Summary

هلسنكي الجرذ المجهرية جانب الجدار تمدد الأوعية الدموية نموذج

Published: October 12, 2014
doi:

Summary

Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

Abstract

النماذج التجريبية تمدد الأوعية الدموية كيسية ضرورية لاختبار خيارات العلاج الجراحي واللف والأجهزة الجديدة قبل أن يتم إدخالها في الممارسة السريرية. وعلاوة على ذلك، هناك حاجة إلى نماذج تجريبية لتوضيح البيولوجيا تمدد الأوعية الدموية المعقدة مما يؤدي إلى تمزق تمدد الأوعية الدموية من كيسية.

وقد أنشئت عدة أنواع مختلفة من نماذج تجريبية لتمدد الأوعية الدموية كيسية في الأنواع المختلفة. كثير منهم، ومع ذلك، تتطلب مهارات خاصة، معدات باهظة الثمن، أو في البيئات الخاصة، الأمر الذي يحد من استخدامها على نطاق واسع. وهناك حاجة إلى نموذج تجريبي بسيط وقوي، وغير مكلفة كأداة موحدة يمكن استخدامها بطريقة موحدة في مختلف المؤسسات.

الفئران المجهرية البطن نموذج جدار الأبهر تمدد الأوعية الدموية يجمع بين إمكانية لدراسة كل استراتيجيات علاجية جديدة اللف والأساس الجزيئي للتمدد الأوعية الدموية في البيولوجيا موحدة وغير مكلفةالطريقة. ويتم حصاد الطعوم موحدة عن طريق الشكل والحجم، والهندسة من الانزلاق الأبهر الصدري فأر المتبرع ومن ثم نقلهم إلى الفئران المتلقي syngenic. تتم خياطة تمدد نهاية إلى جنب مع مستمرة أو توقف 9-0 خيوط النايلون إلى الشريان الأورطي البطني infrarenal.

نقدم الإرشادات الإجرائية خطوة بخطوة، معلومات عن المعدات اللازمة، ومناقشة التفاصيل التشريحية والجراحية الهامة لخلق المجهرية الناجح لجدار الأبهر البطني تمدد الأوعية الدموية في الفئران.

Introduction

تمزق في الشريان الدماغي الكيسية يسبب تمدد الأوعية الدموية نزيف يهدد الحياة مما يؤدي إلى السكتة الدماغية، والضرر العصبي الدائم أو الوفاة. تمزق يمكن الوقاية منها عن طريق إما لقطة المجهرية أو تمدد الأوعية الدموية انسداد الأوعية الدموية من الداخل. لم يتم بعد تأسيس العلاج الطبي لمنع نمو وتمدد الأوعية الدموية تمزق.

وهناك حاجة إلى نماذج تجريبية لتمدد الأوعية الدموية كيسية لدراسة علم الأحياء من تمدد الأوعية الدموية الشريانية واختبار الأجهزة واستراتيجيات علاجية جديدة. لهذه الأغراض، تم وضع عدة نماذج مختلفة في أنواع مختلفة، ونشرت 1. وتستخدم نماذج تمدد الأوعية الدموية الكبيرة في الخنازير والكلاب والأرانب ويفضل لاختبار اللف الابتكارات في مجال العمارة تمدد الأوعية الدموية المعقدة 1،2. نماذج الفئران تمدد الأوعية الدموية، من ناحية أخرى، تسمح اختبار الأسئلة البحثية في الأنواع المعدلة وراثيا 3،4 وتسهيل توضيح تمدد الأوعية الدموية في البيولوجيا الخلوية والجزيئيةمستوى أفضل بكثير من الأنواع الكبيرة 1. على الرغم من اللف العابرة للالسباتي ونشر الجهاز عبر الحرقفي يقتصر على الفئران أكبر (> 400-500 ز) والدعامات أصغر من 2.0 ملم و 1.5 ملم وقطرها 5،6، ويمكن أيضا أن توضع الدعامات من خلال الإدراج المباشر في الأبهر البطني قطاع إيواء تمدد الأوعية الدموية التجريبية. العمل السابق باستخدام الفئران المجهرية جدار الأبهر البطني نموذج تمدد الأوعية الدموية أثبتت جدواه في الأجهزة صمي اختبار الرواية واستخدامه في دراسة الأساس الجزيئي للتمدد الأوعية الدموية البيولوجيا 3،7.

العديد من النماذج التجريبية تمدد الأوعية الدموية كيسية المنشورة حاليا تتطلب معدات باهظة الثمن، وبيئات خاصة (مثل غرف العمليات المعقمة مع قدرات التنظير)، الأشعة التداخلية الكفاءة، أو استخدام الأنواع باهظة الثمن. هذه المتطلبات تحد من انتشار استخدام هذه النماذج، وتؤدي إلى استخدام نماذج مختلفة في مختبرات مختلفة، والتي ماكيس مقارنة البيانات والتحليل التلوي من الصعب، إن لم يكن مستحيلا. وهناك حاجة إلى نموذج تجريبي بسيط وقوي، وغير مكلفة كأداة موحدة يمكن استخدامها بطريقة موحدة في مختلف مختبرات من أجل الحصول على نتائج مماثلة من مؤسسات مختلفة. لهذا الغرض، أنشأنا الفئران جدار الشريان الأبهر الشرايين الكيسية نموذج تمدد الأوعية الدموية.

الهدف من هذا التقرير هو تقديم الإرشادات الإجرائية خطوة بخطوة، معلومات عن المعدات اللازمة، ومناقشة الخصائص التشريحية والجراحية الهامة لخلق المجهرية الناجح لجدار البطن تمدد الأوعية الدموية الأبهري في الفئران.

Protocol

ملاحظة: ذكر فئران ويستار (متوسط ​​وزن الجسم: 356 ± 44 غرام؛ 10-14 أسابيع من العمر) كانوا يقيمون في غرفة الحيوان في 22-24 درجة مئوية، واثني عشر ساعة ضوء / دورة الظلام مع حرية الوصول إلى نظام غذائي بيليه، ماء الصنبور العادية وتلقى أيضا الرعاية الإنسانية وفقا للمبادئ التوجيهية ?…

Representative Results

تتألف سلسلة الطيار 14 الفئران. بعد ذلك تم تشغيل ما مجموعه 84 الحيوانات وفقا لبروتوكول المعروضة لعدة مشاريع بحثية بين مارس وسبتمبر 2012. إضافية 29 الحيوانات بمثابة المانحين لترقيع الشرايين كيسية. وأجريت التجارب المتبقية باستخدام الطعوم معاملة ما قبل حصادها وتخزينها من ال…

Discussion

التقدم في فهمنا لعلم الأحياء معقد من الشريان الدماغي الكيسية تمدد الأوعية الدموية يعتمد على تحليل البيانات الوبائية والسريرية، وتستكمل الدراسات المختبرية على عينات من المرضى والعمل التجريبي في النماذج الحيوانية 3،12،13.

ا?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors are solely responsible for the design and conduct of the presented study. Dr. Marbacher was supported by a grant from the Swiss National Science Foundation (PBSKP3-123454). The authors declare no conflict of interests.

Author contributions to the study and manuscript preparation include the following. Conception and design: SM, JM, JF. Acquisition of data: SM, EA, JF. Analysis and interpretation of data: SM, JF, JM. Drafting the article: SM, JF, JM. Critically revising the article: JH, MN. Statistical analysis: SM, JF. Study supervision: JF, JH, MN.

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Medetomidine Any genericon
Ketamin Any genericon
Buprenorphine Any genericon
Phosphate buffered saline
Sodium dodecyl sulfate (0.1%)
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP824G
5-0 non absorbable suture Ethicon Inc., USA 8618G
6-0 non absorbable silk suture B. Braun, Germany C0761060
9-0 nylon micro suture B. Braun, Germany G1118471
Spongostan Ethicon Inc., USA MS0002
Operation microscope Leica , Germany M651
Digital microscope camera Sony, Japan SSC-DC58AP
Standard surgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.4
Microsurgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.5
Vascular clip applicator B. Braun, Germany FT495T
Temporary vascular clamps B. Braun, Germany FT250T
Graph Pad Prism statistical software  GraphPad Software, San Diego, California, USA V 6.02 for Windows

References

  1. Bouzeghrane, F., et al. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).
  2. Marbacher, S., et al. Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. AJNR. American journal of neuroradiology. 32, 772-777 (2011).
  3. Frosen, J., et al. Contribution of mural and bone marrow-derived neointimal cells to thrombus organization and wall remodeling in a microsurgical murine saccular aneurysm model. Neurosurgery. 58, 936-944 (2006).
  4. Marjamaa, J., et al. Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: high-resolution magnetic resonance imaging. at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries. Magn Reson Med. 55, 592-597 (2006).
  5. Oyamada, S., et al. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. The Journal of surgical research. , 166-191 (2011).
  6. Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting. Heart. 91, 393-395 (2005).
  7. Marjamaa, J., et al. Occlusion of neck remnant in experimental rat aneurysms after treatment with platinum- or polyglycolic-polylactic acid-coated coils. Surg Neurol. 71, 458-465 (2009).
  8. . with the support of the NC3Rs. Aseptic Technique in Rodent Surgery. , (2014).
  9. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. Journal of investigative surgery : the official journal of the Academy of Surgical Research. 22, 445-451 (2009).
  10. Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new. , (2011).
  11. Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45, 248-254 (2014).
  12. Frosen, J., et al. Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases. Stroke. 35, 2287-2293 (2004).
  13. Frosen, J., et al. Saccular intracranial aneurysm: pathology and mechanisms. Acta neuropathologica. , 123-773 (2012).
  14. Ysuda, R., Strother, C. M., Aagaard-Kienitz, B., Pulfer, K., Consigny, D. A large and giant bifurcation aneurysm model in canines: proof of feasibility. AJNR Am J Neuroradiol. 33, 507-512 (2012).
  15. Sherif, C., et al. Microsurgical venous pouch arterial-bifurcation aneurysms in the rabbit model: technical aspects. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2011).
  16. Marjamaa, J., et al. High-resolution TOF MR angiography at 4.7 Tesla for volumetric and morphologic evaluation of coiled aneurysm neck remnants in a rat model. Acta Radiol. 52, 340-348 (2011).
check_url/fr/51071?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Marbacher, S., Marjamaa, J., Abdelhameed, E., Hernesniemi, J., Niemelä, M., Frösen, J. The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model. J. Vis. Exp. (92), e51071, doi:10.3791/51071 (2014).

View Video