Vivo इमेजिंग सिस्टम एक न्यूरो इनवेसिव encephalitic वायरस के जांच (IVIS)
Summary
और एक उपन्यास के रूप में luciferase vivo इमेजिंग सिस्टम (IVIS) में उपयोग करने के लिए रोग endpoints की पहचान पहले क्लिनिकल घटनाक्रम होने का मतलब है. IVIS हमें वास्तविक समय में कई दिनों से अधिक encephalitic वायरस के आक्रमण कल्पना करने के लिए, भविष्य के अध्ययन के लिए एक और अधिक सटीक रोग मॉडल प्रदान करने के लिए अनुमति दी गई है. यह भी हमें antivirals और टीकों की संभावित सुरक्षात्मक सुविधाओं की पहचान करने के लिए वर्तमान में उपयोग किया पशु मॉडल की तुलना में तेजी से करने के लिए अनुमति दी गई है. कई बार बिंदुओं पर व्यक्तिगत जानवरों का उपयोग करने की क्षमता कम पशु आवश्यकताओं, लागत, और रोग के अध्ययन के लिए एक अधिक मानवीय और अधिक वैज्ञानिक साधन सुनिश्चित करने का उपयोग जानवरों के लिए समग्र रुग्णता सुनिश्चित करता है.
Abstract
आधुनिक इमेजिंग तकनीक में प्रगति के आगे विकास और वायरल अनुसंधान पूरा रास्ते में शोधन प्रोत्साहित करते हैं. शुरू में ह्यूम 3Rs में रसेल और Burch द्वारा प्रस्तावित (प्रतिस्थापन, शोधन कमी), वैज्ञानिक अनुसंधान के क्षेत्र में पशु मॉडल का उपयोग जानवर के उपयोग को कम करने, जबकि वैज्ञानिक सटीकता और गति में सुधार करने के लिए नए तरीकों की पहचान के लिए निरंतर दबाव के तहत है. ह्यूम प्रिंसिपलों के लिए एक बड़ी चुनौती है, लेकिन कैसे सुनिश्चित करने के लिए अध्ययन के सांख्यिकीय सही कर रहे हैं, जबकि पशु रोग रुग्णता और कुल संख्या को कम करने. वैक्सीन प्रभावकारिता के अध्ययन वर्तमान में पशुओं की एक बड़ी संख्या की आवश्यकता है क्रम में सांख्यिकीय महत्वपूर्ण माना जा और अक्सर उच्च और प्रतिरक्षा संरक्षण के पहचान के लिए रुग्णता और मृत्यु दर endpoints में परिणाम. हम एक जुगनू bioluminescent एंजाइम के साथ संयोजन के रूप में vivo इमेजिंग सिस्टम (IVIS) में उपयोग करने के लिए उत्तरोत्तर एक खिलाडि़यों द्वारा केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (सीएनएस) के आक्रमण को ट्रैकएक murine मॉडल में phalitic वायरस. आमतौर पर, रोग अपेक्षाकृत धीरे प्रगति, लेकिन वायरस प्रतिकृति तेजी से है, CNS के भीतर विशेष रूप से, और एक बार है, घातक परिणाम के लिए नेतृत्व कर सकते हैं. TC83 ल्यूक के साथ चूहों के intranasal संक्रमण के बाद, एक तनु विनीज़वीलियन घोड़े इन्सेफेलाइटिस वायरस तनाव luciferase जीन व्यक्त संशोधित, हम मस्तिष्क के भीतर नैदानिक रोग के लक्षणों के विकास से पहले कम से कम तीन दिनों वायरस प्रतिकृति कल्पना कर सकते हैं. एक कुंजी encephalitic रोग विकास endpoint हम जल्दी TC83 ल्यूक संक्रमण के खिलाफ चिकित्सीय और टीका सुरक्षा की पहचान पहले नैदानिक लक्षण विकसित कर रहे हैं के रूप में उपयोग CNS आक्रमण. IVIS तकनीक के साथ हम दवा चिकित्सा विज्ञान और टीकों की तेजी और सटीक परीक्षण दिखाना है जबकि पशु संख्या और रुग्णता को कम करने में सक्षम हैं.
Protocol
Representative Results
Discussion
जबकि इस प्रोटोकॉल के इमेजिंग vivo विश्लेषण में पहलुओं के लिए शामिल किया गया है, यह महत्वपूर्ण है कि भविष्य के अध्ययन के लिए एक महत्वपूर्ण कारक के रूप में bioluminescent वेक्टर पहचान. TC83 की हमारी उपयोग, VEEV की एक …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस पांडुलिपि के लिए वीडियो संपादन के साथ उसकी सहायता के लिए translational विज्ञान UTMB NIH 1UL1RR029876-01 अनुदान और अलीशा Prather के लिए संस्थान.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| D-Luciferin | |||
| Isoflurane | |||
| Xenogen IVIS System (Spectrum) | Caliper Life Sciences | ||
| XGI-8-gas Anesthesia System | Caliper Life Sciences | ||
| XIC-3 Containment Box | Caliper Life Sciences | ||
| LivingImage 4.0 Software | Caliper Life Sciences | ||
| Telemetry/identification chips | Bio Medic Data Systems | IPTT-300 | Animal ID and Temperature |
| BD Integra 1ml TB syringe with 26 g x 3/8” needle | Fisher Scientific | 305279 | |
| Vet Bond tissue adhesive | Fisher Scientific | NC9259532 | |
| Vetropolycin Ophthalmic Ointment | Webster Veterinary Products | 78444656 | |
| Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline 1X | Invitrogen | 14190-144 | |
| BMDS Chip Reader | Bio Medic Data Systems | DAS-7007S | |
| DAS-HOST Software | Bio Medic Data Systems | Used to download probe information |
References
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