Summary

Probe-based Endomicroscopy laser confocale del tratto urinario: La Tecnica

Published: January 10, 2013
doi:

Summary

Sonda basata endomicroscopy laser confocale consente in tempo reale la microscopia del tratto urinario umano durante cistoscopia, fornendo dinamico, imaging intravitale di stati patologici come il cancro della vescica con risoluzione cellulare. Endomicroscopy può aumentare l'accuratezza diagnostica di livello luce bianca endoscopia e fornire orientamenti immagine intraoperatoria per migliorare la resezione chirurgica.

Abstract

Probe-based laser confocale endomicroscopy (CLE) è una tecnologia emergente di imaging ottico che permette in tempo reale de microscopia in vivo di superfici mucose durante il normale endoscopia. Con applicazioni attualmente nelle vie respiratorie e gastrointestinali 1, 2-6 CLE è stato analizzato nel tratto urinario per la diagnosi del cancro della vescica. 7-10 morfologia cellulare e microarchitettura del tessuto può essere risolto con risoluzione scala micron in tempo reale, oltre a l'imaging dinamico del sistema vascolare normale e patologico. 7

La sonda basata CLE sistema (Cellvizio, Mauna Kea Technologies, Francia) costituita da una sonda a fibre ottiche di imaging riutilizzabile accoppiato ad un'unità di scansione laser 488 nm. La sonda di imaging viene inserito nei canali di lavoro standard, endoscopi flessibili e rigidi. Un endoscopio basato CLE sistema (Optiscan, Australia), in cui il functionalit endomicroscopy confocaley è integrato sulla endoscopio, è utilizzato anche nel tratto gastrointestinale. Data la portata diametro più grande, tuttavia, applicazione nel tratto urinario è attualmente limitato all'uso ex vivo. 11 acquisizione immagine confocale viene fatto attraverso il contatto diretto della sonda imaging con il tessuto bersaglio e registrata come sequenze video. Come nel tratto gastrointestinale, endomicroscopy del tratto urinario richiede un exogenenous contrasto agente più comunemente fluoresceina, che può essere somministrato per via endovenosa o per via endovescicale. Somministrazione endovescicale è un metodo consolidato per introdurre agenti farmacologici localmente con minima tossicità sistemica che è unico per il tratto urinario. Fluoresceina rapidamente le macchie della matrice extracellulare e ha un profilo di sicurezza. Imaging 12 sonde di diversi diametri garantire la compatibilità con endoscopi di calibro diversi. Fino ad oggi, 1,4 e 2,6 millimetri sonde sono state valutate con il flessibile e ricistoscopia gid 10. recente disponibilità di un <1 mm di imaging sonda 13 si apre la possibilità di CLE nel tratto urinario superiore durante ureteroscopia. Cistoscopia a fluorescenza (cioè diagnosi fotodinamica) e l'imaging a banda stretta sono ulteriori endoscopio a base di modalità di imaging ottico 14 che possono essere combinati con CLE per raggiungere l'imaging multimodale del tratto urinario. In futuro, CLE può essere accoppiato con mezzi di contrasto molecolari come peptidi contrassegnati in modo fluorescente 15 e anticorpi per l'imaging endoscopico di processi di malattia con specificità molecolare.

Protocol

1. Preparazione del paziente Il consenso del paziente in programma per la cistoscopia diagnostica e altre procedure endourologiche come resezione transuretrale del tumore della vescica (TURBT) per CLE. Includere nella consenso una descrizione dell'uso di fluoresceina intravescicale e / o endovenosa come agente di contrasto. Informarsi storia della reazione di ipersensibilità ad fluoresceina. Paziente viene posizionato per cistoscopia (tipicamente in posizione litotomica) e preparato in modo ste…

Representative Results

CLE immagini sono salvate come file di sequenze di video in scala di grigi a 12 fotogrammi al secondo. L'interpretazione dell'immagine avviene in tempo reale e possono essere utilizzati per influenzare il processo decisionale clinico in un protocollo sperimentale. Analisi offline, che include la revisione della sequenza video, un'ulteriore elaborazione delle immagini come mosaicatura, 7 e confronto con standard di patologia, è importante durante la fase di apprendimento associata con la tecnologi…

Discussion

Raggiungere e mantenere solidi contatti en face tra la sonda di imaging e la mucosa della vescica è il passo più importante per acquisire una qualità ottimale dell'immagine. C'è approssimativamente 3-5 apprendimento paziente di sviluppare l'abilità di manipolare la sonda imaging e tenere la sonda costante durante l'acquisizione dell'immagine. Inoltre, poiché questo procedimento è condotto in vivo, i movimenti del paziente (cioè respiratoria) e pulsazioni vascolari p…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Gli autori desiderano ringraziare Mauna Kea Tecnologie per il supporto tecnico. Gli autori hanno anche ringraziare Shelly Hsiao per l'assistenza tecnica e Kathleen E. Mach per la revisione critica. Questo lavoro è stato in parte finanziato dal NIH R01CA160986 a JCL

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
Cellvizio 100 Series Mauna Kea Technologies 100 Series Includes confocal processor and LSU: F400-v2 at 488 nm
Cellvizio Confocal Miniprobe Mauna Kea Technologies Gastroflex UHD
AK-FLUOR 10% Akorn, Inc. NDC 17478-253-10

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Citer Cet Article
Chang, T. C., Liu, J., Liao, J. C. Probe-based Confocal Laser Endomicroscopy of the Urinary Tract: The Technique. J. Vis. Exp. (71), e4409, doi:10.3791/4409 (2013).

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