Gavaging Adult zebravis
Summary
Het toenemende gebruik van zebravis als diermodel vereist de ontwikkeling van effectieve methoden voor het leveren van bekende hoeveelheden van verbindingen en oplossingen. De maagsonde hieronder beschreven procedure maakt het mogelijk voor de orale aflevering van de precieze omvang van de oplossing betrouwbaar, veilig en efficiënt op volwassen zebravissen.
Abstract
De zebravis is een belangrijk geworden in vivo model in het biomedisch onderzoek. Effectieve methoden moeten worden ontwikkeld en gebruikt om verbindingen of agenten leveren oplossingen voor wetenschappelijk onderzoek. Huidige methoden voor het toedienen van verbindingen oraal aan volwassen zebravissen zijn onjuist van de variabiliteit van de vrijwillige consumptie door de vis. Een maagsonde procedure werd ontwikkeld om precieze hoeveelheden van infectieuze agentia te leveren bij de zebravis voor studie in het biomedisch onderzoek. Volwassen zebravissen meer dan 6 maanden oud werden verdoofd met 150 mg / L van gebufferde MS-222 en gavaged met 5 pl oplossing met flexibele katheter implantatie slang bevestigd aan een cut 22-G naald. De flexibele buis werd neergelaten in de mondholte van de zebravis tot het uiteinde van de buis gestrekt boven de kieuwen (ca. 1 cm). De oplossing werd vervolgens langzaam geïnjecteerd in het darmkanaal. Deze methode is effectief 88% van de tijd, met vis herstellen uneventfully. Dezeprocedure is ook efficiënt als een persoon kan 20-30 vissen een maagsonde in een uur. Deze methode kan worden gebruikt om precies te beheren middelen voor infectieziekten studies of studies van andere verbindingen in volwassen zebravissen.
Introduction
Huidige methoden voor het toedienen van verbindingen oraal aan zebravis het toedienen van verbindingen top-bekleed op voer, gemengd in gelatine diëten 1, bioencapsulated in Artemia 2, gemengd met lipide ingekapselde diëten 3, waxspray kralen 4 en via gluten-gebaseerde diëten. 5 Beperkingen van deze methoden van orale toediening omvatten hoge uitloogsnelheden en onvolledige of onvoorspelbare verbinding consumptie door de individuele vissen. Deze variabelen zijn problematisch omdat de besmettelijke ziekte in studies, het kennen van de infectieuze dosis toegediend aan de vis kan zijn van cruciaal belang voor studiesucces. Ook heeft vorige werk aangetoond dat bepaalde verbindingen toegediend in waterbaden toxische laesie aan kieuwen zebravis voordat de intestinale effecten die kunnen worden onder onderzoek plaatsvinden. 6
Maagsonde is een standaard methode die wordt gebruikt in andere proefdier is om precieze hoeveelheden van een product toedienen met aknown concentratie voor de studie in biomedisch en farmaceutisch onderzoek. Pas sinds kort hebben methoden voor gavaging zebravis is in de literatuur beschreven. Een techniek beschreven twee personen onder toepassing van een 24-G katheterschacht bevestigd aan een 2-20 ul pipet 5 pl oplossing te leveren. 7 De beschreven werkwijze had een sterftecijfer van 8,7% en 39% op de eerste en tweede proef, respectievelijk meeste sterfte werd toegeschreven aan zwangere vrouwen. De tweede maagsonde beschreven techniek gebruikt stompe getipt maagsonde spuiten tot 5 pl oplossing voor medakas (Oryzias latipes). 8 Informatie over de sterfte was niet voorzien en de exacte proces van het uitvoeren van de maagsonde werd niet beschreven toedienen. Volgens de Canadese Raad over Animal Care en het Laboratorium zebravis, tot 1% van de vis lichaamsgewicht kan worden toegediend via een maagsonde. 9,10 Ons doel was om een herhaalbare, veilige en efficiënte methode voor het leveren van nauwkeurige volumes com ontwikkelenpond mondeling naar volwassen zebravissen van beide geslachten en in alle fasen van de broedperiode. Deze procedure geschikt is voor een studie die nauwkeurige orale dosering van een verbinding noodzakelijk zijn.
Protocol
Representative Results
Discussion
Betekenis
Deze techniek is een verbetering en biedt een aantal voordelen ten opzichte van de twee eerder beschreven technieken gavaging volwassen zebravissen. Ten eerste, het gebruik van een spons om de vis te beperken kan een persoon om de procedure uit te voeren, in tegenstelling tot een eerder beschreven techniek waarbij twee mensen. 7 tweede katheter implantatie slang flexibeler dan intraveneuze katheters, die kunnen helpen bij het minimaliseren secundaire trauma door tegen…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
De Rockefeller University Comparative Bioscience Center steun verleend aan dit project. Wij danken Janelle Monnas voor technische ondersteuning.
Materials
| Equipment | |||
| A sponge | |||
| 1-cc luer lock syringe | Becton Dickinson & Co | ||
| 22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut) | Braintree Scientific, Inc. | ||
| 1 22-G needle (cut, if needed) | Becton Dickinson & Co | ||
| pH meter | Hanna probe | ||
| 1 scalpel blade | |||
| [header] | |||
| Reagent/Material | |||
| MS-222 (Finquel) | Argent Laboratories |
References
- Royes, J. -. A. B., Chapman, F. . Preparing Your Own Fish Feeds. , (2009).
- Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. Standardization of the bioencapsulation of enrofloxacin and oxytetracycline in Artemia fransciscana Kellogg. Aquaculture. 196, 1-12 (1906).
- Langdon, C. Microparticle types for delivering nutrients to marine fish larvae. Aquaculture. 227, 259-275 (2003).
- Langdon, C., Nordgreen, A., Hawkyard, M., Hamre, K. Evaluation of wax spray beads for delivery of low-molecular weight, water soluble nutrients and antibiotics to Artemia. Aquaculture. 284, 151-158 (2008).
- Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. A Novel Protocol for the Oral Administration of Test Chemicals to Adult Zebrafish. Zebrafish. 8, 203-210 (2011).
- Goldsmith, J. R., Jobin, C. Think Small: Zebrafish as a Model System of Human pathology. Journal of Biomedicine and Biotechnology. , (2012).
- Tysnes, K. R., Jorgensen, A., Poppe, T., Midtlyng, P. J., Robertson, L. J. Preliminary expermients on use of zebrafish as a laboratory model for Giardia duodenalis infection. Acta Parasitologica. 57, 1-6 (2012).
- Marie, B., Huet, H., et al. Effects of a toxic cyanobacterial bloom (Planktothris agardhii) on fish: Insights from histopathological and quantitative proteomic assessments following the oral exposure of medaka fish (Oryzias latipes). Aquatic Toxicology. 114-115, 39-48 (2012).
- Canadian Council on Animal Care. . CCAC guidelines on: the care and use of fish in research, teaching and testing. , (2005).
- Harper, C., Lawrence, C. . The Laboratory Zebrafish. , (2011).
- De Tolla, L. J., Srinivas, S., et al. Guidelines for the Care and Use of Fish in Research. ILAR Journal. 37 (4), (1995).
- Topic Popovic, N., Strunjak-Perovic, I., et al. Tricaine methane-sulfonate (MS-222) application in fish anaesthesia. Journal of Applied Ichthyology. 28, 553-564 (2012).
- Field, H. A., Kelley, K. A., Martell, L., Goldstein, A. M., Serluca, F. C. Analysis of gastrointestinal physiology using a novel intestinal transit assay in zebrafish. Neurogastroenterology & Motility. 21, 304-312 (2009).
