Summary

Cardiac Stress Test indusert av Dobutamine og overvåkes av Hjertekateterisering i Mus

Published: February 10, 2013
doi:

Summary

Vi beskriver protokollen til å utføre en hjertestans stresstest indusert av dobutamin og overvåkes av hjertekateterisering i normale mus. Også vi vise sin søknad for å avsløre subklinisk hjertesykdom i fettrik diett-indusert overvektige mus.

Abstract

Dobutamin er en β-adrenerg agonist med en affinitet høyere for reseptor uttrykt i hjertet (β 1) enn for reseptorer uttrykt i arteriene (β 2). Når systemisk administrert, det øker kardial etterspørsel. Dermed avslører dobutamin unormal rytme eller iskemiske områder som potensielt i fare for hjerteinfarkt.

Overvåking av hjertefunksjonen under en hjertestans stresstest kan utføres av enten ecocardiography eller hjertekateterisering. Sistnevnte er en invasiv men mer nøyaktig og informativt teknikk som den førstnevnte.

Cardiac stresstest indusert av dobutamin og overvåkes av hjertekateterisering utført som beskrevet her gjør, i ett enkelt eksperiment, måling av følgende hemodynamiske parametre: hjertefrekvens (HR), systolisk trykk, diastolisk trykk, ende-diastolisk trykk, maksimal overtrykk utvikling (dP / dtmax) og maksimal negativ presseure utvikling (dP / dt min), ved baseline forhold og under økende doser av dobutamin.

Som forventet, i normale mus observerte vi en dobutamin doserelatert økning i HR, dP / dt max og dP / dt min. Videre, på høyeste dose testet (12 ng / g / min) hjerte dekompensasjon av fettrik diett-indusert overvektige mus ble avslørt.

Protocol

Protokoll ble godkjent av Etisk komité Facultad de Medicina Clinica Alemana-Universidad del Desarrollo. I. Forbereder Dobutamine Infusion Oppløs 10 mg av dobutamin i 20 ml sterilt distillated vann, for å oppnå en stamløsning av 500 ug / ml dobutamin. Delmengde og oppbevar ved -20 ° C. Denne løsningen kan brukes på minst 3 måneder. Tine en delmengde av dobutamin stamløsningen ved romtemperatur. Fortynn dobutamin stamløsning i sterilt 0,9% NaCl, for å…

Representative Results

Arterial trykksignal er definert av systolisk og diastolisk blodtrykk. Når trykksensoren er på innsiden av venstre ventrikkel, dets trykk (LVP) bølgeform er preget av en dråpe til null av det diastoliske trykket og utseendet av den venstre atriekontraksjonen før ventrikkel kontraksjon (figur 1). Ved studiestart tilstand, hadde ketamin-xylazin anesteserte normale mus HR på 280 ± 24, P maks 107 ± 8, P min av 5 ± 1, EDP av 14 ± 2, dP / dt maks 6081 ± 365 og dP / …

Discussion

Cardiac stresstest indusert av dobutamin og overvåkes av hjertekateterisering er arbeidskrevende. Likevel etter protokollen her beskrive og med en kort tid for trening, er det mulig å vurdere seks hemodynamiske parametere i en enkelt eksperiment som varer omtrent en time.

De kritiske trinnene i protokollen her presentert er cannulations av blodkar. Angående kanylering av karotis bør snittet utføres være dypt nok til å bryte de tre vevslag av arterien, og store nok til å tillate passa…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Vi takker Dr. Helio Salgado, Renata Lataro og Mauro de Oliveira, School of Medicine i Ribeirão Preto, Universitetet i Sao Paulo og Dr. Ben Janssen, Cardiovascular Research Institute Maastricht, Maastricht University, for sjenerøs hjelp under satt opp prosessen.

Dette arbeidet ble støttet av FONDECYT stipend N ° 11090114 til SDC

Materials

Reagents
PE-50/10 Warner Instruments 64-0752
Silk thread 6/0 HR17 Tagum SN0713K
Xylacin 20 mg/ml Laboratorio Centrovet
Ketamine 100 mg/ml Drag Pharma
Sodium chloride 0.9% Lab Sanderson S.A.
Dobutamine hydrochloride Sigma-Aldrich D0676
Syringe U-100 Insulin 29G x ½” Terumo Medical Co.
Forceps Dissecting Micro 11.5 cm Style 7 Lawton Medizintechnik 09-0959
Graefe Forceps Cvd 0.7mm 7cm Lawton Medizintechnik 62-0263
Clamps Dieffenbach bulldog Cl Str 38 mm Lawton Medizintechnik 60-010
Vannas Scissors 8 cm Str Fh Lawton Medizintechnik 63-1400
Equipment
SPR-671 MiKro-Tip Pressure catheter Millar instruments 840-6719
PCU-2000 Pressure Control Unit Millar instruments 880-0129
PowerLab 4/30 ADinstruments Pty Ltd. ML866
LabChartPro 7 ADinstruments Pty Ltd. MLU260/7
Legato200 Infusion Pump KdScientific KD-KDS210P
TCAT-2LV Temperature controller and isothermal heating plate PhysiTemp instruments Inc.
Medical Oxygen supply Indura
Rectal probe ADinstruments Pty Ltd. MLT1404
Trinocular microscope, axial illumination LW Scientific Z2B-TRI-ETNE, ILP-1502-LTS1, ILP-1502-DGGF

References

  1. Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 281, H1938-H1945 (2001).
  2. Janssen, B. J., et al. Effects of anesthetics on systemic hemodynamics in mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287, H1618-H1624 (2004).
  3. Lorenz, J. N. A practical guide to evaluating cardiovascular, renal, and pulmonary function in mice. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 282, R1565-R1582 (2002).
  4. Lorenz, J. N., Robbins, J. Measurement of intraventricular pressure and cardiac performance in the intact closed-chest anesthetized mouse. Am. J. Physiol. 272, H1137-H1146 (1997).
  5. Nemoto, S., DeFreitas, G., Carabello, B. A. Cardiac catheterization technique in a closed-chest murine model. Contemp. Top. Lab Anim. Sci. 42, 34-38 (2003).
  6. Daniels, A., et al. Impaired cardiac functional reserve in type 2 diabetic db/db mice is associated with metabolic, but not structural, remodelling. Acta Physiol. (Oxf). 200, 11-22 (2010).
  7. De Celle, T., et al. Long-term structural and functional consequences of cardiac ischaemia-reperfusion injury in vivo in mice. Exp. Physiol. 89, 605-615 (2004).
  8. Huntgeburth, M., et al. Transforming growth factor beta oppositely regulates the hypertrophic and contractile response to beta-adrenergic stimulation in the heart. PLoS One. 6, e26628 (2011).
  9. Reddy, A. K., et al. Cardiac function in young and old Little mice. J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 62, 1319-1325 (2007).
  10. Christoffersen, C., et al. Cardiac lipid accumulation associated with diastolic dysfunction in obese mice. Endocrinology. 144, 3483-3490 (2003).
check_url/fr/50050?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Calligaris, S. D., Ricca, M., Conget, P. Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice. J. Vis. Exp. (72), e50050, doi:10.3791/50050 (2013).

View Video