Conception et analyse du comportement de préférence de température et de son rythme circadien chez la drosophile

Résumé

Nous avons récemment identifié une nouvelle drosophile circadienne, le rythme de préférence de température (TPR), dans lequel la température préférée chez les mouches augmente pendant la journée et tombe pendant la nuit. TPR est régulé indépendamment d’une autre sortie circadienne, l’activité locomoteur. Nous décrivons ici la conception et l’analyse de TPR chez la drosophile.

Résumé

L’horloge circadienne régule de nombreux aspects de la vie, y compris le sommeil, l’activité locomoteur et les rythmes de température corporelle (BTR)^1,2. Nous avons récemment identifié une nouvelle sortie circadienne de drosophile, appelée le rythme de préférence de température (TPR), dans lequel la température préférée chez les mouches augmente pendant la journée et tombe pendant la nuit ³. Étonnamment, la TPR et l’activité locomotrice sont contrôlées par des neurones circadiens distincts³. L’activité locomotrice de la drosophile est une production comportementale circadienne bien connue et a fourni de fortes contributions à la découverte de nombreux gènes et mécanismes de l’horloge circadienne des mammifères conservés⁴. Par conséquent, la compréhension de TPR mènera à l’identification des mécanismes circadiens moléculaires et cellulaires jusqu’ici inconnus. Ici, nous décrivons comment effectuer et analyser le test TPR. Cette technique permet non seulement de disséquer les mécanismes moléculaires et neuronaux de la TPR, mais fournit également de nouvelles informations sur les mécanismes fondamentaux des fonctions cérébrales qui intègrent différents signaux environnementaux et régulent les comportements des animaux. En outre, nos données récemment publiées suggèrent que la mouche TPR partage des caractéristiques avec le mammifère BTR³. Les drosophiles sont des ectothermes, dans lesquels la température corporelle est généralement régulée par le comportement. Par conséquent, TPR est une stratégie utilisée pour générer une température corporelle rythmique chez ces mouches^5-8. Nous croyons qu’une exploration plus approfondie de la Drosophile TPR facilitera la caractérisation des mécanismes sous-jacents au contrôle de la température corporelle chez les animaux.

Introduction

La température est un indice environnemental omniprésent. Les animaux présentent une variété de comportements afin d’éviter les températures nocives et d’en rechercher des confortables. La drosophile présente un comportement de préférence de température robuste^6,7. Lorsque les mouches sont libérées dans un gradient de température de 18-32 °C, les mouches évitent les températures chaudes et froides et choisissent finalement une température préférée de 25 °C le matin³. Les capteurs de température chaude sont un ensemble de neurones thermosensoriaux, neurones AC, qui expriment le canal de potentiel de récepteur transitoire de la drosoph....

Protocole

1. Préparation des mouches

1. Expériences light dark (LD)
   1. Élever les mouches dans des incubateurs (25 °C/40-60 % d’humidité relative (HR)) sous des cycles légers de 12 h/foncé de 12 h (LD). L’intensité lumineuse des incubateurs est d’environ 500 à 1 000 lux.
   2. Deux incubateurs sont nécessaires pour compléter les tests de comportement sur une période de 24 heures. Les deux incubateurs doivent avoir une lumière programmable avec des fonctions ON OFF. Ils devraient également avoir des portes solides qui ne sont pas perméables à la lumière(c’est-à-dire pas de verre ou de plexiglas).
      Remarque : Un incubateur doit être ....

Résultats

Un exemple du rythme de préférence de température est illustré à la figure 5. Si la procédure de comportement est effectuée avec succès, les mouches doivent présenter un TPR dans lequel elles préfèrent une température basse le matin et une température plus élevée le soir. L’augmentation de ~1-1,5 °C pendant la journée dans la préférence de température doit être observée au cours de la journée, quel que soit le fond génétique, puisque nous avons montré que w¹¹¹⁸, yw et can.......

Discussion

Ici, nous illustrant les détails de l’appareil comportemental de préférence de température et l’analyse du comportement TPR. La drosophile montre les dispositifs saillants, robustes, et reproductibles de TPR horloge-commandé. Cependant, nos données suggèrent qu’au moins deux facteurs, lumière ambiante et âge, perturbent de manière significative les phénotypes comportementaux de TPR.

Nous observons que la lumière affecte de manière significative la préférence de température chez la.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Bright Lab Jr. Safelight	Amazon	#B00013J8UY	Lumière rouge pour les pièces sombres
	Rain X	SOPUS	Hydrofuge : Appliquez le couvercle en plexiglas
C-Clamp	Home Depot
Température/hygromètre	Fisher	15-077-963
Appareils Peltier	TE Technology, Inc.	HP-127-1.4-1.15-71P
Thermomètre	Fluke	Fluke 52II
Contrôleur de paillasse	Oven Industries	5R6-570-15R et 5R6-570-24R
Sonde de capteur de température	Oven Industries	TR67-32
Générique 480 Watt ATX			alimentation système de refroidissement par ordinateur
MCR220-QP-RES Dual 120 mm Radiateur avec réservoir  ;	Système de refroidissement d’ordinateur	Swiftech
Pompe 12V DC en ligne MCP350	Système de refroidissement d’ordinateur	Swiftech
Refroidisseur de carte graphique MCW50	de refroidissement d’ordinateur	Swiftech
Ventilateur SY1225SL12SH Scythe Kaze-Jyuni	de refroidissement d’ordinateur	PC Crazy

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