Summary

Transabdominal ultraljud för graviditetsdiagnos i Reeves Muntjac Hjort

Published: January 07, 2014
doi:

Summary

Transabdominal ultraljud beskrivs som ett effektivt, icke-invasivt sätt att bedöma reproduktiv status i Reeves muntjac hjort. Dessa metoder kan användas för att uppnå tidig graviditet diagnos och för att utvärdera fetala livskraft. Framtida tillämpningar av denna teknik inkluderar uppskattning av graviditetslängd ålder och effekter av moderns sjukdom på fetala utveckling.

Abstract

Reeves muntjac hjort (Muntiacus reevesi) är en liten hjortdjursart som är infödd i Sydostasien, och undersöks för närvarande som en potentiell modell för överföring av prionsjukdomar och patogenes. Vertikal överföring är ett område av intresse bland forskare som studerar infektionssjukdomar, inklusive prionsjukdom, och dessa undersökningar kräver effektiva metoder för att utvärdera effekterna av moderns infektion på reproduktiv prestanda. Ultrasonografisk undersökning är ett väletablerat verktyg för att diagnostisera graviditet och bedöma fosterhälsa hos mångadjurarter 1-7, inklusive flera arter av odlade hjortdjur8-19, men denna teknik har inte beskrivits i Reeves muntjac hjort. Här beskriver vi tillämpningen av transabdominal ultraljud för att upptäcka graviditet i muntjac gör och att utvärdera fetala tillväxt och utveckling under hela graviditetsperioden. Med hjälp av detta förfarande identifierades dräktiga djur så tidigt som 35 dagar efter doe-buck parning och detta var ett effektivt sätt att säkert övervaka graviditeten med jämna mellanrum. Framtida mål för detta arbete kommer att omfatta fastställande av normala fetala mätreferenser för uppskattning av graviditetslängd ålder, bestämma känslighet och specificitet av tekniken för att diagnostisera graviditet i olika stadier av dräktigheten och identifiera variationer i fetala tillväxt och utveckling under olika experimentella villkor.

Introduction

Ultrasonografisk undersökning är en väl beskriven metod för graviditetsdiagnos hos nötkreatur1,får2,3,getter 4,hästar 5,sällskapsdjur6,7och andra inhemska djurarter. Denna bildframställning modalitet har också identifierats som ett värdefullt verktyg för graviditet upptäckt och fetala ålder uppskattning i flera arter av fångenskap hjortdjur, inklusive dovhjorten8-11,kronhjorten12-16,Hokkaido sika hjort17, ochrenar 18,19. I många fall har ultrasonografi producerat högre noggrannhet än andra mekanismer för graviditet upptäckt, såsom serum progesteron eller graviditet-associerade glykoprotein analys9,18. Dessutom kan ultrasonographic visualisering av reproduktionskanalen ge ytterligare information om fetala livskraft, graviditetslängd ålder och identifiering av utvecklingsmässiga avvikelser som annars skulle vara svårt att bedöma. Nyttan av ultrasonography för utvärdering av reproduktiv status föreslår att denna metod bör anpassas till andra arter där aktiva avelsprogram används.

Reeves muntjac hjort (Muntiacus reevesi) är en liten hjortdjursart som är infödd i sydostasien20. Medan reproduktionscykeln hos dessa djur inte är väl karakteriserad i sina inhemska territorier, har studier av vilda populationer i delar av södra England förbättrat förståelsen för derasavelsmönster 20. Till skillnad från de flesta hjortdjur verkar Reeves muntjac uppfödas året runt, utan några uppenbara säsongsfasadtoppar20-22. Kvinnlig muntjac föder vanligtvis en enda fawn efter en 210-dagars graviditetsperiod och på ett tillförlitligt sätt ange en postpartum estrus inom 24 timmar20-22. Blir det inte gravid under denna postpartumperiod kommer att återvända till estrus cirka 24-25 dagar senare20. I fångenskap situationer uppnås reproduktion vanligtvis genom bostäder gör med en eller flera intakta hanar. Detta system ger tillfredsställande befruktningsgrader och kräver liten teknisk skicklighet för personalen, men exakta avelsdatum är svåra, om inte omöjliga, att bestämma.

Muntjac används ofta i cytogenetiska studier på grund av det stora utbudet av diploidkromosomtal och hög frekvens av karyotypisk diversifiering bland de olikaarterna 23. Dessa djur undersöks för närvarande också som en modell för prionsjukdomspatogenes och överföring, med särskilt intresse för studier av vertikal överföring av kronisk slösande sjukdom (CWD) hos hjortdjur. Muntjacs betydelse i ett antal olika forskningstillämpningar tyder på att förbättrad reproduktiv teknik bör inrättas för att komplettera de nuvarande utredningsförfarandena. Specifikt kan icke-invasiva mekanismer för att bedöma graviditetsperioden potentiellt klargöra kritiska variationer i reproduktiv prestanda och fetala tillväxt och utveckling under olika experimentella förhållanden. Vidare skulle utvecklingen av fostermätningsreferenser i realtid vara potentiellt värdefull för att uppskatta graviditetsåldern i situationer där avelsdatum inte kan fastställas. Tidigare studier har beskrivit mekanismer för att använda fetala mätningar, såsom kron-rumpa längd (CRL), bröstdjup (CD) och huvudlängd (HL) för att uppskatta det ungefärliga dräktighetsstadiet hoshjortdjursarter 11-14, 16,17. Dessutom har vissa av dessa studier också fastställt riktlinjer som beskriver när specifika utvecklingsmässiga milstolpar, såsom skelettmineralisering eller fetala hjärtslag, kan identifieras8-19. Medan dessa data kan vara användbara för att vägleda reproduktiv ultraljudsanalys i muntjac, har de flesta andra studerade hjortdjur mycket större kroppsstorlek och längre graviditetsperioder, vilket minskar översättningsvärdet av dessa studier för muntjac-applikationer.

Protokollet som beskrivs här beskriver transabdominal ultrasonography av kvinnliga muntjac för att diagnostisera och övervaka graviditet. Framgångsrikt utförande av detta protokoll kan underlätta tidig graviditet upptäckt och utvärdering av fetala tillväxt och utveckling. Denna teknik har värdefulla tillämpningar i genomförandet av studier som undersöker reproduktion, in utero utveckling eller vertikal överföring av infektionssjukdomar i en liten cervid modell och kan också vara användbar för kliniska ändamål i fångenskap avel operationer.

Protocol

1. Förberedelse av förfaranden Alla djurförsök som beskrivs har granskats och godkänts av Institutional Animal Care and Use Committee vid Colorado State University, en association för bedömning och ackreditering av laboratoriedjurvård (AAALAC), Intl. ackrediterad institution. Före undersökningen immobilisera djur med lämpliga sederings- eller anestesiprotokoll för att ge avslappning och möjliggöra lämplig positionering. En hanterare håller fast hjorten medan en andra …

Representative Results

Med hjälp av protokollet som beskrivs här kan graviditet diagnostiseras och övervakas i Reeves muntjac hjort med minimalt invasiva tekniker. Den tidigaste tidpunkten att graviditet kunde upptäckas av författarna var cirka 35 dagar efter observerat parningsbeteende. I de tidiga stadierna av dräktigheten diagnostiserades graviditet genom att visualisera en vätskefylld livmoder identifieras som ett anekoiskt utrymme i kaudal buken. Inom livmodern uppträdde det utvecklande embryot som en h…

Discussion

Detta protokoll beskriver tillämpningen av transabdominal ultrasonography för graviditet diagnos i Reeves muntjac rådjur. Överensstämmer med andra ultraljud studier, lämplig utrustning och tekniska färdigheter är absolut nödvändigt för en framgångsrik reproduktiv undersökning av muntjac doe. Noggrann översyn av grundläggande däggdjur anatomi, de fysiska principerna för diagnostiska ultraljud och det typiska ultrasonographic utseendet på buken inälvor kommer att bidra till att minska felaktiga diagnoser…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Författarna vill tacka Jeanette Hayes-Klug och Kelly Anderson för förvaltningen av muntjackolonin, Dr Alan Young för att ha introducerat oss till muntjac och Mr Cleve Tedford från Cervid Solutions Inc. för att ha tillhandahållit frömuntjac för detta projekt. Detta arbete stöddes av NIH-bidrag R01AI093634.

Materials

Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa NADA 135-780
Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) ZooPharm
Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) ZooPharm
Ultrasound contact gel Medline, Mundelein, Illinois MDS092005
Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) Orion Corporation, Espoo, Finland NADA 141-033
Table 2 Equipment
Name of Equipment Company Catalog Number Comments
V-trough (optional) N/A N/A Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough
Electrical clippers or razor blades for hair removal Oster, McMinnville, Tennessee 78005-140
Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound E.I. Medical Imaging, Loveland, CO Ibex Pro
5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array E.I. Medical Imaging, Loveland, CO 290420
3 ml syringes Covidien 1.18E+09
22 G needles Covidien 8.88E+09

References

  1. White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle. Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).
  2. Sergeev, L., et al. Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age. Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).
  3. Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes. Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).
  4. Lee, Y., et al. Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats. J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).
  5. Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography. J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).
  6. Lopate, C. Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review. Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).
  7. Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens. Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).
  8. Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography. Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).
  9. Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama). Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).
  10. Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama). J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).
  11. Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer. Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).
  12. White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning. Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).
  13. Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).
  14. Wilson, P. R., Bingham, C. M. Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning. Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).
  15. Revol, B., Wilson, P. R. Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer. Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).
  16. Revol, B., Wilson, P. R. Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography. Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).
  17. Yanagawa, Y., et al. Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy. J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).
  18. Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer. Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).
  19. Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus). Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).
  20. Chapman, N. G., Harris, S. Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves’ muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence. J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).
  21. Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. The periods of conception and parturition in feral Reeves’ muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals. J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).
  22. Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves’ muntjac (Muntiacus reevesi). J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).
  23. Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).
  24. Nyland, T. G., Mattoon, J. S. . Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 19-29 (2002).
  25. Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B. J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).
check_url/fr/50855?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Walton, K. D., McNulty, E., Nalls, A. V., Mathiason, C. K. Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves’ Muntjac Deer. J. Vis. Exp. (83), e50855, doi:10.3791/50855 (2014).

View Video