af patologiske tilstande, såsom blærecancer med cellulær opløsning. Endomicroscopy kan forstærke den diagnostiske nøjagtighed standard hvidt lys endoskopi og give intraoperativ billede vejledning til at forbedre kirurgisk resektion.

Abstract

Probe-baseret konfokalt laser endomicroscopy (CLE) er en ny optisk imaging-teknologi, der muliggør real-time in vivo mikroskopi af slimhindeoverflader under standard endoskopi. Med applikationer, der aktuelt i luftvejene ¹ og gastrointestinale skrifter, har ^2-6 CLE også blevet undersøgt i urinvejene for blærekræft diagnose. ^7-10 Cellular morfologi og væv mikroarkitektur kan løses med micron skala opløsning i realtid, i tillæg til dynamisk billeddannelse af normale og patologiske vaskulatur. ⁷

Probe-baserede CLE system (Cellvizio, Mauna Kea Technologies, France) består af en genanvendelig fiberoptisk billeddannende probe koblet til en 488 nm laser scanning enhed. Den billeddannende sonde anbringes i arbejdsgrupperne kanaler standard fleksible og stive endoskoper. Et endoskop-baseret CLE system (Optiscan, Australien), hvor den konfokale endomicroscopy functionality er integreret på endoskopet, anvendes også i mave-tarmkanalen. I betragtning af den større anvendelsesområde diameter, imidlertid er anvendelsen i urinvejene i øjeblikket begrænset til ex vivo-anvendelse. ¹¹ Konfokal billedoptagelse sker gennem direkte kontakt af den billeddannende probe med mål-væv og registreres som videosekvenser. Som i mavetarmkanalen, kræver endomicroscopy af urinvejene et exogenenous kontrastmiddel-hyppigst fluorescein, som kan administreres intravenøst ​​eller intravesikalt. Intravesikal administration er en veletableret fremgangsmåde til at indføre farmakologiske midler lokalt med minimal systemisk toksicitet, der er unik for urinvejene. Fluorescein hurtigt pletter den ekstracellulære matrix og har en etableret sikkerhedsprofil. ¹² Imaging sonder med forskellige diametre muliggøre kompatibilitet med forskellige kaliber endoskoper. Til dato har 1,4 og 2,6 mm prober blevet evalueret med fleksibel og riGID cystoskopi. ¹⁰ Recent adgang til en <1 mm imaging probe ¹³ åbner mulighed for CLE i de øvre urinveje under ureteroscopy. Fluorescens cystoskopi (dvs. fotodynamisk diagnose) og smalle bånd billeddannelse er yderligere endoskop-baserede optiske afbildningsmodaliteter ^14, der kan kombineres med CLE at opnå multimodal billeddannelse af urinvejene. I fremtiden kan CLE kobles med molekylære kontrastmidler, såsom fluorescensmærkede peptider ¹⁵ og antistoffer til endoskopisk billeddannelse af sygdomsprocesser med molekylær specificitet.

Protocol

1. Patientforberedelse Samtykke patient er planlagt til diagnostisk cystoskopi og andre endourological procedurer, såsom transuretral resektion af blære tumor (TURBT) for CLE. Omfatter i tilladelsen en beskrivelse af anvendelsen af ​​intravesical og / eller intravenøs fluorescein som kontrastmidlet. Spørge historie overfølsomhedsreaktion til fluorescein. Patienten anbringes for cystoskopi (typisk i lithotomy position) og fremstilles på steril måde. Fortsæt med standard hvidt ly…

Representative Results

CLE billeder gemmes som gråtoner videosekvensdele filer ved 12 frames per sekund. Billede fortolkning sker i realtid og kan anvendes til at påvirke den kliniske beslutningsproces under en testpræparater protokol. Offline analyse, som omfatter revision af videosekvensen, ekstra billedbehandling, såsom mosaicing, 7 og sammenligning med standard patologi, er vigtige i den indlæringskurven fase er forbundet med teknologien. 1B og 1C er repræsentative CLE billeder opnået fra to forskellige blæretumorer ved…

Discussion

Opnåelse og fastholdelse af solid en face kontakt mellem den billeddannende sonden og blære slimhinden er den mest kritiske skridt i at erhverve optimal billedkvalitet. Der er cirka en 3-5 patient indlæringskurve at udvikle fingerfærdighed til at manipulere den billeddannende sonden og at holde sonden konstant under billedoptagelse. Desuden, når denne fremgangsmåde udføres in vivo, kan patientens bevægelser (dvs. luftvejs) og vaskulære pulsationer påvirker imaging probe kontakt med b…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments (optional)
Cellvizio 100 Series	Mauna Kea Technologies	100 Series	Includes confocal processor and LSU: F400-v2 at 488 nm
Cellvizio Confocal Miniprobe	Mauna Kea Technologies	Gastroflex UHD
AK-FLUOR 10%	Akorn, Inc.	NDC 17478-253-10