Transabdominal Ultralyd til graviditetsdiagnose i Reeves 'Muntjac Deer
Summary
Transabdominal ultralyd beskrives som et effektivt, noninvasive middel til vurdering af reproduktiv status i Reeves ‘muntjac hjorte. Disse metoder kan bruges til at opnå tidlig graviditetsdiagnose og til at evaluere fosterets levedygtighed. Fremtidige anvendelser af denne teknik omfatter skøn over svangerskabsalder og virkninger af modersygdomme på fostrets udvikling.
Abstract
Reeves’ muntjac hjorte (Muntiacus reevesi) er en lille cervid art hjemmehørende i Sydøstasien, og er i øjeblikket ved at blive undersøgt som en potentiel model for prion sygdom transmission og patogenese. Vertikal transmission er et interesseområde blandt forskere, der studerer smitsomme sygdomme, herunder prionsygdom, og disse undersøgelser kræver effektive metoder til evaluering af virkningerne af moderens infektion på reproduktiv ydeevne. Ultralydsundersøgelse er et veletableret værktøj til diagnosticering af graviditet og vurdering af fostersundhed hos mange dyrearter1-7, herunder flere arter af opdrættede cervids8-19, men denne teknik er ikke beskrevet i Reeves ‘muntjac hjorte. Her beskriver vi anvendelsen af transabdominal ultralyd til at opdage graviditet i muntjac gør, og til at evaluere fostervækst og udvikling i hele svangerskabsperioden. Ved hjælp af denne procedure blev gravide dyr identificeret så tidligt som 35 dage efter doe-buck parring, og dette var et effektivt middel til sikkert at overvåge graviditeten med jævne mellemrum. Fremtidige mål for dette arbejde vil omfatte etablering af normale føtalmålingsreferencer til vurdering af svangerskabsalder, bestemmelse af teknikkens følsomhed og specificitet til diagnosticering af graviditet på forskellige stadier af svangerskabet og identifikation af variationer i fostervækst og udvikling under forskellige eksperimentelle forhold.
Introduction
Ultralydsundersøgelse er en velbeskrevet metode til graviditetsdiagnose hos kvæg1, får2,3,geder 4,heste5, ledsagerdyr6,7og andre husdyrarter. Denne billeddannelse modalitet er også blevet identificeret som et værdifuldt redskab til graviditet afsløring og fosteralder skøn i flere arter af fangenskab livmoderhalskræft, herunder dådyr8-11, kronhjorte12-16, Hokkaido sika hjorte17, og rensdyr18,19. I mange tilfælde har ultralyd produceret højere nøjagtighedsrater end andre mekanismer til graviditetsdetektion, såsom serumprogesteron eller graviditetsrelateret glycoproteinanalyse9,18. Desuden kan ultralydsvisualisering af forplantningskanalen give yderligere oplysninger om fosterets levedygtighed, svangerskabsalder og identifikation af udviklingsmæssige abnormiteter, som ellers ville være vanskelige at vurdere. Nytten af ultralyd til evaluering af reproduktiv status tyder på, at denne metode bør tilpasses andre arter, hvor der anvendes aktive avlsprogrammer.
Reeves ‘ muntjac hjorte (Muntiacus reevesi) er en lille cervid arter hjemmehørende i Sydøstasien20. Mens disse dyrs reproduktionscyklus ikke er godt karakteriseret i deres oprindelige territorier, har undersøgelser af vildtlevende populationer i dele af det sydlige England forbedret forståelsen af deres avlsmønstre20. I modsætning til de fleste cervids, Reeves ‘muntjac synes at avle året rundt, uden tilsyneladende sæsonbestemt fawning toppe20-22. Kvindelige muntjac typisk føder en enkelt fawn efter en 210-dages drægtighedsperiode, og pålideligt indtaste en postpartum østrus inden for 24 timer20-22. Er det ikke undfange i løbet af denne postpartum periode vil vende tilbage til østrus ca 24-25 dage senere20. I fangenskab situationer, er reproduktion typisk opnås ved boliger gør med en eller flere intakte mandlige. Dette system giver tilfredsstillende undfangelsesrater og kræver kun få tekniske færdigheder for personalet, uanset hvor nøjagtige yngledatoer er vanskelige, hvis ikke umulige, at bestemme.
Muntjac er almindeligt anvendt i cytogenetiske undersøgelser på grund af den brede vifte af diploid kromosom numre og høj grad af karyotypic diversificering blandt de forskellige arter23. Disse dyr undersøges også i øjeblikket som en model for prionsygdomspatogenese og overførsel med særlig interesse i studiet af vertikal overførsel af kronisk spildsygdom (CWD) i livmoderhalsen. Muntjac’s betydning for en række forskellige forskningsapplikationer tyder på, at der bør indføres forbedrede reproduktive teknologier som supplement til de nuværende undersøgelsesprocedurer. Specifikt kan ikke-invasive mekanismer til vurdering af drægtighedsperioden potentielt belyse kritiske variationer i reproduktiv ydeevne og fostervækst og udvikling under forskellige eksperimentelle forhold. Desuden vil udviklingen af fostrets målingsreferencer i realtid være potentielt værdifuld i vurderingen af svangerskabsalderen i situationer, hvor yngledatoer ikke kan bestemmes. Tidligere undersøgelser har beskrevet mekanismer til brug af føtale målinger, såsom crown-rump længde (CRL), brystdybde (CD), og hovedlængde (HL) til at estimere den omtrentlige fase af svangerskabet i cervid arter11-14, 16,17. Derudover har nogle af disse undersøgelser også etableret retningslinjer, der beskriver, hvornår specifikke udviklingsmæssige milepæle, såsom skeletmineralisering eller fosterhjerte, kan identificeres8-19. Mens disse data kan være nyttige til at hjælpe guide reproduktiv ultralyd analyse i muntjac, de fleste af de andre cervid arter undersøgt har meget større kropsstørrelse og længere svangerskabsperioder, reducere translationel værdi af disse undersøgelser for muntjac applikationer.
Protokollen er skitseret her beskriver transabdominal ultrasonografi af den kvindelige muntjac med henblik på diagnosticering og overvågning af graviditet. Vellykket udførelse af denne protokol kan lette tidlig graviditet påvisning og evaluering af fostervækst og udvikling. Denne teknik har værdifulde anvendelser i udførelsen af undersøgelser, der undersøger reproduktion, i livmoderudvikling eller lodret overførsel af smitsomme sygdomme i en lille cervidmodel og kan også være nyttig til kliniske formål i fangenskab avlsoperationer.
Protocol
Representative Results
Discussion
Denne protokol beskriver anvendelsen af transabdominal ultrasonografi til graviditetsdiagnose i Reeves ‘muntjac hjorte. I overensstemmelse med andre ultralyd undersøgelser, passende udstyr og tekniske færdigheder er afgørende for en vellykket reproduktiv undersøgelse af muntjac doe. Omhyggelig gennemgang af grundlæggende pattedyr anatomi, de fysiske principper for diagnostisk ultralyd, og den typiske ultralyd udseende abdominal indvolde vil støtte i reduktionen af fejl diagnoser. Desuden er valg af egnede transduce…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Forfatterne ønsker at takke Jeanette Hayes-Klug og Kelly Anderson for forvaltningen af muntjac koloni, Dr. Alan Young for at indføre os til muntjac og Mr. Cleve Tedford af Cervid Solutions Inc. for at give frø muntjac for dette projekt. Dette arbejde blev støttet af NIH-tilskud R01AI093634.
Materials
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
| Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
| Table 2 Equipment | |||
| Name of Equipment | Company | Catalog Number | Comments |
| V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
| Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
| Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
| 5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
| 3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
| 22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
References
- White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle. Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).
- Sergeev, L., et al. Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age. Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).
- Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes. Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).
- Lee, Y., et al. Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats. J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).
- Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography. J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).
- Lopate, C. Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review. Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).
- Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens. Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).
- Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography. Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).
- Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama). Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).
- Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama). J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).
- Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer. Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).
- White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning. Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).
- Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).
- Wilson, P. R., Bingham, C. M. Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning. Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).
- Revol, B., Wilson, P. R. Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer. Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).
- Revol, B., Wilson, P. R. Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography. Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).
- Yanagawa, Y., et al. Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy. J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).
- Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer. Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).
- Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus). Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).
- Chapman, N. G., Harris, S. Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves’ muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence. J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).
- Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. The periods of conception and parturition in feral Reeves’ muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals. J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).
- Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves’ muntjac (Muntiacus reevesi). J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).
- Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).
- Nyland, T. G., Mattoon, J. S. . Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 19-29 (2002).
- Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B. J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).
