Method Article

Gavage poisson zèbre pour adultes

DOI:

10.3791/50691

August 11th, 2013

In This Article

Summary

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L'utilisation croissante de poisson zèbre comme modèle animal nécessite le développement de méthodes efficaces pour la livraison de quantités connues de composés et des solutions. La procédure décrite ci-dessous permet de gavage pour l'administration orale de volumes précis de solution fiable, sûre et efficace pour le poisson zèbre adulte.

Abstract

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Le poisson zèbre est devenu un important modèle in vivo pour la recherche biomédicale. Des méthodes efficaces doivent être développées et utilisées pour délivrer des composés ou des agents dans les solutions pour la recherche scientifique. Les méthodes actuelles d'administration de composés oralement au poisson zèbre adultes sont inexacts en raison de la variabilité de la consommation volontaire par les poissons. Une procédure gavage a été développé pour fournir des quantités précises d'agents infectieux à poisson-zèbre pour l'étude dans la recherche biomédicale. Poisson zèbre adulte de plus de 6 mois ont été anesthésiés avec 150 mg / L de tampon MS-222 et gavées avec 5 pi de solution en utilisant un tube de l'implantation par cathéter flexible attaché à une coupe de pointe de l'aiguille de 22 G. Le tube flexible a été abaissé dans la cavité buccale du poisson zèbre jusqu'à ce que la pointe du tube étendue au-delà des branchies (environ 1 cm). La solution a ensuite été injecté lentement dans le tractus intestinal. Cette méthode a été efficace 88% du temps, avec des poissons récupération sans incident. Cetteprocédé est également efficace comme une personne peut gavage 20-30 poisson en une heure. Cette méthode peut être utilisée pour administrer précisément agents infectieux pour les études sur les maladies, ou des études d'autres composés chez le poisson zèbre adulte.

Introduction

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Les méthodes actuelles d'administration de composés oralement au poisson zèbre comprennent des composés qui administrent top couché sur alimentation, mélangés à la ration de gélatine 1, bioencapsulated dans de la saumure de crevettes 2, mélangés avec lipidiques régimes encapsulées 3, cire perles de pulvérisation 4 et via des régimes à base de gluten. 5 Limites de ces modes d'administration par voie orale comprennent les taux de lessivage élevés et la consommation incomplète ou imprévisible composé de poisson. Ces variables sont problématiques parce que dans les études sur les maladies infectieuses, sachan....

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Protocol

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1. Préparation de la solution anesthésique

  1. Préparer une solution de 150 mg / L de MS-222 dans de l'eau du système soit à partir d'une solution mère ou de la forme pulvérulente.
  2. Vérifier le pH à l'aide d'un pH-mètre.
  3. Tampon avec du bicarbonate de sodium que nécessaire jusqu'à ce que le pH est compris entre 7-7,5.
  4. Préparer un réservoir d'eau de système libre de MS-222 pour le poisson à récupérer po Le temps de récupération est généralement inférieur à 1 min.

2. Préparation de l'appareil Gavage

  1. Couper le 22-G implantation tuyau transparent à un peu plus de ....

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Results

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Les deux sexes de poissons, y compris les femelles gravides ont été gavés avec succès (Figure 1). Une procédure succès prend moins d'une minute sans liquide vu sortant des ouïes ou la bouche. Le tube pénètre facilement, sans force, sans artérielle observée lors du retrait du cathéter. La procédure est rapide, ce qui nécessite environ 10 min de gavage de 3 à 4 poissons, avec une moyenne de 30-45 secondes par poisson.

Le poisson zèbre ne doit pas être par gavage avec plus de 5.......

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Discussion

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Importance

Cette technique est une amélioration et offre plusieurs avantages par rapport aux deux techniques décrites précédemment pour gavage poisson zèbre adulte. Tout d'abord, l'utilisation d'une éponge pour retenir le poisson permet à une personne d'effectuer la procédure, par opposition à une technique décrite précédemment nécessitant deux personnes. 7 Deuxièmement, les tubes de l'implantation par cathéter est plus souple que cathéters intraveineux, ce qui pe.......

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Disclosures

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Les auteurs déclarent qu'ils n'ont aucun intérêt financier concurrents.

Acknowledgements

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Le Centre universitaire de Bioscience comparatif Rockefeller apporté son soutien à ce projet. Nous remercions Monnas Janelle pour l'assistance technique.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Equipment
A éponge
1-cc luer lock seringueBecton Dickinson Co
22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut)Braintree Scientific, Inc.
1 aiguille 22-G (coupée, si nécessaire)Becton Dickinson Co
pH mètre Sonde
1 lame
[en-tête]
Reagent/Material
MS-222 (Finquel)Argent Laboratories
Hanna de scalpel

References

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  1. Royes, J. -A. B., Chapman, F. Preparing Your Own Fish Feeds. , Department of Fisheries and Aquatic Sciences, Florida Cooperative Extension Service, Insitute of Food and Agricultural Sciences, University of Florida. (2009).
  2. Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. Standardization of th....

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Zebrafish GavageOral AdministrationAnesthetic MS 222Flexible CatheterSolution InjectionFish RecoveryInfectious Disease StudiesCompound DeliverySuccess Rate MonitoringApparatus Preparation

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