L'angiogenesi nel polmone del ratto ischemica
Summary
Il polmone è perfuso sia l'arteria sistemica bronchiale e arterie polmonari. Nella maggior parte delle patologie polmonari, è il più piccolo vascolare sistemica che mostra neovascolarizzazione robusta. La cessazione del flusso ematico polmonare promuove l'angiogenesi vivace bronchiale. Noi forniamo i dettagli chirurgici di indurre ischemia arteriosa polmonare sinistra che promuove la neovascolarizzazione bronchiale.
Abstract
Il polmone adulto è perfuso sia l'arteria sistemica bronchiale e il ritorno venoso intero che scorre attraverso le arterie polmonari. Nella maggior parte delle patologie polmonari, è il più piccolo vascolare sistemica che risponde ad una esigenza di perfusione polmonare avanzata e mostra neovascolarizzazione robusta. Ischemia vascolare polmonare indotta da ostruzione arteriosa polmonare ha dimostrato di provocare una rapida angiogenesi arteriosa sistemica nell'uomo e in modelli animali. Sebbene la valutazione istologica del corso tempo di proliferazione dell'arteria bronchiale nei ratti è stato accuratamente descritto da Weibel 1, meccanismi responsabili di questa crescita di nuovi vasi organizzata non sono chiare. Noi forniamo i dettagli chirurgici di indurre sinistra ischemia arteriosa polmonare nel ratto che porta alla neovascolarizzazione bronchiale. Quantificazione del grado di angiogenesi presenta una sfida aggiuntiva per la presenza dei due letti vascolari all'interno del polmone. Metodideterminare angiogenesi funzionale sulla base iniezioni microsfere sono etichettati.
Introduction
Angiogenesi sistemica nel polmone è ben riconosciuta. In condizioni patologiche quali asma 2, fibrosi polmonare interstiziale 3, cancro 4, tromboembolia polmonare cronica e 5, il sistema vascolare sistemica e circonda i prolifera polmonari e invade il parenchima polmonare. Tuttavia, i modelli animali per studiare questa attivazione differenziale del sistemica piuttosto che la circolazione polmonare sono pochi. Forse il modello più riproducibile di neovascolarizzazione sistemica nel polmone del mammifero adulto è quella che si verifica dopo induzione cronica ischemia arteriosa polmonare. La risposta a sinistra ostruzione dell'arteria polmonare nell'uomo 5-7, 8 cani, maiali, pecore 9 10, cavie, ratti 11 1, 12, 13, 14 e topi è la rapida proliferazione dell'arteria bronchiale e arterie intercostali. I meccanismi responsabili della sistemica neovascularizione del polmone dopo ischemia polmonare non sono noti e non sono state ampiamente studiate. La durata di angiogenesi bronchiale nel ratto dopo sinistra ostruzione dell'arteria polmonare è stata descritta nel lavoro istologica di Weibel 1. Estendere questo lavoro nel ratto, il nostro laboratorio ha focalizzato su entrambi i fattori di crescita importanti in questo processo, nonché l'esito fisiologico di questo neovascolarizzazione nel polmone. Risultati dimostrano la chemochina CXC CINC-3 è elevata precoce dopo ischemia e trattando ratti con un anticorpo neutralizzante per CXCR2, il recettore per CINC-3, attenua angiogenesi 13. Il sistema vascolare di nuova costituzione bronchiale 14 giorni dopo l'insorgenza di ischemia polmonare ha dimostrato di essere anormale, con un significativo aumento della permeabilità delle proteine 15. Funzione polmonare sinistra non stava mostrando normale diminuita capacità di diffusione e una diminuzione del volume polmonare 15. Sebbene la neovascolarizzazione può avere contributed alla conservazione del tessuto polmonare durante ischemia cronica polmonare, sembra non essere normale e può contribuire ad un prolungato decremento della funzione polmonare.
Forse uno degli aspetti più curiosi di questo modello riguarda la distribuzione spaziale della proliferazione dei vasi sanguigni. Nonostante il rilascio di fattori di crescita all'interno del parenchima polmonare da ischemia, la neovascolarizzazione originario monte relativamente grandi arterie bronchiali. L'arteria bronchiale normale si pone come un piccolo ramo della aorta e invade l'albero delle vie aeree alla carena. Così il meccanismo con cui i fattori di crescita indurre la fase iniziale di arteriogenesi non è chiara. Suggeriamo che il topo, con una anatomia vascolare simili agli esseri umani, fornisce un'opportunità unica di studiare i meccanismi responsabili per l'angiogenesi sistemico polmonare durante l'ischemia. Sebbene completa ostruzione dell'arteria polmonare sinistra è un evento raro in soggetti umani,aumentata vascolarizzazione bronchiale sembra essere similmente indotta in pazienti indipendentemente dalla dimensione del sito e ostruzione dell'arteria polmonare 16. Così, forniamo una descrizione dettagliata del metodo chirurgico per legare l'arteria polmonare sinistra in ratti e un mezzo per quantificare la grandezza di angiogenesi.
Protocol
Representative Results
Discussion
Sinistra legatura dell'arteria polmonare in tutte le specie testate porta alla robusta neovascolarizzazione sistemica del polmone ischemica. Abbiamo presentato i dettagli del metodo chirurgico in un modello di ratto. I nostri risultati prodotti da fusione vascolare, istopatologia, e in vivo dimostrano che l'etichettatura arterie bronchiali proliferano e perfusione del parenchima polmonare. Così, i meccanismi di angiogenesi bronchiale può essere studiata in un modello animale che affianca la condizione…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Riconosciamo il lavoro del dottor Adlah Sukkar, MD nell'assistere con fusione del polmone. Questo lavoro è stato finanziato dal NHLBI, HL088005.
Materials
| Reagents: | Company | ||
| buprenorphine hydrochloride, Puralube | Butler Schein | ||
| bupivicaine | APP Pharmaceuticals | ||
| Povidone-Iodine swabstick | Dynarex Corporation | ||
| polypropylene suture size 6-0, 3/8 circle reverse cutting needle | Myco Medical | ||
| PE20 tubing | Becton Dickinson | ||
| 15 μm crimson polystyrene fluorospheres | Invitrogen | ||
| 1 ml Hamilton glass syringe | Hamilton Company | ||
| Equipment: | |||
| Genie Plus syringe pump | Kent Scientific | ||
| Fluorescence Spectrophotometer | Digilab | ||
| Rodent Ventilator Model 683 | Harvard Apparatus | ||
| Table 1. Table of specific reagents and equipment. |
References
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