Summary

Ecografia transabdominale per la diagnosi di gravidanza nel cervo Muntjac di Reeves

Published: January 07, 2014
doi:

Summary

L’ecografia transabdominale è descritta come un mezzo efficace e non invasivo per valutare lo stato riproduttivo nel cervo muntjac di Reeves. Questi metodi possono essere utilizzati per ottenere la diagnosi precoce della gravidanza e per valutare la vitalità fetale. Le applicazioni future di questa tecnica includono la stima dell’età gestazionale e gli effetti della malattia materna sullo sviluppo fetale.

Abstract

I cervi muntjac di Reeves(Muntiacus reevesi)sono una piccola specie cervide originaria del sud-est asiatico e sono attualmente in fase di studio come potenziale modello di trasmissione e patogenesi della malattia da prioni. La trasmissione verticale è un’area di interesse tra i ricercatori che studiano le malattie infettive, compresa la malattia da prioni, e queste indagini richiedono metodi efficienti per valutare gli effetti dell’infezione materna sulle prestazioni riproduttive. L’esame ultrasonografico è uno strumento consolidato per diagnosticare la gravidanza e valutare la salute fetale in moltespecie animali 1-7, tra cui diverse specie di cervidi d’allevamento8-19, tuttavia questa tecnica non è stata descritta nel cervo muntjac di Reeves. Qui descriviamo l’applicazione di ultrasuoni transabdominali per rilevare la gravidanza in muntjac fa e per valutare la crescita fetale e lo sviluppo durante il periodo gestazionale. Utilizzando questa procedura, gli animali in gravidanza sono stati identificati già 35 giorni dopo l’accoppiamento doe-buck e questo era un mezzo efficace per monitorare in sicurezza la gravidanza a intervalli regolari. Gli obiettivi futuri di questo lavoro includeranno la definizione di normali riferimenti di misurazione fetale per la stima dell’età gestazionale, la determinazione della sensibilità e della specificità della tecnica per la diagnosi della gravidanza in varie fasi della gestazione e l’identificazione di variazioni nella crescita e nello sviluppo fetale in diverse condizioni sperimentali.

Introduction

L’esame ultrasonografico è un metodo ben descritto di diagnosi di gravidanza neibovini 1,pecore 2,3,capre 4,cavalli 5,animali dacompagnia 6,7e altre specie animali domestiche. Questa modalità di imaging è stata anche identificata come uno strumento prezioso per il rilevamento della gravidanza e la stima dell’età fetale in diverse specie di cervidi incattività, tra cui daini 8-11,cervi rossi 12-16,cervi sika Hokkaido17e renne18,19. In molti casi, l’ultrasonografia ha prodotto tassi di precisione più elevati rispetto ad altri meccanismi di rilevamento della gravidanza, come il progesterone sierica o l’analisi della glicoproteina associata allagravidanza 9,18. Inoltre, la visualizzazione ultrasonografica del tratto riproduttivo può fornire ulteriori informazioni riguardanti la vitalità fetale, l’età gestazionale e l’identificazione delle anomalie dello sviluppo che altrimenti sarebbero difficili da valutare. L’utilità dell’ultrasonografia per valutare lo stato riproduttivo suggerisce che questa metodologia dovrebbe essere adattata ad altre specie in cui vengono utilizzati programmi di riproduzione attivi.

I cervi muntjac di Reeves(Muntiacus reevesi)sono una piccola specie di cervide originaria del sud-est asiatico20. Mentre il ciclo riproduttivo di questi animali non è ben caratterizzato nei loro territori nativi, gli studi sulle popolazioni selvatiche in alcune parti dell’Inghilterra meridionale hanno migliorato la comprensione dei loro modelliriproduttivi 20. A differenza della maggior parte dei cervidi, il muntjac di Reeves sembra riprodursi tutto l’anno, senza apparenti picchi diceri stagionali 20-22. Il muntjac femminile in genere dà alla luce un singolo cerbiatto dopo un periodo di gestazione di 210 giorni e entra in modo affidabile in un estro postpartum entro 24ore 20-22. Ciò non concepisce durante questo periodo postpartum tornerà all’estro circa 24-25 giorni dopo20. In situazioni di captive, la riproduzione è tipicamente ottenuta dall’alloggiamento fa con uno o più maschi intatti. Questo sistema produce tassi di concepimento soddisfacenti e richiede poche competenze tecniche per il personale, tuttavia date di riproduzione esatte sono difficili, se non impossibili, da determinare.

I muntjac sono comunemente usati negli studi citogenetici a causa dell’ampia gamma di numeri cromosomici diploidi e dell’alto tasso di diversificazione cariotipica tra le diversespecie 23. Questi animali sono attualmente allo studio anche come modello di patogenesi e trasmissione della malattia da prione, con particolare interesse posto sullo studio della trasmissione verticale della malattia da sprecare cronica (CWD) nei cervidi. L’importanza del muntjac in una serie di diverse applicazioni di ricerca suggerisce che dovrebbero essere stabilite tecnologie riproduttive migliorate per integrare le attuali procedure investigative. In particolare, i meccanismi non invasivi per valutare il periodo gestazionale potrebbero potenzialmente chiarire le variazioni critiche nelle prestazioni riproduttive e nella crescita e sviluppo fetale in diverse condizioni sperimentali. Inoltre, lo sviluppo di riferimenti di misurazione fetale in tempo reale sarebbe potenzialmente prezioso per stimare l’età gestazionale in situazioni in cui le date di riproduzione non possono essere determinate. Studi precedenti hanno descritto meccanismi per l’uso di misurazioni fetali, come la lunghezza della groppa della corona (CRL), la profondità toracica (CD) e la lunghezza della testa (HL) per stimare lo stadio approssimativo di gestazione nella specie cervida11-14, 16,17. Inoltre, alcuni di questi studi hanno anche stabilito linee guida che descrivono quando specifiche pietre miliari dello sviluppo, come la mineralizzazione scheletrica o il battito cardiaco fetale,possono essere identificate 8-19. Mentre questi dati possono essere utili per aiutare a guidare l’analisi degli ultrasuoni riproduttivi nel muntjac, la maggior parte delle altre specie di cervidi studiate hanno dimensioni corporee molto più grandi e periodi gestazionali più lunghi, riducendo il valore trascizionale di questi studi per applicazioni muntjac.

Il protocollo qui delineato descrive l’ultrasonografia transabdominale del muntjac femminile ai fini della diagnosi e del monitoraggio della gravidanza. L’esecuzione riuscita di questo protocollo può facilitare il rilevamento e la valutazione precoce della crescita e dello sviluppo fetale. Questa tecnica ha preziose applicazioni nello svolgimento di studi che studiano la riproduzione, nello sviluppo utero o la trasmissione verticale di malattie infettive in un piccolo modello cervice e può anche essere utile per scopi clinici nelle operazioni di riproduzione in cattività.

Protocol

1. Preparazione procedurale Tutte le procedure sugli animali descritte sono state riviste e approvate dall’Institutional Animal Care and Use Committee della Colorado State University, un’associazione per la valutazione e l’accreditamento della cura degli animali di laboratorio (AAALAC), istituzione accreditata Intl.. Prima dell’esame, immobilizzare gli animali utilizzando adeguati protocolli di sedazione o anestesia per fornire rilassamento e consentire un posizionamento appropriato….

Representative Results

Utilizzando il protocollo qui descritto, la gravidanza può essere diagnosticata e monitorata nel cervo muntjac di Reeve con tecniche minimamente invasive. Il primo momento in cui la gravidanza poteva essere rilevata dagli autori era di circa 35 giorni dopo il comportamento di accoppiamento osservato. Nelle prime fasi della gestazione, la gravidanza è stata diagnosticata visualizzando un utero pieno di liquidi identificato come uno spazio anecoico nell’addome caudale. All’interno dell’utero, …

Discussion

Questo protocollo descrive l’applicazione dell’ultrasonografia transabdominale per la diagnosi di gravidanza nel cervo muntjac di Reeves. Coerentemente con altri studi ecografici, le attrezzature appropriate e la competenza tecnica sono indispensabili per un esame riproduttivo riuscito della causa muntjac. Un’attenta revisione dell’anatomia di base dei mammiferi, dei principi fisici degli ultrasuoni diagnostici e del tipico aspetto ultrasonografico dei visceri addominali aii contribuirà alla riduzione delle diagnosi err…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Gli autori desiderano ringraziare Jeanette Hayes-Klug e Kelly Anderson per la gestione della colonia muntjac, il Dr. Alan Young per averci presentato il muntjac e il Signor Cleve Tedford di Cervid Solutions Inc. Questo lavoro è stato supportato dalla sovvenzione NIH R01AI093634.

Materials

Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa NADA 135-780
Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) ZooPharm
Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) ZooPharm
Ultrasound contact gel Medline, Mundelein, Illinois MDS092005
Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) Orion Corporation, Espoo, Finland NADA 141-033
Table 2 Equipment
Name of Equipment Company Catalog Number Comments
V-trough (optional) N/A N/A Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough
Electrical clippers or razor blades for hair removal Oster, McMinnville, Tennessee 78005-140
Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound E.I. Medical Imaging, Loveland, CO Ibex Pro
5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array E.I. Medical Imaging, Loveland, CO 290420
3 ml syringes Covidien 1.18E+09
22 G needles Covidien 8.88E+09

References

  1. White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle. Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).
  2. Sergeev, L., et al. Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age. Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).
  3. Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes. Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).
  4. Lee, Y., et al. Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats. J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).
  5. Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography. J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).
  6. Lopate, C. Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review. Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).
  7. Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens. Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).
  8. Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography. Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).
  9. Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama). Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).
  10. Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama). J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).
  11. Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer. Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).
  12. White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning. Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).
  13. Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).
  14. Wilson, P. R., Bingham, C. M. Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning. Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).
  15. Revol, B., Wilson, P. R. Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer. Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).
  16. Revol, B., Wilson, P. R. Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography. Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).
  17. Yanagawa, Y., et al. Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy. J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).
  18. Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer. Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).
  19. Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus). Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).
  20. Chapman, N. G., Harris, S. Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves’ muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence. J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).
  21. Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. The periods of conception and parturition in feral Reeves’ muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals. J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).
  22. Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves’ muntjac (Muntiacus reevesi). J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).
  23. Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).
  24. Nyland, T. G., Mattoon, J. S. . Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 19-29 (2002).
  25. Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B. J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).
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Citer Cet Article
Walton, K. D., McNulty, E., Nalls, A. V., Mathiason, C. K. Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves’ Muntjac Deer. J. Vis. Exp. (83), e50855, doi:10.3791/50855 (2014).

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