Mikro-Bilgisayarlı Tomografi Görüntüleme için Microfil ile İskemik arka ayaklarında ve damarları bir Perfüzyon için osmotik İlaç Taşıyıcı
Summary
Biz burada göstermek<em> In vivo</emSürekli yerel ilaç dağıtım ve bir fare modelinde, bacak iskemisi oluşturulması için bir ozmotik pompa> yerleştirilmesi. Ayrıca, bacak damar mikro-bilgisayarlı tomografi (mikro-BT) görüntüleme için hazırlamak için, Microfil, bir silikon radyoopak madde ile perfüze.
Abstract
Periferik arter hastalığı olan hayvan modellerinde ön-klinik araştırma mikro teşvik etmek için tasarlanmış terapötik maddelerin etkinliğinin test edilmesinde bir rol oynar. Uygulama yoluna derinden bu ajanların 1,2 biyo ve etkinliğini etkiler, çünkü bu maddeler için dağıtım yöntemi seçimi önemlidir. Bu makalede, yerel bir kateterize ozmotik pompa kullanarak iskemik arka ayaklarında bir madde yönetmek nasıl gösterilmektedir. Bu pompa uzun bir süre boyunca sürekli olarak ayrılan sulu bir solüsyonunun bir şekilde sabit hacimli bir teslim edebilir. Ayrıca sol bacak içinde profunda femoris ve epigastrikan arterlerin kökeni proksimal femoral arter ligasyonu ile oluşturulan tek taraflı bacak iskemi bizim fare modeli sunuyoruz. Son olarak, Microfil, bir silikon radyoopak döküm maddesi ile infrarenal abdominal aorta ve bacak damar perfüzyon in vivo kanülasyon ve ligasyonu tarif. Microfil serpmek ve dolgu tüm vasküler yatak (arteriyel ve venöz), ve çıkış için büyük damar kablo bağlandı çünkü, ajan küçük numune mikro-CT 3 kullanımı ile gelecek ex vivo görüntüleme için damar muhafaza edilebilir olabilir .
Introduction
Periferik arter hastalığı (PAH) ve bacaklar 4 yetersiz kan akımı neden olan bir aterosklerotik hastalıktır. 8 ile 12 milyon Amerikalı etkiler ve mevcut tıbbi tedaviler sadece sınırlı rahatlama 5,6 sunuyoruz. Bacaklarda kan dolaşımını artırmak terapötik ajanlar sadece hastalığın ilerlemesini engellemek değil, aynı zamanda yaşam kalitesini artırmak olmaz. Genellikle yaşlı hastalarda görülen düşük böbrek ve karaciğer fonksiyon ilaç metabolizması azaltmak ve sistemik yönetimi ile yan etkileri artırabilir çünkü PAD insidansı 50 yaş üzerindeki kişilerde daha yüksektir, bu nedenle yerel farmakolojik tedavi daha arzu edilen bir tedavi yöntemidir.
Böylece, yerel olarak yönetilen ajanlar anjiyogenez ve mikrovasküler yeniden teşvik ederek bacak iskemi hafifletmek olmadığını incelemek için PAD bir fare modeli yarattı. Özellikle de, sürekli olarak terapötik maddeyi sunmak için bir kateter takılmıştır ozmotik pompa kullanıldığındafarelerin iskemik uyluk kas. Bizim dağıtım sistemi kullanarak, yerel ortamda ilacın optimum konsantrasyonu korumak başardık, bu yaklaşım, uygun ilaç biyoaktivitesi sağlar olası sistemik yan etkileri önler ve sistemik yönetimi ile ilgili sınırlı yerel uyuşturucu erişim dezavantajı üstesinden gelir. Ayrıca, yerel olarak yönetilen ajanlar revaskülarizasyon teşvik olmadığını değerlendirmek için, ileri döküm ve mikrovasküler değişiklikler ölçümü sağlayan yüksek çözünürlüklü görüntüleme teknikleri kullanılır. Bununla birlikte, bu video makalede kullanılan metotlar kombinasyonu PAD hastalarda 7-9 farmakolojik revaskülarizasyon anlaşılmasına yardımcı olmak üzere ön-klinik çalışmalarda yararlıdır.
Protocol
Representative Results
Discussion
Burada bacak iskemisi, bir fare modelinde ozmotik ilaç / maddenin dağıtımı için bir yöntem sunulmaktadır. Buna ek olarak, biz damar ağının analizi için 3 boyutlu bir yeniden üretmek için Microfil kullanmış olduğu bir döküm tekniği açıklar.
Iskemi ya da şiddeti seviyesi arteriyel bağlanma / eksizyonu yapılır yere göre değişir. Biz profunda femoris ve epigastrikan arterlerin kökeni proksimal femoral arter bir çift ligasyonu oluşturulan, bu yaklaşımın distal b…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar editoryal yardım için, mikro-CT cerrahi yardım için görüntüleme, Edward TH Yeh, MD, ve Rebecca Bartow, Doktora ile yaptığı teknik yardım için MD Anderson Küçük Hayvan Görüntüleme Tesisi Keith Michel teşekkür etmek istiyorum. Bu çalışma, Amerikan Kalp Birliği tarafından kısmen desteklenmiştir.
Materials
| Reagent/Material | |||
| Surgical tools | Fine Science Tools | Type: Tool | |
| Puritan sterile cotton swabs | Fisher Scientific | 22-029-499 | Type: Tool |
| Betadine (povidone-iodine) | Fisher Scientific | 19-065534 | Type: Reagent |
| 70% Alcohol pads | Fisher Scientific | NC9926371 | Type: Reagent |
| Phosphate buffered saline | Lonza | 17-516F | Type: Reagent |
| 6-0 prolene suture | Cardinal Health | 8709 | Type: Tool |
| 8-0 prolene suture | Cardinal Health | 2775 | Type: Tool |
| Depilatory cream | Nair | Type: Tool | |
| Osmotic pump | ALZET | 1002 | Type: Tool, 14 day release |
| Vinyl catheter | ALZET | 7760 | Type: Tool |
| Heparinized saline (0.9%) | Baxter | 2B0944 | Type: Reagent |
| Neutral buffered formalin | Richard-Allan Scientific | 5705 | Type: Reagent |
| Microfil (silicone rubber contrast agent) | Flowtech | MV-112 | Type Reagent, Microfil White |
| Cal-Ex II (formic acid solution) | Fisher Scientific | CS511-1D | Type: Reagent |
| Buprenex | CIII | 7571 | Type: Analgesic |
| Bupivicaine | Hospira, Inc. | 381 | Type: Analgesic |
| Equipment | |||
| Dissecting microscope | Carl Zeiss Microimaging | Zeiss Stemi 2000-C | Type:Equipment |
| Laser Doppler perfusion imager | Perimed Inc. | Periscan PIM3 | Type:Equipment |
| Micro-CT imaging system | GE Healthcare | Explore Locus SP | Type:Equipment |
References
- Epstein, S. E., Fuchs, S., Zhou, Y. F., Baffour, R., Kornowski, R. Therapeutic interventions for enhancing collateral development by administration of growth factors: basic principles, early results and potential hazards. Cardiovasc. Res. 49, 532-542 (2001).
- Esaki, J., Marui, A., Tabata, Y., Komeda, M. Controlled release systems of angiogenic growth factors for cardiovascular diseases. Expert Opin. Drug Deliv. 4, 635-649 (2007).
- Bentley, M. D., Ortiz, M. C., Ritman, E. L., Romero, J. C. The use of microcomputed tomography to study microvasculature in small rodents. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 282, 1267-1279 (2002).
- Golomb, B. A., Dang, T. T., Criqui, M. H. Peripheral arterial disease: morbidity and mortality implications. Circulation. 114, 688-699 (2006).
- Hiatt, W. R. Pharmacologic therapy for peripheral arterial disease and claudication. J. Vasc. Surg. 36, 1283-1291 (2002).
- Hirsch, A. T., et al. Peripheral arterial disease detection, awareness, and treatment in primary care. JAMA. 286, 1317-1324 (2001).
- McDonald, D. M., Choyke, P. L. Imaging of angiogenesis: from microscope to clinic. Nat. Med. 9, 713-725 (2003).
- Hirsch, A. T., et al. ACC/AHA Guidelines for the Management of Patients with Peripheral Arterial Disease (lower extremity, renal, mesenteric, and abdominal aortic): a collaborative report from the American Associations for Vascular Surgery/Society for Vascular Surgery, Society for Cardiovascular Angiography and Interventions, Society for Vascular Medicine and Biology, Society of Interventional Radiology, and the ACC/AHA Task Force on Practice Guidelines (writing committee to develop guidelines for the management of patients with peripheral arterial disease)–summary of recommendations. J. Vasc. Interv. Radiol. 17, 1383-1397 (2006).
- Zagorchev, L., Mulligan-Kehoe, M. J. Molecular imaging of vessels in mouse models of disease. Eur. J. Radiol. 70, 305-311 (2009).
- Losordo, D. W., Dimmeler, S. Therapeutic angiogenesis and vasculogenesis for ischemic disease. Part I: angiogenic cytokines. Circulation. 109, 2487-2491 (2004).
- Waters, R. E., Terjung, R. L., Peters, K. G., Annex, B. H. Preclinical models of human peripheral arterial occlusive disease: implications for investigation of therapeutic agents. J. Appl. Physiol. 97, 773-780 (2004).
