5/6e néphrectomie en association avec High Salt Diet Nitric Oxide Synthase et inhibition pour provoquer la maladie rénale chronique chez le rat Lewis

Résumé

Une méthode en deux étapes pour établir l'insuffisance rénale chronique (IRC) chez le rat Lewis par l'ablation chirurgicale 5/6e de la masse rénale est décrite. Combinaison de la procédure chirurgicale, NOS-inhibition et une alimentation riche en sel conduit à un modèle ressemblant CKD humaine, permettant l'étude des mécanismes et le développement de nouvelles interventions thérapeutiques causales.

Résumé

L'insuffisance rénale chronique (IRC) est un problème mondial. Le ralentissement de la progression CKD est une priorité majeure de santé. Depuis CKD est caractérisée par des désordres complexes de l'homéostasie, les modèles animaux d'intégration sont nécessaires pour étudier le développement et la progression de l'IRC. Pour étudier le développement d'interventions thérapeutiques CKD et roman en CKD, nous utilisons le modèle d'ablation par néphrectomie 5/6e, un modèle expérimental bien connu de la maladie rénale progressive, ressemblant à plusieurs aspects de la MRC de l'homme. La réduction brute de la masse rénale glomérulaire progressive et provoque des blessures tubulo-interstitielle, la perte de néphrons résiduelles et le développement de l'hypertension systémique et glomérulaire. Elle est également associée avec la perte progressive intrarénal capillaire, l'inflammation et la glomérulosclérose. Les facteurs de risque pour CKD invariablement impact sur la fonction endothéliale. Pour imiter cela, nous combinons l'enlèvement de 5/6e de la masse rénale avec de l'oxyde nitrique (NO) de l'épuisement et une alimentation riche en sel. Après l'arrivée et l'acclimatation, les animaux recevoir un inhibiteur de la NO-synthase (NG-nitro-L-arginine) (L-NNA) additionné à de l'eau potable (20 mg / L) pendant une période de 4 semaines, suivie de droite uninéphrectomie verso. Une semaine plus tard, une néphrectomie subtotale (SNX) est réalisée sur le côté gauche. Après SNX, les animaux sont autorisés à récupérer pendant deux jours, puis LNNA dans l'eau potable (20 mg / L) pour une nouvelle période de 4 semaines. Un régime élevé en sel (6%), complété en rez-de-chow (voir la ligne du temps Figure 1), se poursuit tout au long de l'expérience. Progression de l'insuffisance rénale est suivie dans le temps par la mesure de l'urée plasmatique, la pression artérielle systolique et de la protéinurie. Par six semaines après SNX, l'insuffisance rénale s'est développée. La fonction rénale est mesurée en utilisant l'inuline «gold standard» et acide para-amino hippurique (PAH) technologies de déminage. Ce modèle de CKD est caractérisée par une réduction du taux de filtration glomérulaire (DFG) et le flux plasmatique rénal efficace (ERPF), hypertension (pression artérielle systolique> 150 mmHg), protéinurie (> 50 mg/24 h) Et l'urémie légère (> 10 mm). Ses caractéristiques histologiques incluent des dommages tubulo-interstitielle réfléchie par une inflammation, une atrophie tubulaire et une fibrose et une glomérulosclérose focale conduisant à une réduction massive des glomérules saines au sein de la population restante (<10%). Suivi jusqu'à 12 semaines après SNX montre la progression de l'IRC.

Introduction

En raison de sa nature progressive, qui a suivi une maladie rénale en phase terminale, et la morbidité cardiovasculaire et la mortalité associée, CKD est un problème croissant de santé publique ^1. Le ralentissement de la progression CKD est donc une priorité majeure de santé. Depuis CKD est caractérisée par des désordres complexes de l'homéostasie, les modèles animaux d'intégration sont nécessaires pour étudier le développement et la progression de l'IRC. Le rein est constitué d'un large éventail de différents types de cellules qui interagissent les uns avec les autres. Cette complexité ne peut être mimée in vitro.

Protocole

Toutes les expériences sont exécutées conformément aux lignes expérimentales de guide éthique animale du comité d'animal expérimental Utrecht. Le protocole est réalisé sous la direction et l'approbation du soin des animaux de l'institution de l'auteur et du comité de l'emploi.

CKD est induite chez le mâle consanguin rats Lewis (Charles River, Sulzfeld, Allemagne) à l'âge de 8 semaines. Les rats sont logés dans des conditions standard dans un environnement, de la lumière à température et humidité contrôlées.

1. Préparation de chirurgie

1. Stériliser les instruments chirurgicaux: ....

Résultats

Après néphrectomie subtotale, environ 1/6e de la masse rénale totale est laissée. Figure 4 montre le poids de la partie enlevée du rein droit avec moyenne et l'écart dans deux expériences précédentes. Il convient de garder à l'esprit que dans la semaine après UNX, l'hypertrophie du rein gauche se produit, indiquant que le poids qui doit être retiré calculé en fonction du poids du rein droit se traduit toujours en moins de 5/6e enlèvement. Cependant, comme il n'est pas possible de détermi.......

Discussion

L'ablation chirurgicale de 5/6e de la masse rénale chez le rat Lewis, combiné avec un régime riche en sel et l'inhibition de la NOS temporaire conduit à un modèle de CKD qui ressemble CKD humaine et permet d'étudier les mécanismes de causalité et l'efficacité des interventions thérapeutiques en CKD.

Le modèle de néphrectomie 5/6e est un modèle bien connu et largement décrit pour CKD. Toutefois, la simple élimination 5/6e de la masse rénale n'entraîne pas d'insuffisanc.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
;	;	;	réactif
L-NNA	Sigma-aldrich	N5501	;
Spongostan dental : coussinets en mousse de gel 1x1x1 cm	Johnson& Johnson	Ms0005	;
Ethicon Vicryl FS-2S naald 4/0 V392H p/36	Ethicon	V303H	;
Ethicon Vicryl RB-1+ naald 5/0 V303H p/36	Ethicon	V392H	;
Buprénorphine (0,3 mg/ml)	Par l’intermédiaire d’un pharmacien local commandé par Reckitt Benckiser pharmaceuticals	unknown	;
;	;	;	Équipement
Pince à tissus pour l’étudiant - 1x2 dents 12 cm	Outils de sciences fines (FST)	91121-12	;
Pince à motif standard pour étudiant	FST	91100-12	;
Ciseaux Mayo	FST	14010-15	;
2X Pince Semken	FST	11008-13	;
Ciseaux à iris d’étudiant	FST	91460-11	;
Olsen-Hegar Porte-aiguille	FST	12002-14	;