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Médecine

In situ recto abdominal transverso colgajo miocutáneo: un modelo de rata de miocutáneo isquemia reperfusión

Published: June 08, 2013
doi:
10.3791/50473
, ,
1Department of Surgery,Royal Infirmary of Edinburgh, 2Department of Nephrology,Royal Infirmary of Edinburgh

Summary

Transferencia de tejido libre es ampliamente utilizado en cirugía reconstructiva para restaurar la forma y la función después de la resección oncológica y trauma. Preacondicionamiento este tejido antes de la cirugía puede mejorar el resultado. En este artículo se describe una<em> In situ</em> Músculo recto abdominal transverso colgajo miocutáneo (TRAM) en ratas como un medio para probar estrategias de preacondicionamiento.

Abstract

Transferencia de tejido libre es el estándar de oro de la cirugía reconstructiva para reparar defectos complejos no susceptibles de opciones locales o aquellos que requieren de tejido compuesto. Lesión de isquemia-reperfusión (IRI) es una causa conocida de la insuficiencia colgajo libre parcial y no tiene tratamiento eficaz. El establecimiento de un modelo de laboratorio de esta lesión puede resultar costoso tanto económicamente como los mamíferos más grandes se utilizan convencionalmente y en la pericia requeridos por la dificultad técnica de estos procedimientos por lo general requiere el empleo de un microcirujano experiencia. Esta publicación y vídeo demuestran el uso efectivo de un modelo de IRI en ratas que no requieren conocimientos de microcirugía. Este procedimiento es un modelo in situ de un miocutáneo transverso abdominal (TRAM) donde se utilizan pinzas atraumáticas para reproducir la lesión por isquemia-reperfusión asociada con este tipo de cirugía. A Doppler escáner láser (LDI) se emplea para evaluar la perfusión del colgajo y el procesamiento de imágenes de software, Image J para evaluar el área de porcentaje de supervivencia piel como una medida de resultado primaria de la lesión.

Introduction

El objetivo de este protocolo es demostrar un modelo fiable y reproducible de la lesión por isquemia-reperfusión se observa en la transferencia de tejido libre para que las estrategias de intervención para ser investigados.

Transferencia de tejido libre se define como el desprendimiento vascular de un bloque aislado de tejido seguido de trasplante autólogo de que el tejido con anastomosis de los vasos seccionados de la solapa en los vasos nativos en el sitio receptor. El procedimiento es conocido como ITF y el tejido que está siendo transferida conoce como el colgajo libre.

Transferencia de tejido libre es el enfoque estándar de oro para la corrección de defectos de compuestos complejos, donde las opciones locales no son adecuados o no está disponible. 1-4 lesión por isquemia reperfusión (IRI) es inevitable en la transferencia de tejido libre, contribuye a aletear insuficiencia 5,6 y no tiene tratamiento eficaz. El carácter electivo de la cirugía de colgajo libre permite la administración de farmacológicosagentes Cal condición previa contra el IRI.

IRI resultados en el flujo a través de la alteración de la microcirculación por la activación endotelial y disfunción metabólica, aumento de la permeabilidad capilar 7 y el posterior edema intersticial 7, afluencia de células inflamatorias, 8 liberación de mediadores inflamatorios, las especies reactivas de oxígeno 9 y la deposición de complemento. 10 Este complejo proceso de la hipoxia y la posterior lesión por reperfusión conduce en última instancia a la muerte celular. Un modelo de miocutáneo IRI permite la eficacia del precondicionamiento estrategias sobre los resultados clínicos a evaluar. El trabajo reciente ha validado el uso de modelos animales de estudios IRI como un sustituto de la IRI humano mediante la comparación de los cambios moleculares observados en sujetos humanos y animales de datos existentes. 10,11

La rata del músculo recto abdominal transverso miocutáneo (TRAM) fue descrito por primera vez en 1987 en alemán y 12 en 199313 en Inglés. Este modelo ganó gran popularidad 13-25 como un modelo sólido barato para investigar diferentes estrategias para reducir IRI asociada a la transferencia de tejido libre. 14,17-22 La mayoría de estos estudios fueron diseñados como colgajos TRAM unipedicled basado en el profundo, inferior, . epigástrica pedículo vascular 15-18,20-22 La comparación de los datos de estos estudios es complicada por el uso de las diferentes islas cutáneas de tamaño (10,5 a 30 cm 2) y diferentes longitudes de seguimiento postoperatorio (2-10 días). El porcentaje de área de necrosis media solapa total en el brazo de control de estos estudios es del 69 ± 6,2% (media ± SEM). Debe tenerse en cuenta que todos estos seis documentos emplean el músculo recto del abdomen como un portador para el pedículo vascular, pero no exponen, dividir y microanastomose o sujetar los vasos. Zhang et al. 23 han descrito una verdadera, libre de rata colgajo TRAM sobre la base de los vasos epigástricos superiores en la que la fvueltas se plantearon, barcos divididos y el colgajo miocutáneo transferidos y microanastomosada a los vasos inguinales. Esta técnica requiere la difícil microanastomosis de 0,45 hasta 0,5 mm de los vasos de calibre. Sólo quince años se realizaron y de éstos el 67% sobrevivieron. 23 El modelo descrito por Zhang et al. 23 es un excelente modelo para el colgajo TRAM libre albedrío humano, ya que realmente refleja la lesión sufrida durante la ITF. Los otros modelos publicados de un colgajo TRAM rata reflejan con mayor precisión las lesiones sufridas durante una TRAM pediculado humano, pero no reflejan con exactitud el IRI ya que la aleta de no someterse a un período de isquemia seguida de reperfusión como el pedículo vascular no se sujeta o dividida y microanastomosis lleva a cabo. Este protocolo y video describe un nuevo modelo de transferencia de tejido libre de utilizar el TRAM rata en el que el IRI se replica usando microclamps. Esta mayor fidelidad reproduce IRI que sus predecesores TRAM pediculares pero es técnicamente más fácil que performing del microanastomosis. Microclamps han sido ampliamente empleado por investigadores de trasplante para recrear IRI asociada con trasplante de órganos sólidos; 26-33 sin embargo, esta es la primera vez que se ha descrito en el colgajo TRAM rata.

Protocol

Toda la cirugía se lleva a cabo de conformidad con las directrices establecidas por el Ministerio del Interior del Reino Unido y de la Universidad del Departamento de Servicios Veterinarios de Edimburgo. 1. Surgical procedimiento de establecimiento Notes Cambio en matorrales quirúrgicas limpias, bata, gorro y mascarilla exfoliante. Limpie todas las superficies de la sala de operaciones, incluidos los equipos con clorhexidina al 2% en alcohol isopropílico al 70%. Antes…

Representative Results

Modelos de rata son más económicos que los modelos animales más grandes, 36 son resistentes a las enfermedades en la naturaleza y puede ser manipulada genéticamente. Se han pensado animales de piel suelta, como roedores, tener una disposición diferente de suministro sanguíneo cutáneo en comparación con los animales de piel fijos, como los seres humanos y cerdos. En los animales de piel sueltas, la piel se suministra principalmente por los vasos sanguíneos cutáneos directos que pasan a través de la …

Discussion

Modificaciones y resolución de problemas

El protocolo presentado aquí reproduce la RII visto en la transferencia de tejido libre en un sistema experimental que permite una mayor comprensión de ese proceso y proporciona un medio para investigar los medios de mejorar el IRI y mejorar el resultado. Esto podría ser fácilmente modificado para producir una lesión más grave si se basa en la no dominante, en el fondo, epigástrica inferior pedículo o si se aumentara el tiempo de isquemia.

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Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabajo fue financiado por el Consejo de Investigación Médica de subvención G1000299.

El autor correspondiente agradece a Gary Borthwick, de la Universidad de Edimburgo, para asistir durante la cirugía.

Los autores desean agradecer el asesoramiento de Helen Douglas y Iain Mackay y que nos permite observar la epigástrica inferior profunda (DIEP) Procedimiento de colgajo (Canniesburn Unidad de Cirugía Plástica, Hospital Real de Glasgow, el 84 Castle Street, Glasgow G4 0SF, Reino Unido).

Los autores también desean agradecer a Gary Blackie en la Universidad de Edimburgo por su ayuda en la producción del video para este artículo.

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Moor LD12 laser doppler imaging scanner http://gb.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8
Complete homeothermic blanket system with flexible probe. Small. 230 VAC, 50 Hz 507221F www.harvardapparatus.com
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved 11052-10 2, http://www.finescience.de
Acland clamps 00398 V B-1 ‘V’ pattern clamps used on both artery and vein. http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf
Clamp applicator CAF-4 http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf
Gemini cautery unit 726067 www.harvardapparatus.com
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 D-5a.2 http://www.merciansurgical.com
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 JFA-5b http://www.merciansurgical.com
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 JF-5 http://www.merciansurgical.com
Acland Single Clamps B-1V (Pair) 396 http://www.merciansurgical.com
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight 67 http://www.merciansurgical.com
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT EA7613-11 http://www.merciansurgical.com
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT EA7652-14 http://www.merciansurgical.com
Derf Needle Holders 12 cm TC 703DE12 http://www.merciansurgical.com
Ethilon 5-0 W1618 http://www.farlamedical.co.uk/
Vicryl rapide 6-0 W9913 http://www.millermedicalsupplies.com/
Instrapac – Adson Toothed Forceps (Extra Fine) 7973 http://www.millermedicalsupplies.com/
Castroviejo needle holders 12565-14 http://s-and-t.ne
Heat Lamp http://www.chicken-house.co.uk
Silicone sheeting 0.3 mm translucent http://www.silex.co.uk/
Image J software http://rsbweb.nih.gov/ij/
Zeiss OPMI pico http://www.zeiss.co.uk/
Operating microscope
Vet tech solution isofluorane rig http://www.vet-tech.co.uk/
Vet tech solution isofluorane rig http://www.vet-tech.co.uk/
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Keywords: In Situ TRAM FlapRat ModelIschemia-reperfusion InjuryReconstructive SurgeryLaser Doppler ImagingImage JMicrosurgery
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Edmunds, M., Wigmore, S., Kluth, D. In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury. J. Vis. Exp. (76), e50473, doi:10.3791/50473 (2013).
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