Summary

הדפנות מפרצת דגם הלסינקי עכברוש Microsurgical

Published: October 12, 2014
doi:

Summary

Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

Abstract

מודלים מפרצת saccular ניסוי הם הכרחיים לבדיקת אפשרויות טיפול כירורגים וendovascular רומן והתקנים לפני שהם הציגו לתוך פרקטיקה קלינית. יתר על כן, יש צורך במודלים ניסיוניים על מנת להבהיר את הביולוגיה מפרצת המורכבת מובילה לקרע של מפרצת saccular.

כמה סוגים שונים של מודלים ניסיוניים לפרצת saccular הוקמו במינים שונים. רבים מהם, לעומת זאת, דורשים כישורים מיוחדים, ציוד יקר, או סביבות מיוחדות, המגביל את השימוש הנרחב שלהם. מודל ניסיוני פשוט, חזק, ולא יקר שדרוש ככלי סטנדרטי שניתן להשתמש באופן אחיד במוסדות שונים.

המודל מפרצת דפנות אב העורקים בבטן עכברוש מייקרו משלב את האפשרות ללמוד שני אסטרטגיות טיפול endovascular רומן והבסיס המולקולרי של ביולוגיה מפרצת בסטנדרטית וזולאופן. שתלי סטנדרטיים באמצעות צורה, גודל, וגיאומטריה נקצרים מאב העורקים החזי יורדים של חולדה תורם ולאחר מכן הושתלו בעכברי נמען syngenic. מפרצת הם נתפרו מקצה לצד עם רציף או קטע 9-0 תפרי ניילון לאב העורקים בבטן infrarenal.

אנו מציגים הוראות נוהל צעד אחר צעד, מידע על ציוד דרוש, ולדון בפרטים אנטומיים וכירורגים חשובים ליצירת מייקרו מוצלחת של מפרצת דפנות אב העורקים בבטן בחולדה.

Introduction

קרע של מפרצת עורק מוח saccular גורם דימום מסכן חיים מוביל לשבץ, נזק נוירולוגים קבוע, או מוות. קרע ניתן למנוע על ידי אחד גזיר מייקרו או חסימת פרצת endovascular. טיפול רפואי למניעת צמיחה מפרצת וקרע טרם הוקם.

מודלים ניסיוניים לפרצת saccular יש צורך ללמוד את הביולוגיה של מפרצת עורקים ולבדיקה של מכשירים טיפוליים חדשניים ואסטרטגיות. למטרות אלה, כמה דגמים שונים במינים שונים פותחו ופורסמו 1. מודלים מפרצת גדולות בחזירים, כלבים, ארנבות ומשמשים רצוי כדי לבדוק את חידושי endovascular באדריכלות מפרצת מורכבת 1,2. מודלים עכבריים מפרצת, ומצד שני, לאפשר בדיקת שאלות מחקר במינים מהונדסים גנטי 3,4 ולהקל על בירור ביולוגיה מפרצת בתאית ומולקולרירמה טובה בהרבה ממינים גדולים יותר 1. למרות שטרנס התרדמה endovascular ופריסת מכשיר טרנס הכסל מוגבלת לחולדות גדולות יותר (> 400-500 גר ') וסטנטים קטנים יותר מ2.0 מ"מ ו1.5 מ"מ קוטר 5,6, יכולים גם להיות ממוקמים סטנטים באמצעות החדרה ישירה לתוך אב העורקים בבטן קטע מחסה מפרצות הניסיוניות. עבודה קודמת באמצעות עכברוש מודל פרצת מייקר בטן דפנות אב העורקים הוכיחה ההיתכנות שלה במכשירי תסחיפי רומן בדיקות והשימוש בו בחקר הבסיס המולקולרי של ביולוגיה מפרצת 3,7.

רבים מהמודלים מפרצת saccular פורסמו כרגע הניסיוניים דורשים ציוד יקר, סביבות מיוחדות (לדוגמא: חדרי ניתוח סטריליים עם יכולות שיקוף), יכולת רדיולוגיה התערבותית, או שימוש במינים יקרים. דרישות אלו מגבילות את השימוש הנרחב במודלים אלה, ולהוביל לשימוש במודלים שונים במעבדות שונות, אשר מ 'akes השוואת נתונים וניתוח-קשה, אם לא בלתי אפשרי. מודל ניסיוני פשוט, חזק, ולא יקר שדרוש ככלי סטנדרטי שניתן להשתמש באופן סטנדרטי במעבדות שונות כדי לקבל תוצאות דומות מהמוסדות שונים. לשם כך, יצרנו מודל מפרצת אב העורקים החולדה דפנות עורקי saccular.

מטרת דו"ח זה היא להציג הוראות נוהל צעד אחר צעד, מידע על ציוד דרוש, וכדי לדון במאפיינים אנטומיים וכירורגים חשובים ליצירת מייקרו מוצלחת של מפרצת דפנות אב העורקים בבטן בחולדה.

Protocol

הערה: חולדות וויסטר, זכר (משקל גוף ממוצע: 356 ± 44 גרם; 10-14 שבועות) שוכנו בחדר של בעלי החיים ב22-24 ° C ו אור שנים עשר שעות ביממה / מחזור כהה עם גישה חופשית לדיאטה גלולה, במים ברז רגילים וגם קיבל טיפול הומני בקנה אחד עם הנחיות מוסדיות. הניסויים היו נבדקו ואושרו על ידי הוועדה לרוו…

Representative Results

סדרת טייס מורכבת 14 חולדות. בהמשך לכך כולל של 84 בעלים חיים פעלו על פי הפרוטוקול שהוצג למספר פרויקטי מחקר בין מרץ לספטמבר 2012. 29 בעלי חיים נוספים שימשו כתורמים לשתלי saccular עורקים. הניסויים שנותרו בוצעו באמצעות שתלי טופל מראש שנקטפו ואוחסנו מניסויים קודמים והשתמשו בחולדו?…

Discussion

התקדמות בהבנה של הביולוגיה המורכבת של מפרצת עורק מוח saccular שלנו תלויה בניתוח של נתונים אפידמיולוגיים וקליניים, כהשלמה מחקרי מעבדה בדגימות מטופל ועבודה ניסויית במודלים של בעלי חיים 3,12,13.

בעלי חיים קטנים כמו החולדות קשורים מ?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors are solely responsible for the design and conduct of the presented study. Dr. Marbacher was supported by a grant from the Swiss National Science Foundation (PBSKP3-123454). The authors declare no conflict of interests.

Author contributions to the study and manuscript preparation include the following. Conception and design: SM, JM, JF. Acquisition of data: SM, EA, JF. Analysis and interpretation of data: SM, JF, JM. Drafting the article: SM, JF, JM. Critically revising the article: JH, MN. Statistical analysis: SM, JF. Study supervision: JF, JH, MN.

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Medetomidine Any genericon
Ketamin Any genericon
Buprenorphine Any genericon
Phosphate buffered saline
Sodium dodecyl sulfate (0.1%)
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP824G
5-0 non absorbable suture Ethicon Inc., USA 8618G
6-0 non absorbable silk suture B. Braun, Germany C0761060
9-0 nylon micro suture B. Braun, Germany G1118471
Spongostan Ethicon Inc., USA MS0002
Operation microscope Leica , Germany M651
Digital microscope camera Sony, Japan SSC-DC58AP
Standard surgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.4
Microsurgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.5
Vascular clip applicator B. Braun, Germany FT495T
Temporary vascular clamps B. Braun, Germany FT250T
Graph Pad Prism statistical software  GraphPad Software, San Diego, California, USA V 6.02 for Windows

References

  1. Bouzeghrane, F., et al. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).
  2. Marbacher, S., et al. Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. AJNR. American journal of neuroradiology. 32, 772-777 (2011).
  3. Frosen, J., et al. Contribution of mural and bone marrow-derived neointimal cells to thrombus organization and wall remodeling in a microsurgical murine saccular aneurysm model. Neurosurgery. 58, 936-944 (2006).
  4. Marjamaa, J., et al. Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: high-resolution magnetic resonance imaging. at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries. Magn Reson Med. 55, 592-597 (2006).
  5. Oyamada, S., et al. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. The Journal of surgical research. , 166-191 (2011).
  6. Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting. Heart. 91, 393-395 (2005).
  7. Marjamaa, J., et al. Occlusion of neck remnant in experimental rat aneurysms after treatment with platinum- or polyglycolic-polylactic acid-coated coils. Surg Neurol. 71, 458-465 (2009).
  8. . with the support of the NC3Rs. Aseptic Technique in Rodent Surgery. , (2014).
  9. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. Journal of investigative surgery : the official journal of the Academy of Surgical Research. 22, 445-451 (2009).
  10. Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new. , (2011).
  11. Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45, 248-254 (2014).
  12. Frosen, J., et al. Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases. Stroke. 35, 2287-2293 (2004).
  13. Frosen, J., et al. Saccular intracranial aneurysm: pathology and mechanisms. Acta neuropathologica. , 123-773 (2012).
  14. Ysuda, R., Strother, C. M., Aagaard-Kienitz, B., Pulfer, K., Consigny, D. A large and giant bifurcation aneurysm model in canines: proof of feasibility. AJNR Am J Neuroradiol. 33, 507-512 (2012).
  15. Sherif, C., et al. Microsurgical venous pouch arterial-bifurcation aneurysms in the rabbit model: technical aspects. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2011).
  16. Marjamaa, J., et al. High-resolution TOF MR angiography at 4.7 Tesla for volumetric and morphologic evaluation of coiled aneurysm neck remnants in a rat model. Acta Radiol. 52, 340-348 (2011).
check_url/fr/51071?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Marbacher, S., Marjamaa, J., Abdelhameed, E., Hernesniemi, J., Niemelä, M., Frösen, J. The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model. J. Vis. Exp. (92), e51071, doi:10.3791/51071 (2014).

View Video